Агглютинация ошибочно устанавливается при фактическом ее отсутствии:

• эритроциты склеиваются в «монетные столбики». Необходимо добавить в кровь физиологический раствор и смешать

• при низкой температуре окружающей среды (ниже 12°С) — появляются зерна из эритроцитов, напоминащие агютинащию

• при способности эритроцитов давать агглютинации со всеми стандартными сыворотками

• при долгом стоянии на воздухе смесь начинает подсыхать, появляется зернистость, похожая на агглютинацию

• при нечеткой маркировке на флаконах и ампулах, в сомнительных случаях необходимо провести повторную реакцию с гемаглютинирующей сывороткой другой серии

Определение резус-фактора по стандартной сыворотке-антирезус

• приготовить: пипетки, пробирки, физиологический раствор

• внести пипеткой 2 капли сыворотки в конусную пробирку

• добавить пипеткой 1 каплю крови

• встряхнуть пробирку

• добавить в пробирку 2 капли физиологического раствора

• встряхнуть пробирку или вращать между ладонями в течение 5 мин

• посмотреть на стенки пробирки и оценить результат. Если есть реакция, то у пациента резусположительный фактор

Выявление признаков непригодности крови к переливанию, транспортирование крови из отделения переливания крови

Выявление признаков непригодности крови к переливанию, транспортирование крови из отделения переливания крови. Показание: определение годности крови к переливанию. Оснащение: флакон или контейнер с кровью. Алгоритм действий: 1. Оценить герметичность упаковки: упаковка должна быть абсолютно целостной: никакие следы нарушения целостности недопустимы, при их наличии кровь непригодна для переливания. 2. Оценить правильность паспортизации:

• наличие этикетки с номером

• даты заготовки

• обозначения группы крови и резус принадлежности

• наименование консерванта

• фамилии и инициалов донора

• наименование учреждения-заготовителя

• подпись врача

• штампа о проверке на ВИЧ и вирусный гепатит

3. Обратить внимание на срок годности крови, сопоставить его с датой переливания. 4. Оценить визуально кровь во флаконе: кровь должна быть разделена на три слоя — внизу — красные эритроциты, выше — узкая серая полоска лейкоцитов и тромбоцитов, над ней жёлтая прозрачная плазма). Плазма должна быть прозрачной: хлопья, пленки, сгустки в плазме свидетельствуют о ее инфицированности и непригодности к переливанию, а розовое окрашивание плазмы говорит о гемолизе эритроцитов и непригодности крови к переливанию. Примечание. Плазма может быть непрозрачной в случае так называемой хиллёзной крови, т. е. крови, содержащей большое количество нейтральных жиров. При нагревании хиллёзной крови до 37 градусов Цельсия, плазма становится прозрачной, если же кровь инфицирована — остается мутной.

Проведение проб на индивидуальную совместимость крови донора и реципиента. Постановка пробы на индивидуальность, совместимость

По группе крови:

• взять у пациента кровь — до 5 мл в пробирку

• отцентрифугировать пробирку с кровью для получения сыворотки

• нанести пипеткой на тарелку 1 каплю сыворотки пациента и мазок крови донора

• смешать стеклянной палочкой сыворотку и кровь

• добавить 1 каплю физиологического раствора;

• наблюдать за реакцией в течение 5 минут

• если нет агглютинации, то гемотрансфузию проводить можно

По резус-фактору на водяной бане:

• взять у больного кровь — до 5 мл в пробирку

• отцевтрифугировать пробирку с кровью больного для получения сыворотки

• нанести пипеткой на чашку Петри 1 каплю сыворотки больного и мазок крови донора

• смешать стеклянной палочкой сыворотку с кровью

• добавить 1 каплю физиологического раствора

• поставить чашку Петри на водяную баню (температура 500 градусов Цельсия)

• ждать результат в течение 10 минут

• если агглютинация отсутствует, можно проводить гемотрансфузию

По резус-фактору с использованuем 33% раствора полиглюкина:

• на дно пробирки внести 2 капли сыворотки больного, 1 каплю крови донора и 1 каплю 33%-ного полиглюкина

• встряхнуть пробирку

• пробирку наклонить почти горизонтально и медленно поворачивают вокруг оси в течение 5 мин

• долить в пробирку 3-4 мл изотонического раствора хлорида натрия

• перемешать, переворачивая пробирку (не взбалтывать!) 2-3 раза

• просмотреть на свет и оценить результат

Если есть реакция агглютинации на фоне просветленной жидкости, то кровь совмещать нельзя! Если содержимое проб ирки равномерно окрашено, то кровь донора совместима с кровью реципиента.

Постановка биологической пробы

Биологическая проба проводится всем без исключения больным, даже находящимся под наркозом, при переливании крови и кровезаменителей. Исключение составляет переливние тромбоцитарной массы. 1. Перелить струй но 10-15 мл крови или кровезаменителей внугривенно. 2. Закрыть систему на 3 мин. 3. Оценить состояние пациента. 4. Перелить струйно 10-15 мл крови или кровезаменителей внутривенно. 5. Закрыть систему на З мин. 6. Оценить состояние пациента. 7. Перелить струйно 10-15 мл крови или кровезаменителей внутривенно. 8. Оценить состояние пациента. Примечание. При появлении болей в животе, в груди, пояснице, рвоты, головной боли, одышки, тахикардии, сыпи на коже кровь или кровезаменители вводить нельзя!

Оказание первой помощи при осложнении во время проведения биологической пробы

1. Срочно прекратить введение крови или кровезаменителей, пережав систему 2. Снять флакон и систему, иглу оставить в вене 3. Сообщить врачу 4. Подключить иглу к другой системе, с солевым раствором 5. Наблюдать состояние пациента в течение 2 ч после стабилизации

Подготовка пациента к гемотрансфузии

1. Определить группу крови пациента и донора. 2. Определить резус-принадлежность пациента и донора. 3. Взять кровь на общий анализ крови. 4. Взять мочу на общий анализ мочи. 5. Проверить годность крови во флаконе. 6. Не есть за 2 часа до гемотрансфузии. 7. Опорожнить мочевой пузырь перед перели.ванием крови. 8. Подсчитать пульс, измерить артериальное давление и температуру тела. 9. Поставить приборы на индивидуальную совместимость по группе крови и по резус-фактору. 10. Поставить биологическую пробу.

73. Составление наборов и определение групповой принадлежности и ре-зус-фактора крови.

(Эритротестом^тм - цоликлонами Анти – А и Анти – В и Анти – АВ) Оснащение:цоликлоны Анти – А и Анти – В и Анти – АВ, пипетки для взятия и нанесения сывороток, маркированные белые фаянсовые или стандартные планшеты, стеклянные палочки, 0,9% раствор хлорида натрия, песочные часы на 5 мин.

Эритротест^тм - цоликлон Анти – А и Анти – В и Анти – АВ предназначены для определения групп крови человека системы АВО в прямых реакциях гемагглютинации и применяются взамен или параллельно с поликлональными иммунными сыворотками.

Цоликлоны выпускаются в жидкой форме во флаконах объемом 10мл. Цоликлон Анти – А – бесцветный. В качестве консерванта применяется азид натрия в конечной концентрации 0,1%.

Срок хранения – 2 года при температуре 2 - 8°. Вскрытый флакон можно хранить при температуре 2 - 8°С в течение месяца в закрытом виде.

^ Выполнение манипуляции

Определение производится в нативной крови, взятой в консервант; в крови, взятой без консерванта; в крови, взятой из пальца. Используется метод прямой гемоагглютинации на плоскости: на пластине или планшете. Определение группы крови производится в помещении с хорошим освещением при температуре 15 - 25°С.

1. Нанесите на планшет или пластину индивидуальными пипетками Цоликлоны Анти – А, Анти – В и Анти – АВ по одной большой капле (0,1мл) под соответствующими надписями.

2. Рядом с каплями антител нанесите по одной маленькой капле исследуемой крови (0,01-0,03мл).

3. Смешайте кровь с реагентом.

4. Наблюдайте за ходом реакции с Цоликлонами визуально при легком покачивании пластины или планшета в течение 3мин. Агглютинация эритроцитов с Цоликлонами обычно наступает в первые 3 – 5сек, но наблюдение следует вести 3мин ввиду более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А или В.

5. Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов. Агглютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких красных агрегатов, быстро сливающихся в крупные хлопья. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются.

6. Интерпретация результатов реакции агглютинации исследуемой крови с Цоликлонами представлена в таблице

* Знаком (+) обозначено наличие агглютинации, знаком (-) - отсутствие агглютинации.

** Окончательно АВО принадлежность устанавливается по результатам перекрестного определения: антигенов А и В на эритроцитах и изогемагглютининов в сыворотке.

Контроль специфичности реакции агглютинации

В составе Цоликлонов нет высокомолекулярных добавок, способных вызвать неспецифическую полиагглютинацию эритроцитов, поэтому не требуется проведения контроля с растворителями. При положительном результате реакции агглютинации со всеми тремя Цоликлонами необходимо исключить спонтанную неспецифическую агглютинацию исследуемых эритроцитов. Для этого смешайте на плоскости 1 каплю исследуемой крови (эритроцитов) с каплей физиологического раствора. Кровь можно отнести к группе АВ (IV)только при отсутствии агглютинации эритроцитов в физиологическом растворе.

^ Завершение манипуляции:

1. После определения группы крови необходимо сделать отметку о групповой принадлежности на лицевой части истории болезни, занести данные в протокол гемотрансфузии и журнал определения группы крови и резус принадлежности.

2. Использованный материал обрабатывается в соответствии с отраслевыми нормативными документами по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения.

3. Провести дезинфекцию и утилизацию медицинских отходов в соответствии с СаНПиН 2.1.7.728-99 «Правила сбора, хранения и удаления отходов лечебно-профилактических учреждений»

Определение резусной принадлежности крови Оснащение: Эритротест^ТМ - Цоликлон Анти – D Супер, пробирки, 0,9% раствор хлорида натрия, маркированные белые фаянсовые или стандартные планшеты, стеклянные палочки,

Эритротест^ТМ - Цоликлон Анти – D Супер предназначен для выявления D антигена системы резус в эритроцитах человека.

Цоликлон Анти – D Супер выпускается в жидкой форме во флаконах по 2,5 или 10мл (1мл содержит 10доз). В качестве консерванта применяется азид натрия в конечной концентрации 0,1%.

Срок хранения – 1 год в холодильнике при 2 - 8°С. Вскрытый флакон можно хранить в холодильнике в течение месяца в закрытом виде. ^ Выполнение манипуляции

Реакция агглютинации на плоскости

На пластинку со смачиваемой поверхностью нанесите большую каплю (около 0,1мл) реагента. Рядом поместите маленькую каплю (0,01 – 0,05мл) исследуемой крови и смешайте кровь с реагентом. Наиболее крупная агглютинация наблюдается при использовании эритроцитов в высокой концентрации. Реакция агглютинации начинает развиваться через 10 – 15сек. четко выраженная агглютинация наступает через 30 – 60сек. Использование подогретой до 37 - 40°пластинки сокращает время наступления агглютинации. Результаты реакции учитывайте через 3мин. Пластинку после смешивания реагента с кровью рекомендуется покачивать не сразу, а через 20 – 30сек., что позволяет за это время развивать более полной крупнолепестковой агглютинации – резус положительный, если нет агглютинации – резус отрицательный. ^ Завершение манипуляции:

1. После определения резус-фактора необходимо сделать отметку о групповой принадлежности на лицевой части истории болезни, занести данные в протокол гемотрансфузии и журнал определения группы крови и резус принадлежности.

2. Использованный материал обрабатывается в соответствии с отраслевыми нормативными документами по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения.

3. Провести дезинфекцию и утилизацию медицинских отходов в соответствии с Сан.ПиН 2.1.7.728-99 «Правила сбора, хранения и удаления отходов лечебно-профилактических учреждений»

74. Составление наборов инструментов для венесекции и катетеризации

подключичной вены.

Материалы и инструменты. Набор для пункции подключичной вены состоит из толстой иглы со срезом под углом 45° длиной 10—15 см и стерильного, длительного срока хранения набора для катетеризации подключичной вены, состоящего из полиэтиленового катетера (диаметром 0,8; 1; 1,4 мм), лески-проводника и двух или трех резиновых колпачков-заглушек. Набор выпускается медицинской промышленностью. Затем необходимы шприц 20 мл, игла для анестезии кожи, раствор новокаина 0,25 %, спирт, йодонат, стерильная подкладная для отграничения операционного поля. Желательно иметь стерильные перчатки.

Ход манипуляций. Больной укладывается на спину. Под лопатки подкладывается валик или подушка толщиной около 10—15 см для того, чтобы голова была запрокинута.Голову поворачивают в сторону, противоположную катетеризации. Обрабатывается операционное поле: боковая поверхность шеи, над- и подключичная области и область плечевого сустава. Хирург моет и обрабатывает руки или надевает стерильные перчатки. Производится анестезия кожи над или под ключицей в зависимости от способа пункции. Затем толстой иглой, посылая вперед раствор новокаина, хирург пунктирует вену. Убедившись, что игла находится в вене по появлению в шприце крови, шприц отсоединяют и через иглу в вену вводят леску-проводник. Игла удаляется. Затем по проводнику ввинчивающими движениями вводят катетер на глубину около 5—10 см. Проводник удаляют и, убедившись, что катетер находится в вене, приступают к вливанию медикаментов. Катетер фиксируют липким пластырем или подшивают к коже.

75. Использование перчаток и других средств индивидуальной защиты при работе с кровью.

Все биологические субстраты, которые выделяет пациент, независимо от результатов обследования на ВИЧ, для медицинского работника являются потенциально заразными.

Все манипуляции необходимо выполнять в специальной одежде (халат, желательно хирургические перчатки, шапочка, маска). Обязательна аварийная аптечка, состоящая из:

- 3 % р-ра перекиси водорода;

- 3 % р-ра хлорамина;

- 5 % р-ра йода; Обязательно

- 70° спирта; соблюдать

- 1 % р-ра протаргола; сроки хранения

- 0,5 % р-р марганцевокислого калия

- Перчатки запасные, лейкопластырь, ножницы.

При работе с биологическими субстратами пациентов необходимо применять меры предосторожности. При попадании биологических субстратов пациентов на: