Материал: Шмид Р. Наглядная биотехнология и генетическая инженерия

Внимание! Если размещение файла нарушает Ваши авторские права, то обязательно сообщите нам

Предисловие

Биотехнология – междисциплинарная область знания, и в XXI в. она займет ключевые позиции в цикле естественных наук.

Биотехнологам необходимо хорошо знать не только биологию, но и молекулярную генетику и цитологию, генетику и молекулярную медицину, вирусологию, микробиологию и биохимию, технологию производства ферментных препаратов и других биотехнологических производственных процессов. С биоинформатикой и системной биологией тесно связаны компьютерные и информационные технологии. Поэтому неудивительно, что до сих пор не существует кратких и содержательных учебных пособий по биотехнологии, которые охватывали бы эту дисциплину во всем ее многообразии. По каждому из разделов этой книги, например разведение животных и растений, биоинформатика, читатель может найти более полную информацию в специальных, часто многотомных изданиях.

Как показывает мой собственный опыт и многолетний опыт преподавания студентам, новый материал интересно иметь перед собой как целостную картину; это и мотивирует на дальнейшее изучение тысяч деталей, на первый взгляд кажущихся несвязанными.

Предлагаемая читателю книга как раз и есть такое нужное целостное руководство и одновременно это детализированный подробный справочник. Достаточно познакомиться с оглавлением (пивоварение, этиловый спирт, рекомбинантные вакцины, геном человека, протеомика и др.). Каждая тема представлена кратким текстом и понятными иллюстрациями. Для каждой темы приведены ссылки на оригинальную литературу – главы из научных монографий и научные статьи. Принятый в книге подход к подаче материала связан с неизбежным риском чрезмерно краткого изложения, но дает возможность осветить основные положения и продемонстрировать взаимосвязи между разными темами.

Я надеюсь, что мне удалось хотя бы отчасти достичь поставленной цели. Читатель получил исчерпывающий путеводитель в науку биотехнологию для того, чтобы не только ориентироваться в лабиринте терминологии, полной англицизмов, но и, хочется думать, увлечься этой наукой. Большой вклад в подготовку представленного в книге материала внесла Рут Хаммелеле. Она подготовила логически построенные и эстетически выдержанные схемы, придавшие достаточно краткому тексту «второе измерение».

Выходу этой книги в свет, безусловно, весьма способствовали редакторы Барбара Фрундер, Утте Рольфс и Карин Дембовски, которых я рад сердечно поблагодарить за более чем добросовестное исполнение своих обязанностей и очень ценные замечания.

Явыражаю персональную благодарность своим коллегам, которые просматривали материал целых тем или отдельных разделов этой книги и внесли существенные замечания и исправления. Среди них: Макс Рёр (Вена), Франк Эмде (Бонн), Мария-Регина Кула и Герман Зам (Юлих), Ан-Пинг Ценг (Брауншвейг), Фолькер Каше (Гамбург–Гарбург), Петер Дюрре (Ульм), Ульф Шталь, Эдельтрауд Маст-Гер- лах и Дитрих Кнорр (Берлин), Удо Грефе (Йена), Гюнтер Шмидт-Кастнер (Вупперталь), Карл-Хейнц Маурер (Дюссельдорф), Вольфганг Барц и Александр Штайнбюхель (Мюнстер), Фридер Шеллер (Потсдам), Бертольд Хок и Вольфганг Людвиг (Вайенштефан), Рейнхард Кремер (Кёльн), Томас фон Шелль, Ханс-Иоахим Кнакмус, Карл-Генрих Энгессер, Йорг Метцгер, Петер Шойрих, Ульрих Эйзель, Матиас Ройс, Петер Штадлер, Клаус Маух, Кристоф Зилдатк, Михель Тумм и Йозеф Альтенбухнер (Штутгарт), Гельмут Гельдерман, Рольф Клаус, Герд Вебер и Рольф Блайх (Штутгарт–Хохенхайм), Гельмут Улих (Брейзах), Иоахим Зидель, Клаус Валлериус, Антон Хазельбек и Ульрих Бейрендт (Пенцберг), Вольфганг Войллебен и Клаус Шульдт (Тюбинген), Рольф Вернер (Биберах), Виланд Вольф и Андреас Лоренц (Лаупхайм), Франк-Андреас Гункель (Вупперталь), Михель Брёкер (Марбург), Бернард Гауэр, Вольфганг Пресслер и Дитер Йан (Людвигсхафен), Дитер Мангольд и Юлия Шулер (Маннхайм), Франк Цохер и Пауль Хаберманн (Хёхст), Тильманн Шпеллиг (Бергкамен), Дитер Остерхельт, Фридрих Лоттшпайх и Бернд Генсбахер (Мюнхен). В заключение хочу поблагодарить сотрудников института, в котором я работаю, за терпение и понимание, проявленные при ответах на мои бесконечные вопросы; это – Ютта Шмитт, Изабелла Кауфман, Маркус Энцельбергер, Тиль Бахманн и Юрген Плайс.

Ябыл бы удивлен, если несмотря на многостороннюю помощь при написании этой книги, в ней не осталось неясностей и ошибок. Я прошу благосклонных читателей связываться непосредственно со мной при желании высказать свои замечания, указать на неточности и ошибки. Моя электронная почта www.itb.uni-stuttgardt.de/taschenatlas›. При переиздании этой книги я постараюсь учесть все замечания и по возможности улучшить книгу.

Штутгарт, декабрь 2001 Рольф Д. Шмид

5

Предисловие ко 2-му изданию

За пять лет, которые прошли с момента выхода в свет первого издания биотехнология и методы генетической инженерии стремительно развивались. Валовый продукт биоинженерных производств постоянно увеличивается и теперь уже превышает суммарный продукт традиционных производств, основанных на ферментации. За это время объем производства L-глутаминовой кислоты удвоился, достигнув 1,5 млн тонн в год, что связано не только с изменившимися вкусовыми предпочтениями населения, но и с тем, что на мировой рынок вышел Китай. Последовательности многих геномов пока не расшифрованы, хотя для более десяти растений и животных и сотен микроорганизмов они уже известны. Геномный анализ привел к новым открытиям – например, к пониманию роли малых интерферирующих РНК (siRNA). В сочетании с протеомикой и метаболомикой геномный анализ позволил изучать процессы жизнедеятельности организмов в рамках подхода системной биологии. В настоящее время расшифровка генома любого человека оценивается в ~1500 евро. Благодаря геномному анализу стали понятны причины возникновения многих заболеваний, а также процессы старения и нарушения обмена веществ. В медицине уже применяются генетические методы персональной диагностики и генная терапия, на основе анализа генома могут быть сделаны даже рекомендации по питанию.

В последние годы промышленная биотехнология развивается на фоне роста цен на нефть и продолжающейся активной индустриализации нашей планеты.

Увеличение температуры атмосферы вызывает тревогу общества, и для сохранения «космического корабля» под названием «Земля» требуются новые альтернативные источники энергии, а также новые технологии. Биоэтанол и «биодизель» получают из растительного сырья, их используют как топливо. Подобные «белые» биотехнологии имеют большое будущее.

При подготовке второго издания материал книги был полностью переработан и дополнен. Во 2-е издание включены четыре новых раздела: тканевая инженерия, РНК, системная биология и «белая» биотехнология.

Хочу искренне поблагодарить за предоставление ценных материалов о производственных разработках биотехнологов Ваандера Ритхорста (Sandoz), Бернарда Хауэра и Уве Пресслера (BASF), Андреаса Лойхтенбергера (Degussa) и Карлхайнца Маурера (Henkel). За информацию об академических исследованиях я особенно благодарен Сюзане Грэбли (Йена), Сибилле Туде (Штутгарт), Вольфгангу Войллебену (Тюбинген), Матиасу Ройсу, Клаусу Пфиценмайеру и Клаусу Мауху (Штутгарт).

Кроме того, я признателен Рут Хамелеле и Бернарду Вальтеру (Firma epline, Kirchheim o.T.) за превосходный графический и полиграфический дизайн, а также д-ру Роми Кирстен за поддержку со стороны издательства.

Штутгарт, осень 2005 Рольф Д. Шмид

6

Введение

Настоящая книга, построенная, как атлас, предназначена для тех студентов, изучающих биологию, биохимию и биотехнологию, которые хотят получить первые представления о всем многообразии современной биотехнологии. Модули текста и иллюстраций, указатель* и список литературы – все это должно помочь читателю в углубленном изучении предмета. В 143 цветных иллюстрациях содержится информация по различным аспектам биотехнологии и методам генетической инженерии, а сопутствующий текст дополняет и поясняет эти сведения. Для того чтобы облегчить поиск, на поля вынесены заголовки основных тем.

Книга начинается с краткого исторического обзора. Так как биотехнология имеет прикладное (коммерческое) значение, читатель найдет в книге некоторые рыночные показатели. Изложение начинается с разделов, посвященных биотехнологии пищевых продуктов, спиртов, кислот и аминокислот, а затем уже антибиотиков, специальных продуктов, ферментов и, наконец, пекарских и кормовых дрожжей. Описанием очистки сточных вод начинается раздел «Биотехнология и окружающая среда». Затем следует большой раздел «Биотехнология в медицине», в котором изложены сведения о получаемых методами

генетической инженерии препаратах, новейших способах получения эмбриональных и стволовых клеток из эмбрионов и зрелых организмов, возможностях рекомбинантных антител и применении биосенсоров. В следующем большом разделе – «Биотехнология в сельском хозяйстве», описываются современные методы селекции животных и растений.

Вторая половина книги посвящена научным основам биотехнологии и биотехнических методов. Там вы найдете раздел «Основы микробиологии», затем «Основы биотехнологических методов», а также «Молекулярно-генетические методы».

Наконец, следует очень интересный раздел «Тенденции развития», где рассмотрены, например, исследования в области протеомики, системной биологии и «белой» биотехнологии.

В последних разделах обсуждаются вопросы безопасности, этики и экономические аспекты.

Для дальнейшего изучения предлагается обширная литература, сгруппированная в соответствии с основными разделами книги. Помимо этого, имеются ссылки на веб-сайты.

Мне остается лишь пожелать читателям с удовольствием приступить к изучению этой увлекательной области науки и добиться в этом успеха.

* В русском издании имеется указатель микроорганизмов.

7

биотехнологии

Этапы развития биотехнологии

ИСТОРИЧЕСКАЯ СПРАВКА. Наука, которую мы с вами

 

 

называем биотехнологией, ведет свою историю с глу-

 

бокой древности. Вероятно, первыми биотехнологи-

 

ческими открытиями были наблюдения о том, что

История

продукты питания сохраняются продолжительное

шим до нас древним документам, зарождение горо-

 

время в высушенном, засоленном или засахаренном

 

виде, а также о специфическом «божественном»

 

действии сброженных фруктовых соков. По дошед-

 

дов сопровождалось развитием различных ремесел

 

по хлебопечению, пивоварению, виноделию и сыро-

 

варению, а также по выделке кожи. Монастыри За-

 

падной Европы в средние века были центрами ремес-

 

ленничества, поэтому именно там происходило

 

усовершенствование биотехнологических процессов

 

(в частности, виноделия, хлебопечения и пивоваре-

 

ния). Появление крепкого пива вызвало некоторые

 

отступления от строгой жизни по религиозным кано-

 

нам, поскольку во время поста разрешалось пить пи-

 

во. Современная биотехнология берет свое начало с

 

конца XIX в., и на развитие науки очень сильно повли-

 

яли Первая и Вторая мировые войны: ученые активно

 

занимались разработкой новых антибиотиков и спо-

 

собов производства растворителей (что было проди-

 

ктовано военными нуждами). Современная биотехно-

 

логия обязана своими успехами в основном

 

открытиям в биохимии, генетике и клеточной биоло-

 

гии, разработке методов генетической инженерии

 

(1970-е гг.), а также появлению новых направлений,

 

в частности биоинформатики и протеомики. Наблю-

 

даемые темпы развития биотехнологической науки

 

позволяют предположить, что она станет «наукой но-

 

вого тысячелетия».

ПИОНЕРЫ БИОТЕХНОЛОГИИ. Биотехнология – прикладная наука, и многие биотехнологические задачи имеют важное экономическое значение. Французский химик Луи Пастер в 1864 г. доказал, что брожение вызывают микроорганизмы. Чтобы наблюдать за этим процессом, он использовал микроскоп. Предложенные Пастером методы получения чистых культур микроорганизмов и стерилизации питательных сред (пастеризация) заложили основы прикладной микробиологии. Первыми успехами в исследованиях и разработке методов борьбы с патогенными микроорганизмами мы также обязаны Пастеру и его научной школе. В начале ХХ в. немецкий химик Отто Рём и японский ученый Йокиши Такамине предложили использовать для технологических целей ферменты, полученные из отходов мясной промышленности или из культуральной жидкости после культивирования плесневых грибов. Открытие Рёма позволило значительно усовершенствовать процесс выделки кожи (до этого времени в качестве источника ферментов ис-

8пользовали экскременты собак). Введение методов,

разработанных Такамине, ознаменовало переход на новый уровень в технологии производства крахмала

исолода. Успехи биотехнологии впервые получили признание широкой общественности в 1900 г., когда стало очевидным преимущество биотехнологической очистки воды в борьбе с распространением эпидемий. В период Первой мировой войны был сделан целый ряд важнейших открытий. В Германии Карл Нейберг разработал метод получения глицерина из дрожжей; Хаим Вейцман, эмигрировавший из России в Англию, предложил способ производства ацетона, основанный на анаэробной ферментации бактериями рода Clostridium. Ацетон и глицерин служили сырьем при получении взрывчатых веществ (нитроглицерина

икордита), поэтому усовершенствование их производства в военное время имело особенно важное значение. Способ Нейберга и Вейцмана получил широкую известность и по сути стал основой ферментативных технологий. Символичным признанием заслуг Вейцмана стало его избрание первым президентом созданного в соответствии с декларацией А.Д. Бальфура в 1948 г. государства Израиль. В послевоенные годы технология производства ацетона с помощью клеток Clostridium не потеряла своей актуальности; для растворения лака стали широко применять побочный продукт ферментативной реакции 1-бутанол. В 1922 г. Александр Флеминг случайно обнаружил антибактериальное действие пенициллина. Хоуард Уолтер Флори выделил это вещество и впервые применил в медицине. Вторая мировая война способствовала активному поиску и промышленному производству антибиотиков, и к 1950 г. их число превысило 1000. Антибиотики очень широко используются в медицине, в животноводстве и растениеводстве. С 1950 г. благодаря техническим достижениям появилась аналитическая биотехнология: ферменты и антитела стали применяться для высокочувствительного анализа пищевых продуктов и медицинской диагностики. В последние 30 лет в связи с надвигающимся нефтяным кризисом и ввиду неуклонно растущего населения Земли особый интерес вызывает получение из биомассы таких энергоносителей, как этанол и метанол.

Биотехнология – древняя наука

1

3

2

 

 

 

 

 

1 Пивоварение

 

2 Хлебопечение

 

3 Выделка кожи

Древность

Сбраживание соков с получением этанола

 

Получение кисломолочных продуктов и дрожжевого теста

 

Выделка кожи с использованием экскрементов собак

1650

«Орлеанский» способ получения уксусной кислоты

Ок. 1680

Антоний Левенгук впервые наблюдал бактериальные клетки в оптический (световой) микроскоп

1867

Луи Пастер разделил культуры пивных дрожжей и уксуснокислых бактерий

Ок. 1890

Луи Пастер и Роберт Кох разработали первые вакцины

1900

Йокише Такамине использовал α-амилазу в технологических целях

1908

Отто Рём применил животные протеиназы для получения стирального порошка

1916

Хаим Вейцман разработал ферментативный метод получения бутанола и ацетона

С 1920

Получение лимонной кислоты путем ферментативного процесса с помощью Aspergillus niger

1928/29

Александр Флеминг открыл антибактериальное действие пенициллина

1943

Зельман Ваксман выделил стрептомицин

С1949 Микробная трансформация стероидов в промышленных масштабах

С1957 Получение глутаминовой кислоты ферментацией с Corynebacterium glutamicum

С1960 Микробные протеиназы добавляют в стиральные порошки

С1965 Применение микробного реннина в сыроварении

С1970 Полученный ферментативными методами «сироп с повышенным содержанием фруктозы»

 

заменяет сахар в производстве безалкогольных напитков

 

1972/73

Стэнли Коэн и Герберт Бойер разработали стратегию переноса генов с помощью плазмидных

 

 

векторов

 

1975

Цезарь Мильштейн и Георг Келлер получили моноклональные антитела с использованием гибрида

 

С 1977

Производство рекомбинантных белков в бактериальных клетках

 

1982

Получены первые трансгенные растения, устойчивые к гербицидам, и трансгенные животные

 

 

(нокаутные линии мышей)

 

1985

Кэри Муллис разработал метод быстрой амплификации ДНК – метод ПЦР

 

С 1990

Начало реализации проекта «Геном человека»

 

1995

Трансгенные томаты разрешены к свободной продаже в США и Великобритании

 

С 1995

Попытки генной терапии на человеке

 

1996

Установлена нуклеотидная последовательность генома пекарских дрожжей

 

1996

Родилась овечка Долли – первое клонированное млекопитающее

 

1998

В базах данных содержится информация о последовательностях различных ДНК общим

 

 

размером 2 млрд п.н.

 

1999

Геном дрозофилы размером 1,6 млрд п.н. полностью прочитан за четыре месяца

 

1999

Получена культура клеток человека

 

1999

Годовой объем мирового рынка рекомбинантных белков для фармакологии превысил

 

 

10 млрд долл. США

 

2001

Опубликована расшифрованная последовательность генома человека длиной более 3 млрд п.н.

9