определение у энтеробактеий β-лактамаз расширенного спектра действия методом «двойных дисков» по наличию расширенной зоны подавления роста вокруг диска с цефалоспорином 3 поколения напротив диска, содержащего клавулановую кислоту;
выявление дополнительного и модифицированного пенициллиносвязывающего белка стафилококков по резистентности к оксациллину или метициллину;
2)генетические:
Выявляют у микроорганизмов генетические детерминанты, кодирующие плазмидную или хромосомную устойчивость к определенным группам антибиотиков. Тестирование проводится в экспресс-режиме (6-8 часов), без предварительного выделения чистой культуры возбудителя, что очень важно при работе с трудноили длительно культивируемыми видами:
методы на основе ПЦР - разработаны для M.tuberculosis, стафилококков, E.coli, K.pneumoniae, вируса простого герпеса, ВИЧ;
реакция ДНК-ДНК гибридизации (применение ДНК-зондов, выявляющих у
микробов гены резистентности; ДНК-зонды |
метятся радиоактивной, |
люминесцентной или ферментной меткой). |
|
5. Побочные эффекты применения антбиотиков и принципы рациональной антибактериальной терапии.
Использование антибиотиков может привести как к возникновению нежелательных последствий со стороны организма человека, так и к изменению свойств микроорганизмов.
Со стороны организма хозяина могут возникнуть осложнения:
1)токсические реакции:
-гепатотоксическое действие (при использовании тетрациклина, эритромицина и др.);
-нефротоксическое действие (при использовании аминогликозидов);
-нарушение костного скелета и эмали зубов (при действии тетрациклинов);
-поражение органов кроветворения (при действии левомецитина, сульфаниламидов);
-нарушение синтеза витамина К (при использовании цефалоспоринов);
2)дисбиозы (при использовании антибиотиков широкого спектра действия);
3)аллергические реакции (чаще при использовании пенициллинов, цефалоспоринов);
4)иммунодепрессивное состояние:
-угнетение антителообразования (при действии левомицетина);
-подавление фагоцитоза (при действии тетрациклинов).
Изменения микроорганизмов, вызванные антибиотиками:
1)появление атипичных форм микроорганизмов (например, L- форм);
2)формирование антибиотикоустойчивости.
Общие принципы рациональной антибиотикотерапии инфекционных заболеваний I. Микробиологический принцип:
1)забор клинического материала проводят с целью выявления возбудителя заболевания до начала антибиотикотерапии (для бактериологического определения чувствительности возбудителя к антибактериальным препаратам);
2)если была начата эмпирическая химиотерапия, то при получении данных о возбудителе из бактериологической лаборатории выбор препарата может быть
пересмотрен, если возбудитель не чувствителен или мало чувствителен к используемому антибиотику.
II. Фармакологический принцип:
1)доза препарата, путь введения и интервал между ними должен быть таким, чтобы в крови и местах локализации инфекции постоянно поддерживалась концентрация, превышающая минимальную подавляющую (МПК) или минимальную бактерицидную (МБК) в 4-8 раз. При первом введении химиотерапевтических средств используют ударную дозу для более быстрого создания МПК или МБК. Несоблюдение данного принципа приводит к формированию штаммов возбудителей, резистентных к лекарственным средствам;
2)продолжительность лечения должна быть оптимальной, приводить не только к
полному клиническому выздоровлению, но и к полному выведению микробов из организма. Слишком быстрая отмена препарата способствует возникновению и формированию устойчивых штаммов микроорганизмов.
III. Клинический принцип:
1)при назначении препарата учитывают общее состояние больного, возраст, пол, наличие беременности, сопутствующие заболевания;
2)необходимо комбинировать химиотерапевтические средства с другими лекарственными препаратами, которые способствуют повышению иммунологической резистентности организма;
3)целесообразно использовать комбинации препаратов с разными механизмами действия на микроорганизмы;
4)нельзя назначать препараты, оказывающие токсическое действие, направленное на
один орган или систему.
IV. Эпидемиологический принцип:
при подборе антибиотика необходимо знать, к каким препаратам устойчивы микробы в среде, окружающей больного (в отделении, географическом регионе), насколько часто встречаются антибиотикорезистентные штаммы.
Основные правила, соблюдение которых предупреждает развитие антибиотикорезистентности у бактерий:
применять антибиотики строго по показаниям;
избегать их использование с профилактической целью;
через 7-10 дней антибиотикотерапии проводить смену препарата, учитывая, что у микробов существует перекрестная устойчивость к антибиотикам одного класса;
по возможности использовать антибиотики узкого спектра действия;
через определенное время производить смену антибиотика не только в отделении, больнице, но и в регионе;
ограниченно применять антибиотики в ветеринарии;
использовать ингибиторозащищенные антибактериальные препараты.
Тема: Облигатная и факультативная микрофлора тела человека. Дисбактериоз кишечника, принципы лабораторной диагностики. Определение чувствительности микроорганизмов к антибиотикам (продолжение).
План занятия
1.Рассмотрение основных понятий медицинской микроэкологии.
2.Характеристика нормальной микрофлоры тела человека, ее роли для организма и методов изучения.
3.Рассмотрение понятий «дисбиоз», «дисбактериоз кишечника», причин возникновения, степеней, принципов лабораторной диагностики и коррекции.
Методические указания к выполнению практического занятия.
1. Основные понятия медицинской микроэкологии
Медицинская микроэкология – это раздел, изучающий взаимоотношения между организмом человека и микроорганизмами внешней среды (экзомикроэкология), а также с аутомикрофлорой в норме и при патологии (эндомикроэкология).
Известно, что микробная биомасса во много раз превышает сумму биомасс всех остальных живых организмов, обитающих на Земле, где микроорганизмы занимают определенные экологические ниши.
Экологическая ниша - место в природе, в пределах которого данный вид может существовать неограниченно долго. Оно определяется границами выносливости вида по отношению к разным факторам, а также характером связи с другими видами и распределением в пространстве. Взаимоотношения между микроорганизмами в пределах экологической ниши называются симбиозом.
1
В зависимости от типа экологической связи бактериихемоорганотрофы подразделяют на 2 группы:
1)метатрофы, или сапрофиты - развиваются на биоорганических субстратах внешней среды, не нуждаются в организме хозяина (например, ацинетобактерии, псевдомонады, клебсиеллы, легионеллы и др.). При случайном попадании в макроорганизм они способны менять сапрофитический характер существования на паразитический и вызывать заболевания.
2)паратрофы - нуждаются в органических соединениях живого организма хозяина.
Тип экологической связи обусловливает характер отношений между микроорганизмами разных видов в биоценозе. Межвидовые взаимоотношения многообразны и динамичны. Различают три основных типа отношений: симбиоз, нейтрализм и конкуренцию (табл.28).
Симбиоз – форма сосуществования разных видов, при которой партнеры участвуют в урегулировании своих отношений с внешней средой. Симбиоз может проявляться в трех основных формах симбиотических отношений: мутуализм, комменсализм
и паразитизм.
Таблица 28 Типы взаимоотношений между паратрофами и
организмом хозяина
2
|
Типы симбиоза |
|
|
|
Примеры микроорганизмов |
||
1. Мутуализм - взаимовыгодный союз |
|
|
|
||||
|
|
Представители нормальной |
|||||
2. Комменсализм - выгодный для одного |
|
||||||
из партнеров союз, без ущерба для |
|
микрофлоры тела человека |
|||||
другого |
|
|
|
|
|
|
|
3.Паразитизм (антагонистический союз - |
|
|
|||||
микроорганизм наносит |
вред хозяину) |
|
|
||||
|
облигатный, |
при |
котором |
|
риккетсии |
||
|
микроорганизмы могут жить только |
|
хламидии |
||||
|
за счет клеток хозяина, т.к. утратили |
|
вирусы |
||||
|
собственные |
|
метаболические |
|
токсоплазмы и др. |
||
|
процессы |
|
|
|
|
|
|
|
|
при |
котором |
|
легионеллы |
||
факультативный, |
|
|
|||||
|
|
листерии |
|||||
|
микроорганизмы в |
зависимости |
от |
|
|||
|
|
псевдомонады |
|||||
|
внешних условий |
могут |
быть |
как |
|
||
|
|
клебсиеллы и др. |
|||||
|
сапрофитами, так и паразитами. |
|
|
||||
|
|
|
|
||||
2. Характеристика нормальной микрофлоры тела человека, ее роли для организма и методов изучения.
Микроорганизмы, с которыми человек контактирует и сосуществует на протяжении жизни, можно условно разделить на несколько групп:
1)микроорганизмы, более или менее часто выделяемые из организма здорового человека – нормальная микрофлора,
или микробиота;
2)транзиторная микрофлора – группа микроорганизмов, случайно попадающих в тот или иной биотоп здорового человека, не способных к длительному пребыванию в его организме хозяина;
3)возбудители инфекционных заболеваний.
Всвою очередь микробиота может быть разделена на 2 группы:
1)облигатная (резидентная) микрофлора – совокупность видов микроорганизмов, характерных для определенного биотопа здорового человека, постоянно обитающих в нем, чаще
3