хозяйстве |
Культивирование растительных клеток: поверхностные культуры |
||
выращивать ткани и клетки органов растений (напри- |
ке при 40 °С, можно с высокой эффективностью |
||
|
ВВЕДЕНИЕ. Около сорока лет назад стало возможным |
меристемные клетки подвергнуть тепловой обработ- |
|
сельском |
мер, корней или листьев) в виде культуры тканей. |
получать культуры, а затем регенерировать молодые |
|
Обрабатывая такие культуры фитогормонами, можно |
растения, свободные от патогенов и вирусов. Однако |
||
|
|||
|
получить целые растения, способные к воспроизвод- |
эти растения не обладают устойчивостью к возбуди- |
|
|
ству. Культуры растительных клеток используют: |
телям заболеваний и могут быть заново заражены. |
|
в |
1) в фундаментальных исследованиях; 2) для выве- |
Меристемные культуры из виноградной лозы, зем- |
|
дения растений с улучшенными качествами; 3) для |
ляники, картофеля, а также из декоративных расте- |
||
Биотехнология |
|||
получения устойчивых к вирусам декоративных и са- |
ний – гвоздики, лилии и хризантемы – обеспечили |
||
|
|||
|
довых растений; 4) для получения трансгенных |
значительный прогресс садоводческой практики. |
|
|
растений; 5) для сохранения исчезающих растений в |
Объем мирового рынка меристемных культур соста- |
|
|
виде способных к регенерации культур клеток (заро- |
вляет примерно 3 млрд долл. США. |
|
|
дышевая плазма). Из культур растительных клеток |
ГАПЛОИДНЫЕ КУЛЬТУРЫ – это культуры клеток по- |
|
|
также возможно получение препаративных количеств |
ловых органов растений, прежде всего микроспор |
|
|
вторичных метаболитов. |
(пыльцы, тычинок) и мегаспор (яйцеклеток). После |
|
|
МЕТОДЫ. Из органа растения, выращенного в стре- |
культивирования клеток в поверхностной культуре из |
|
|
ильных условиях из семени, выделяют эксплант |
них можно регенерировать неспособное к воспроиз- |
|
|
(ткань) и переносят ее на твердую или жидкую пита- |
ведению гаплоидное растение, содержащее только |
|
|
тельную среду. Большинство клеток и тканей гетеро- |
один набор хромосом. В присутствии ингибитора ми- |
|
|
трофны, поэтому для роста им необходимы источни- |
тоза колхицина или в результате слияния протопла- |
|
|
ки углерода, например глюкоза или сахароза, и |
стов можно регенерировать гомозиготное диплоид- |
|
|
азота – нитрат. Среды, где происходит рост культу- |
ное растение. Для садовода такие растения |
|
|
ры, должны содержать витамины, микроэлементы, |
представляют большой интерес, так как в последую- |
|
|
растительные цитокинины, например кинетин и зеа- |
щих поколениях они имеют точно такие же признаки. |
|
|
тин, и стимуляторы роста – 3-индолилуксусную, |
В настоящее время используют гаплоидные культуры |
|
|
(2,4-дихлорфенокси)уксусную и абсцизовую кисло- |
картофеля, ячменя, рапса, табака и лекарственных |
|
|
ты. В случае труднокультивируемых клеток применя- |
растений. |
|
|
ют специальные сложные среды. Культуры поддер- |
СОМАКЛОНАЛЬНАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ (СИ). При куль- |
|
|
живают в стерильных контролируемых условиях |
тивировании растительных клеток иногда происходят |
|
|
(свет, воздух, температура) в климатических каме- |
случайные генетические изменения – точечные му- |
|
|
рах. По способу культивирования различают каллус- |
тации, потери генов или хромосомные перестройки. |
|
|
ные и суспензионные культуры, а по типу клеток по- |
Все это может приводить к появлению как желатель- |
|
|
лучаемого материала – меристемные и гаплоидные |
ных, так и нежелательных изменений. На основе СИ |
|
|
культуры. |
были получены некоторые сорта томата, картофеля и |
|
|
КАЛЛУСНЫЕ КУЛЬТУРЫ. Каллусом называют не- |
сахарного тростника. |
|
|
оформленную взрослую раневую ткань, которая воз- |
|
|
|
никает в местах выделения эксплантов у растений. |
|
|
|
Каллусы выращивают в чашках с агаром в виде по- |
|
|
|
верхностных культур, после чего они служат исход- |
|
|
|
ным материалом для получения культур недиффе- |
|
|
|
ренцированных омнипотентных растительных клеток. |
|
|
|
Из сравнительно молодых каллусных культур путем |
|
|
|
обработки фитогормонами можно получить нормаль- |
|
|
|
ные полноценные растения. |
|
|
|
СУСПЕНЗИОННЫЕ КУЛЬТУРЫ. Подобно микроорга- |
|
|
|
низмам и животным клеткам, растительные клетки |
|
|
|
можно выращивать в жидкой стерильной питатель- |
|
|
|
ной среде. |
|
|
|
КУЛЬТУРЫ МЕРИСТЕМ. Меристема – это раститель- |
|
|
|
ные стволовые клетки, которые обладают способно- |
|
|
|
стью к неограниченному делению. Их выделяют в |
|
|
|
стерильных условиях в виде вегетативных конусов из |
|
|
174 |
побегов, корней или пазушных почек и культивируют |
|
|
как каллусную или суспензионную культуру. Если |
|
||