Уменьшение толщины клубочковой и пучково-сетчатой зон сопровождается ускоренным формированием мозгового вещества, по сравнению с контрольной группой. Пролиферирующие хромаффинные клетки образуют клеточные скопления, количество которых по сравнению с контролем увеличено. Клеточные ассоциации отличаются разнообразием как по количеству клеток, так и по их локализации. Крупные скопления из 15-60 хромаффинных клеток расположены в центре органа и между спонгиоцитами глубоких слоев пучково-сетчатой зоны. Мелкие скопления, насчитывающие от 6 до 10 клеток, располагаются не только между клетками пучково-сетчатой, но и достигают границы с клубочковой зоной. Структура клеток в крупных клеточных скоплениях различна: часть клеток с дистрофическими и некротическими изменениями, другая часть - на разных стадиях митоза. Клетки, расположенные на периферии клеточных образований, с вакуолизированной цитоплазмой. Мелкие клеточные ассоциации содержат митотически делящиеся хромаффиноциты. Между группами клеток расположены полнокровные капилляры и венулы, средняя площадь которых превышает контрольные показатели (1 гр. - 54,42,7 мкм2, 2 гр. - 67,33,1 мкм2, р<0,01).
Таким образом, надпочечные железы плодов от самок, получавших гуминовые соединения, характеризуются следующими структурными перестройками: формированием дополнительных микродолек; завершенной дифференцировкой адренокортикоцитов в клубочковой и пучково-сетчатой зонах; повышением васкуляризации коркового и мозгового вещества с различной функциональной активностью капилляров; пролиферацией хромаффиноцитов и ускоренным формированием мозгового вещества; увеличением количества органелл в клетках коркового вещества.
1.6 Оценка плодовитости крыс, показателей эмбриотоксичности и тератогенной активности гуминовых соединений
Средняя плодовитость крыс в контрольной группе составила 9,20,66 особей на одну крысу, масса тела и длина крысят - соответственно 3,890,06 мг и 4,160,02 см. Показатель преимплантационной гибели составил 3,741,25%, постимплантационной гибели - 8,754,68%. Внешних пороков развития у плодов не выявлено.
В группе животных с применением гуминовых соединений средняя плодовитость крыс недостоверно выше контрольного уровня (1 группа - 9,20,66 у.е., 2 группа - 10,40,89 у.е.). Масса тела и длина крысят достоверно превышали показатели контрольной группы (соответственно 4,440,10 мг и 4,30,04 см; p<0,01). Преимплантационная и постимплантационная гибель достоверно не отличались от контрольных значений и составили соответственно 2,191,09% и 7,782,51%. Внешних пороков развития, стигм дисэмбриогенеза и пороков развития внутренних органов в ходе аутопсии у плодов также не выявлено.
1.7 Обобщение полученных результатов
Результаты комплексного морфологического исследования свидетельствуют о позитивном влиянии гуминовых соединений на маточно-плацентарное кровообращение в условиях созданной в эксперименте модели плацентарной недостаточности. Гуминовые соединения стимулируют формирование адаптивных процессов в плаценте, проявляющихся дилятацией и гиперемией сосудов материнского и плодового кровеносного русла. Итогом структурных перестроек является увеличение удельного объема материнских синусоидов в базальном и лабиринтном отделе последов на фоне снижения удельной доли фибриноида, очагов воспаления и зон ишемии в последе. За счет повышенного кровенаполнения сосудов закономерно увеличивается масса и объем последов. Кроме того, в плацентарном ложе гуминовые вещества вызывают новообразование сосудов с формированием коллатерального кровообращения и соответственно улучшением васкуляризации органа, обусловленной повышенным синтезом и выделением васкуло-эндотелиального фактора роста. Гуминовые соединения, по мнению авторов, способствуют уменьшению продукции фактора Виллебранда и тем самым нормализуют реологические свойства крови в условиях нарушений кровообращения в плаценте и плацентарном ложе. Увеличение интенсивности окрашивания на ДНК и РНК клеток трофобласта и амниотического эпителия, а также наличие в последнем крупных гранул PAS-положительного материала свидетельствуют о стимуляции обменных процессов в плаценте и активации параплацентарного обмена.
Таким образом, формирование под влиянием гуминовых соединений адаптивных процессов в последе позволяет говорить о достаточной компенсации созданной в эксперименте модели плацентарной недостаточности с положительным перинатальным исходом беременности. Соматометрические показатели плодов крыс не только не отставали от контрольных значений, но и достоверно превышали подобные показатели в группе без коррекции нарушений кровообращения.
Влияние гуминовых соединений на тимус плода вызывает ускорение его созревания с увеличением площади коркового вещества и корково-мозгового индекса, количества дифференцированных лимфоцитов и гиперплазией тимических телец. Структурные перестройки в селезенке и надпочечниках плодов также свидетельствуют об ускоренной дифференцировке структур и активизации функции кроветворения. Во всех изучаемых органах под влиянием препарата повышается васкуляризация стромы.
Заключение
Таким образом, в экспериментальном исследовании получены новые данные о механизмах биологической активности гуминовых соединений из торфа, реализующихся через васкуло-эндотелиальный фактор роста и фактор Виллебранда. Показано, что гуминовые вещества в условиях нарушенного маточно-плацентарного кровообращения в эксперименте стимулируют развитие адаптивных реакций в последе, ведущих к повышенному кровоснабжению органа, вызывают новообразование коллатеральных сосудов в плацентарном ложе, улучшают реологические свойства крови и профилактируют такие расстройства кровообращения как тромбозы, стазы и сладж эритроцитов в системах материнского и плодового кровотока, активизируют процессы транс- и параплацентарного обмена. Влияние гуминовых веществ на тимус, селезенку и надпочечники реализуется в ускоренной дифференцировке структур этих органов и активизации функции кроветворения.
Позитивное влияние гуминовых соединений на маточно-плацентарное кровообращение, иммунную систему, кроветворение, васкуляризацию органов и физическое развитие плодов позволяет рекомендовать препарат для экспериментальной профилактики и терапии плацентарной недостаточности, хронической внутриутробной гипоксии и гипотрофии плода.
Результаты эксперимента делают возможным не только дальнейшее экспериментальное исследование изучаемого препарата, но и проведение в перспективе клинических испытаний.
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ
1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. М.: Медицина, 1990. - 384 с.
2. Андикян В.М., Волощук И.Н., Ковганко П.А., Клементе Х.М. Морфофункциональные изменения плаценты после озонотерапии Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2000. - № 7. - С. 117-120.
3. Асымбекова Г.У. Хроническая плацентарная недостаточность: аспирин в профилактике и лечении. // Автореф. дис. … докт. мед. наук. - Москва. - 1996. - 35 с.
4. Бородин Ю.И., Склянов Ю.И., Склянова Н.А. Внеорганное лимфатическое русло матки и внезародышевые органы при гипотензивном синдроме беременных (экспериментально-морфофункциональный аспект) Акушерство и гинекология. - 1987. - №2. - С. 79-72.
5. Бычков В.И., Образцов Е.Е., Шамарин С.В. Диагностика и лечение хронической фетоплацентарной недостаточности //Акушерство и гинекология. - 1999. - № 6. - С. 3-6.
6. Воробьев А.А. Физиологические пути введения антигенов и других биологически активных веществ в организм //Иммунология. - 2002. - Т. 23. - № 3. - С. 138-142.
7. Гармашева Н.Л., Константинова Н.Н. Введение в перинатальную медицину. - М.: Медицина, 1978.
8. Демин В.В., Терентьев В.А., Завгородняя Ю.А. Вероятный механизм действия гуминовых веществ на живые клетки // В сб. Трудов II Международной конф. «Гуминовые вещества в биосфере». - Москва. - 2004. С. 37-40.
9. Жилякова Т.П., Панина О.П., Касимова Л.В. Использование гуминового препарата «Торфотон» в качестве адаптогенного и противоязвенного средства //В сб. Трудов II Международной конференции «Гуминовые вещества в биосфере». - Москва. - 2004. - С. 182-185.
10. Игнатко И.В. Актовегин в профилактике плацентарной недостаточности у беременных с артериальной гипертензией //Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. - 2003. - № 1. - С. 40-44.
11. Клименко П.А., Гришин В.Л., Позин В.М., Балюнис А.И. Моделирование недостаточности маточно-плацентарного кровообращения //Вопросы охраны материнства. - 1982. - № 7. - С. 64-68.
12. Корепанов А.М., Горбунов Ю.В., Старовойтова М.В., Баженов Е.Л. Некоторые клинико-морфологические аспекты первичного хронического дуоденита в процессе лечения СМТ-электрофорезом торфяной лечебной грязи санатория «Ува» (Удмуртская республика) //Морфологические ведомости. - 2005. - № 1-2. - С. 93-96.
13. Корнилова П.К. Патоморфология ворсин и плацентарного ложа матки при преждевременной отслойке нормально расположенной плаценты //Автореф. дис. … канд. мед. наук. - Москва. - 2003. - 25 с.
14. Косьянова З.Ф., Орлов Д.С., Аммосова Я.М. Гуминовые кислоты пелоидов // Медицинская химия. - 2002. - № 4. - С. 77-79.
15. Левитский Е.Ф., Кузьменко Д.И., Сидоренко Г.Н., Лаптев Б.И., Джураева Е.И. Эффект объединенного действия применения сапропели и постоянного магнитного поля на динамику восстановления поврежденной паренхимы печени (экспериментальное исследование) //Вопросы курортологии, физиотерапии и лечебной физической культуры. - 1998. - № 2. - С. 35-36.
16. Макаров О.В., Николаев Н.Н., Попова Л.В. Применение озонотерапии в комплексе профилактики и лечения плацентарной недостаточности Акушерство и гинекология. - 2002. - №2. - С. 48-52.
17. Мамедалиева Н.М. Ранняя диагностика, прогнозирование и профилактика плацентарной недостаточности у беременных с привычным невынашиванием в анамнезе //Автореф. дис. … д-ра мед. наук. - Москва. - 1993.
18. Милованов А.П. Патология системы мать-плацента-плод: Руководство для врачей. М.: Медицина, 1999. - 447 с.
19. Милованов А.П., Корнилова Н.К., Фадеев А.С., Федорова М.В. Патоморфология матки при преждевременной отслойке нормально расположенной плаценты //Архив патологии. - 2006. - Т. 68. - № 1. - С. 25-27.
20. Милованов А.П., Сидельникова В.М., Кирющенков П.А., Ходжаева З.С., Куземин А.А. Морфометрия ворсин плаценты как критерий эффективности использования курантила на ранних сроках беременности при аутоиммунном невынашивании //Вестник российской ассоциации акушеров-гинекологов. - 2000. - № 4. - С. 21-24.
21. Милованов А.П., Фокин Е.И., Рогова Е.В. Основные патогенетические механизмы хронической плацентарной недостаточности //Архив патологии. - 1996. -Т.57. - № 4. - С.11-16.
22. Мурашко Л.Е., Бадоева Ф.С., Асымбекова Г.У., Павлович С.В. Перинатальные исходы при хронической плацентарной недостаточности // Акушерство и гинекология. - 1996. - № 4. - С. 43-45.
23. Орджоникидзе Н.В. Хроническая плацентарная недостаточность и немедикаментозные методы ее коррекции // Дисс. на соиск. ... д.м.н. - Московская медицинская академия, 1994. - 348 с.
24. Орлов Д.С., Демин В.В., Завгородняя Ю.А. Влияние молекулярных параметров гуминовых кислот на их физиологическую активность //Доклады Академии Наук. - 1997. - Т. 354. - № 6. - С. 843-845.
25. Павлович С.В. Значение n-3 полиненасыщенных жирных кислот в профилактике плацентарной недостаточности у беременных высокого риска Автореф. дис. … канд. мед. наук. - Москва. - 1997. - 23 с.
26. Попов В.А., Щепеткин В.А. Морфофункциональные особенности плаценты при экспериментальной адаптации к гипоксии и острой кислородной недостаточности //Акушерство и гинекология. - 1985. - № 12. - С.24-26.
27. Пронина Т.А. Клинико-экспериментальное обоснование гепарин-электрофореза синусоидальными токами в комплексной терапии хронической плацентарной недостаточности //Автореф. дис. … канд. мед. наук. Москва. - 2000. - 23 с.
28. Радзинский В.Е. Фармакотерапия плацентарной недостаточности Клиническая фармакология. - 1998. - № 3. - С. 91-96.
29. Радзинский В.Е., Милованов А. П., Оpазмуpадов А. А., Хубецова М. Т., Пpозоpов В. В., Коpнилова Н. К. Особенности плаценты и плацентаpного ложа матки при преждевременной отслойке нормально расположенной плаценты //Акушерство и гинекология. - 2003. - № 3. - С. 21-26.
30. Радзинский В.Е., Ордиянц И.М. Плацентарная недостаточность при гестозе //Акушерство и гинекология. - 1999. - № 1. - С. 11-16.
31. Савельева Г.М., Федорова М.В., Клименко П.А., Сичинава Л.Г. Плацентарная недостаточность. М.: Медицина, 1991. - 271 с.
32. Савченков Ю.И., Лобынцев К.С. Очерки физиологии и морфологии функциональной системы мать-плод. М.: Медицина, 1980. - 254 с.
33. Саркисов Д.С., Перов Ю.Л. Микроскопическая техника: Руководство. М.: Медицина, 1996. - 544 с.
34. Севастьянова Н.В. Антимутагенный эффект гумизола в культурах крови на Т-лимфоцитах, подвергнутых обработке циклофосфаном //Вопросы курортологии, физиотерапии и лечебной физической культуры. - 1998. - № 4. С. 46-47.
35. Серов В.Н., Стрижаков А.Н., Маркин С.А. Руководство по практическому акушерству. М.: Медицина, 1997. - 223 с.
36. Сухих Г.Т., Ванько Л.В., Кулаков В.И. Иммунитет и генитальный герпес. Н. Новгород: Изд-во НГМА, 1997. - 224 с.