Материал: Preparaty_-_proizvodnye_tsiklopentanpergidrofenantrena__1

Таблица 5

Окраска продуктов реакции препаратов стероидных гормонов с концентрированной серной кислотой в хлороформе по ГФ XI

Характерной реакцией идентификации 3-кетогруппы андрогенов, гестагенов и кортикостероидов служит реакция присоединения – элиминирования при взаимодействии с аминами в кислой среде с последующим измерением температуры плавления выделившегося осадка или образованием окрашенного продукта реакции. В качестве реактивов ГФ рекомендует использовать:

–гидроксиламина гидрохлорид (образуются осадки белого цвета)

–оксим этистерона – tпл = 226–232 °С

–оксим тестостерона пропионата – tпл = 166–171 °С

–оксим метилтестостерона – tпл = 210–216 °С;

–2,4-динитофенилгидразин (образуются осадки оранжево-красного

цвета)

–3,20-бис-2,4-динитрофенилгидразон прогестерона – tпл =

= 270–275 °С;

–2,4-динитрофенилгидразон метандиенона;

–фенилгидразин (образуются осадки желтого цвета)

–фенилгидразон преднизолона

–фенилгидразон преднизона.

Фенольное кольцо А эстрогенов обнаруживают по реакции этерификации с бензоилхлоридом, например, этинилэстрадиола бензоат имеет температуру плавления 199–202 °С.

Из цветных реакций на фенольный гидроксил чаще всего используется реакция азосочетания с солями диазония, полученными на основе сульфаниловой кислоты, 3-нитроанилина, сульфатиазола и др.

37

Полученный азокраситель в щелочной среде имеет вишнево-красную окраску, а в нейтральной или слабокислой среде этот продукт представляет собой оранжево-красный осадок.

Для идентификации эстрадиола или эстрадиола бензоата (ЕФ) по 1 мг препаратов смешивают с 0,5 мл свежеприготовленного раствора молибдата аммония в концентрированной серной кислоте (реактив Фреде), появляется голубое окрашивание с интенсивной зеленой флюоресценцией в УФ-свете или желтовато-зеленое окрашивание с интенсивной зеленой флюоресценцией соответственно. После добавления 1 мл концентрированной серной кислоты и 9 мл воды окраска растворов изменяется в розовую с желтоватой флюоресценцией.

Этинильный фрагмент в структуре этинилэстрадиола, прегнина и норэтистерона обнаруживается по реакции солеобразования с ионами серебра за счет подвижного атома водорода:

При использовании в качестве реактива аммиачного раствора нитрата серебра (ЕФ) и нагревании на водяной бане выпадает белый осадок ацетиленида серебра, который при дальнейшем нагревании переходит в серый, а затем на стенках пробирки образуется «серебряное зеркало».

38

α-Кетольная группа (20-кето-21-гидроксигруппа) кортикостероидов проявляет восстановительные свойства и идентифицируется с помощью реактивов Фелинга, Несслера и Толленса, реакция протекает по схеме:

Реакция с 2,3,5-трифенилтетразолия хлоридом и тетразолиевым синим в щелочной среде также основана на восстановительных свойствах α-кетольной группы. ФС и ЕФ рекомендуют использовать ее для идентификации и количественного фотоколориметрического определения флюоцинолона ацетонида и триамцинолона в субстанции и лекарственных формах:

39

Глюкокортикоиды можно определить также реакцией с фенилгидразином в присутствии серной кислоты по появлению желтой окраски раствора.

Ковалентносвязанный фтор фторкортикостероидов (дексаметазон, бетаметазон, триамцинолон и др.) открывают по реакции с ализаринатом циркония после минерализации молекулы со спекающей смесью (KNО3-, Na2CО3).

40