Материал: Барам_Курс лекций ВЭЖХ для ВСЕХ [2007]
ВЭЖХ - 2006
НЕПОДВИЖНЫЕФАЗЫДЛЯВЭЖХ
Механическая прочность
Мягкие фазы
на основе целлюлозы, декстрана, полиакриламида, полистирола и др. для колоночной ЖХ низкого давления
(Рмакс<0.2 МПа)
Полужесткие фазы
на основе поливинилового спирта, полистирола для ВЭЖХ на коротких колонках (Рмакс до 10 МПа)
Жесткие фазы
на основе окисей кремния, алюминия, циркония, стекла
(Рмакс до 50 МПа).
ВЭЖХ - 2006
НЕПОДВИЖНЫЕФАЗЫДЛЯВЭЖХ
Форма частиц
- сферическая
- неправильная
- неправильная (скругленная)
45
ВЭЖХ - 2006
НЕПОДВИЖНЫЕФАЗЫДЛЯВЭЖХ
Площадь поверхности
непористая фаза |
"открытая" колонка |
поверхностно-пористая (pellicular) фаза
объемно-пористая фаза Zorbax® (DuPont)
ВЭЖХ - 2006
НЕПОДВИЖНЫЕФАЗЫДЛЯВЭЖХ
Площадь поверхности
перффузионная |
монолитная |
фаза |
колонка |
поликапиллярная |
поливолоконная |
колонка |
колонка |
Y. Saito et al. Anal. Chem., 2003, 75, 5525–5531 |
R.K. Marcus et al. J. Chromatogr. A, 2003, 986, 17–31. |
46
ВЭЖХ - 2006
НЕПОДВИЖНЫЕФАЗЫДЛЯВЭЖХ |
||||
Распределение частиц и пор по размеру |
||||
1 |
B |
|
100% |
Интегралраспределения |
Нормированное распределение Гаусса |
A |
90% |
80 |
|
|
||||
|
|
|||
|
50% |
60 |
||
|
|
|||
|
|
40 |
||
|
10% |
20 |
||
|
|
|||
|
|
0 |
||
0 |
|
|
|
|
|
d10% d50% d90% |
|
|
|
|
Размер частиц или пор |
|
|
|
ВЭЖХ - 2006
НЕПОДВИЖНЫЕФАЗЫДЛЯВЭЖХ
Соотношение размеров
|
Бактерия |
Частица адсорбента |
Вирус |
dp=5 мкм |
|
0 |
2 |
4 мкм |
|
|
|
Масштаб
47
ВЭЖХ - 2006
АДСОРБЕНТЫДЛЯВЭЖХ
Синтез объемно-пористого силикагеля
Na SiO + H O H+ xSiO yH O
2 3 2 → 2 2
Si(OC H ) + H O H+ xSiO yH O
2 5 4 2 → 2 2
O
O Si OH
O
O Si OH
O
Силанольные группы
Типичный
силикагель для ВЭЖХ
концентрация силанолов: 7-8 мкмоль/м2 размер частиц: 3, 5±1, 7, 10 диаметр пор: 10±2 нм удельная поверхность: 300 м2/г удельный объем пор: 0.8 мл/г
Nucleosil 100-5, LiChrosorb Si 60, LiChrospher Si 100, Zorbax BP-Sil и т.д.
ВЭЖХ - 2006
АДСОРБЕНТЫДЛЯВЭЖХ
Синтез объемно-пористого силикагеля Технология Zorbax®
48
ВЭЖХ - 2006
АДСОРБЕНТЫДЛЯВЭЖХ
Синтез объемно-пористого силикагеля:
технология ACQUITY UPLC (Waters)
BEH:
Bridged
Ethyl-siloxane
Hybrid
ВЭЖХ - 2006
АДСОРБЕНТЫДЛЯВЭЖХ
Синтез привитых мономерных фаз
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
O |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
O |
|
|
|
|
|
|
CH3 |
|
|
|
|
|||||||||
O |
|
Si |
|
|
OH |
|
|
|
|
|
|
|
O |
|
Si |
|
|
O |
|
|
Si |
|
|
R |
|
CH3 |
||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|||||||||||||||||
|
|
O |
|
CH3 |
|
|
|
|
O |
|
|
|
|
|
|
CH3 |
|
|||||||||||||||
O |
|
Si |
|
|
OH + Cl |
|
Si |
|
R |
|
|
|
O |
|
Si |
|
|
OH + Cl |
|
Si |
|
CH3 |
||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
- HCl |
|
|
|
||||||||||||||||||||||||
|
|
O |
|
CH3 |
|
|
|
|
O |
|
|
|
|
|
|
CH3 |
|
CH3 |
||||||||||||||
O |
|
Si |
|
OH |
|
|
|
|
|
|
|
O |
|
Si |
|
O |
|
Si |
|
R |
|
|
|
|
||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||||||||||||||||
|
|
O |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
O |
|
|
|
|
|
|
CH3 |
|
|
|
|
|||||||||
O CH3
O Si O Si R
OCH3
-HCl
O Si O Si (CH3)3
OCH3
O Si O Si R
O CH3
Присоединение функциональной |
Инактивация оставшихся |
группы R |
силанолов ("endcapping") |
49