Материал: Барам_Курс лекций ВЭЖХ для ВСЕХ [2007]
ВЭЖХ - 2006
НЕПОДВИЖЫЕФАЗЫДЛЯВЭЖХ
Привитые фазы на основе силикагеля
CH3
Si R
CH3
ОБРАЩЕННЫЕ ФАЗЫ
Элюотропный ряд (повышение силы элюента): Вода<MeOH<АCN<EtOH≤Тетрагидрофуран≤Пропанол<Диоксан
Смешивающиеся с водой и прозрачные в УФ области спектра растворители
ВЭЖХ - 2006
НЕПОДВИЖЫЕФАЗЫДЛЯВЭЖХ
"Несиликагельные" обращенные фазы
ГРАФИТ ПОЛИСТИРОЛ
35
ВЭЖХ - 2006 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
СЕЛЕКТИВНОСТЬФАЗЫ"С18" |
||||||
|
|
I. Обращенно-фазная хроматография |
||||||
|
|
1 |
|
2 |
3 |
|
4 |
|
|
|
|
|
|
NH2 |
CH2 OH |
CH2 |
COOH |
|
|
CH2 |
NH2 |
CH2 |
CH |
|||
|
|
|
|
|
COOH |
|
|
|
|
|
|
Изменение степени ионизации |
|
||||
A |
1 |
2 |
|
Конкуренты: |
2 4 |
|
B |
|
|
|
|
3 |
МеОН |
|
3 |
|
|
|
|
|
|
4 |
|
1 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
pH 2 |
|
|
pH 7 |
|
ВЭЖХ - 2006 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
СЕЛЕКТИВНОСТЬФАЗЫ"С18" |
||||||
|
|
|
II. Ион-парная хроматография |
|
||||
1 |
|
|
|
|
|
|
2 |
|
|
|
|
3 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
4 |
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
NH2 |
|
|
CH2 |
|
|
|
OH |
|
|
|
|
CH2 |
|
COOH |
||
|
|
CH2 |
|
|
NH2 |
|
|
|
CH2 |
|
|
CH |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
COOH |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Образование гидрофобных ионных пар |
||||||||||||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
O _ |
Ион-парные |
+ |
|
|
CH3 |
|
CH3 |
|||||||||||||
|
H3C |
|
(CH2)6 |
|
CH2 |
|
S O |
агенты |
|
H3N |
|
C |
|
CH2 |
|
C CH3 |
|||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
O |
|
|
|
|
|
|
|
CH3 |
|
CH3 |
||||||||||
C |
3 |
|
|
Конкуренты: |
2 |
|
|
|
|
МеОН |
4 |
3 |
|||
|
|
|
|
|
|||
|
|
|
|
F3CCOO− |
|
|
|
|
|
4 |
|
|
1 |
|
|
|
|
|
H+ |
|
|
||
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
1 |
2 |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
D
36
ВЭЖХ - 2006
СЕЛЕКТИВНОСТЬФАЗЫ"С18" |
|||||||
III. Ионообменная хроматография |
|
||||||
1 |
|
2 |
|
3 |
|
4 |
|
|
|
|
|
NH2 |
CH2 OH |
CH2 |
COOH |
CH2 |
NH2 |
CH2 |
|
CH |
|||
|
|
|
|
COOH |
|
|
|
Модификация поверхности сорбента |
|
||||||
|
|
O Модификаторы: |
|
|
|||
|
|
O |
O |
S O |
|
|
+CH3 |
|
|
|
_ |
|
|
N CH3 |
|
|
|
|
|
O |
|
|
CH3 |
|
|
Конкуренты: |
|
|
|||
E |
Li+ |
F3CCOO |
|
F |
|||
|
|
|
|
2 |
|
|
|
3 |
|
|
|
1 |
|
|
|
|
|
|
|
3 |
|
|
|
4 |
|
|
|
|
|
|
|
|
2 |
1 |
|
|
|
4 |
|
ВЭЖХ - 2006
СЕЛЕКТИВНОСТЬФАЗЫ"С18"
Эффективность колонки: 4000-6000 теоретических тарелок Разрешение пиков: Rs(i, i+1) >1 или 4
R
Ph-H < Ph-CH3 < Ph-CH2CH3 <...< Ph-CH2(CH2)25-30CH3
Поверхность гидрофобного контакта
37
ВЭЖХ - 2006
СЕЛЕКТИВНОСТЬФАЗЫ"С18"
Эффективность колонки: 4000-6000 теоретических тарелок Разрешение пиков: Rs(i, i+1) >1 или 4
Поверхность гидрофобного контакта
CH3 |
CH3 |
CH3 |
|
CH3 |
|
|
CH3 |
CH3 |
Увеличение |
|
|
|
|
|
удерживания |
|
|
NO2 |
NO2 |
NO2 |
|
NO2 |
|
|
NO2 |
NO2 |
|
|
|
|
|
Увеличение |
|
|
удерживания |
ВЭЖХ - 2006
СЕЛЕКТИВНОСТЬФАЗЫ"С18"
Эффективность колонки: 4000-6000 теоретических тарелок Разрешение пиков: Rs(i, i+1) >1 или 4
Поверхность гидрофобного контакта
Цис-изомеры Транс-изомеры
|
|
|
|
CH3 |
Увеличение |
|
|
|
|
|
|
|
CH3 |
|||
H3C |
C |
|
CH2 |
удерживания |
H3C |
C |
CH2 |
|||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
H C C |
CH |
|
H C C |
CH |
||||||||||||
3 |
|
|
|
|
2 |
|
2 |
|
|
|
|
|
|
3 |
||
|
|
|
|
CH3 |
|
|
CH3 |
|
|
|||||||
|
|
|
OH |
Увеличение |
|
|
|
|
|
|
|
OH |
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
H3C |
|
|
CH2 |
H3C |
|
|
CH2 |
|||||||||
C |
удерживания |
C |
||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
H C C |
CH |
|
H C C |
CH |
||||||||||||
3 |
|
|
|
|
|
2 |
|
2 |
|
|
|
|
|
|
3 |
|
|
|
|
|
|
|
OH |
|
|
|
|
OH |
|
|
|||
38
ВЭЖХ - 2006
СЕЛЕКТИВНОСТЬФАЗЫ"С18"
Эффективность колонки: 4000-6000 теоретических тарелок Разрешение пиков: Rs(i, i+1) >1 или 4
Поверхность гидрофобного контакта
Увеличение
удерживания
Увеличение
удерживания
ВЭЖХ - 2006
СЕЛЕКТИВНОСТЬФАЗЫ"С18"
Поверхность гидрофобного контакта
|
|
|
|
O |
|
|
|
|
|
O |
||
R |
|
|
|
C |
R |
|
|
C - |
||||
|
|
|
|
|
||||||||
|
|
|
|
OH |
|
|
|
|
|
O |
||
|
|
|
|
H |
|
|
|
|
H |
|||
|
|
|
|
R |
|
|
|
|
+ |
H |
||
R |
|
|
N |
|
|
N |
||||||
|
|
|
||||||||||
|
|
|
|
H |
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
H |
||||
|
|
|
|
|
Увеличение |
|||||||
|
|
|
|
|
удерживания |
|||||||
39