Материал: 2_MIKROBIOLOGIYa_temy_5-9_FIZIOLOGIYa_I_IZMENChIVOST_MIKROORGANIZMOV

16

17

2. Изучение методов создания анаэробных условий

Существует несколько методов создания анаэробных условий

физические:

эвакуационно-заместительный (откачивание воздуха с помощью вакуумного насоса из герметически замкнутой емкости, например, анаэростата или анаэробного бокса, с последующей заменой на бескислородную газовую смесь);

посевы специальными методами - «уколом» в столбик агара, который затем заливают вазелиновым маслом; по методам Перетца, Бурри, Вейон-Виньялю и др. (схема 2);

химические: использование автономных анаэростатов - герметичных сосудов из прозрачного пластика с плотно закрывающейся крышкой в комплекте с газогенирирующими пакетами, которые содержат химические соединения, связывающие молекулярный кислород; используются для создания анаэробных или микроаэрофильных условий;

биологические:

посев по методу Фортнера – совместное выращивание микроорганизмов с разным типом дыхания: на один сектор агара засевают культуру аэробов, на другой – анаэробов, края чашки парафинируют. Аэробы при росте поглощают кислород и создают условия для развития анаэробов;

заражение восприимчивых лабораторных животных (например, культивирование лептоспир в организме морских свинок);

смешанные (использование одновременно нескольких методов).

1

Разведения по методу Вейнберга производят с помощью пастеровской пипетки с запаянным концом, которой последовательно переносят культуру анаэробов, выросших в среде Китт-Тароцци, в 3 пробирки со стерильными физ.растворами и три пробирки с расплавленными и остуженными до 45-500С полужидкими агарами с 1% глюкозой.

3. Выделение и идентификация чистых культур микроорганизмов

Выполняется 2-ой этап исследования чистых культур факультативно-анаэробных и облигатно-анаэробной культуры в соответствии с Приложениями 1 и 2.

При описании двух типов колоний факультативно-анаэробных бактерий учитывают отсутствие или наличие пигмента, придающего культуре определенный цвет и оптическую плотность.

Пигменты бактерий могут иметь различный состав (табл.14) и растворимость.

По растворимости пигменты подразделяются на: - жирорастворимые (каротиноидные)

3