ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ЗДРАВООХРАНЕНИЮ
И СОЦИАЛЬНОМУ РАЗВИТИЮ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ
«ИВАНОВСКИЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ
МАТЕРИНСТВА И ДЕТСТВА имени В.Н. ГОРОДКОВА РОСЗДРАВА»
ОТЧЕТ
о научно-исследовательской работе по теме
«Патогенетические механизмы влияния гуминовых соединений на маточно-плацентарный кровоток беременных самок крыс на фоне развития и формирования органов иммунной и эндокринной систем их потомства»
Научный руководитель засл. деят. науки РФ, д.м.н.,
профессор Л.В. Посисеева
Ответственный исполнитель заведующая лабораторией
патоморфологии и электронной микроскопии
д.м.н., профессор Л.П. Перетятко
По результатам исследования защищена 1 и выполняется 1 кандидатская диссертация. Результаты исследования внедрены в учебный процесс на кафедре гистологии ГОУ ВПО Саратовского государственного медицинского университета и кафедрах патологической анатомии ГОУ ВПО Красноярской государственной медицинской академии и ГОУ ВПО Ивановской государственной медицинской академии. Опубликовано 19 статей. Получены: серебряная медаль на VII Международном салоне промышленной собственности «Архимед-2004» в разделе медицина, грант РФФИ на проведение научных исследований «Механизмы коррекции маточно-плацентарного кровотока природными гуминовыми соединениями» (2005), бронзовая медаль на V Московском Международном салоне инноваций и инвестиций за разработку «Новые препараты из торфа» (2005).
Область применения: патологическая анатомия, гистология, экспериментальная биология.
ПЕРЕЧЕНЬ СОКРАЩЕНИЙ, УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ
ГК - гуминовые кислоты
ГМК - гиматомелановые кислоты
ИЛ1, 2 - интерлейкин
ИФН - интерферон
ФК - фульвокислоты
ФНО - фактор некроза опухоли
ХПН - хроническая плацентарная недостаточность
MDA - малоновый диальдегид
TNF - фактор некроза опухоли
МПК - маточно-плацентарное кровообращение
ОПН - острая плацентарная недостаточность
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
РНК - рибонуклеиновая кислота
VEGF - васкуло-эндотелиальный фактор роста
vWF - фактор Виллебранда
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы плацентарной недостаточности, основной причиной которой являются нарушения маточно-плацентарного кровообращения (МПК), для современного акушерства, неонатологии и патологической анатомии в частности болезней анте- и перинатального периода заключена в таких исходах данной патологии как задержка внутриутробного развития, острая и хроническая гипоксия и анте-интранатальная гибель плода.
Практически все осложнения беременности сопровождаются плацентарной недостаточностью. Частота этой патологии при привычном невынашивании колеблется от 50 до 77% (Мамедалиева Н.М., 1993), при гестозах она составляет 30,6%, при экстрагенитальной патологии равняется 24-45% (Мурашко Л.Е., 1996; Радзинский В.Б., 1999; Савельева Г.М., 1991), у пациенток с вирусной и бактериальной инфекцией достигает 50-60% (Сухих Г.Т., 1997).
Решение одной из актуальных проблем медицины - безопасное материнство и детство - зависит, по мнению ряда исследователей (Орджоникидзе Н.В., 1994) от быстрого и активного внедрения в акушерство и перинатологию новых перспективных нетрадиционных методов профилактики и лечения перинатальной патологии. Основным аргументом при этом остается то, что применение лекарственных препаратов на фоне измененного иммунного статуса сопровождается не только развитием аллергических реакций у матери, но и оказывает эмбриотоксическое и тератогенное влияние на плод.
В последние годы большой научный интерес вызывает поиск природных ресурсов, содержащих биологически активные вещества. В медицине не меньший интерес представляет изучение патогенетических механизмов вновь полученных биологических активных веществ, позитивно влияющих на систему “мать-плацента-плод”. Апробация таких природных препаратов на беременных животных в рамках указанной системы позволяет в эксперименте изучить и обосновать новые механизмы, влияющие на рост и формирование органов у плодов в условиях плацентарной недостаточности, что позволит обосновать применение препаратов с целью профилактики целого ряда болезней перинатального периода и, следовательно, получения более здорового потомства. К таким новым веществам следует отнести гуминовые соединения, экстрагированные из торфа.
Исходя из выше изложенного, целью настоящего исследования явилось изучение патогенетических механизмов влияния гуминовых соединений на нарушенное в эксперименте маточно-плацентарное кровообращение, а также на формирование органов иммунной и эндокринной систем потомства крыс.
Задачи:
1. В условиях эксперимента выявить патогенетические механизмы влияния гуминовых соединений на маточно-плацентарный кровоток.
2. Исследовать стимулятор неоангиогенеза (васкуло-эндотелиальный фактор роста (VEGF)) и активность фактора Виллебранда (vWF) в плаценте и плацентарном ложе при нарушении маточно-плацентарного кровообращения и его коррекции гуминовыми соединениями.
3. Установить структурные перестройки в органах иммунной и эндокринной системы потомства крыс под влиянием гуминовых веществ.
4. Оценить плодовитость крыс, получавших гуминовые соединения, а также эмбриотоксичность и тератогенную активность изучаемых соединений.
5. На основании полученных результатов обосновать возможности дальнейшего применения препарата в экспериментальной медицине, акушерстве и неонатологии.
плодовитость крыса тимус кровообращение
1. ОСНОВНАЯ ЧАСТЬ
1.1. Аналитический обзор
В отечественном акушерстве (Савельева Г.М. с соавт., 1991) плацентарная недостаточность рассматривается как клинический синдром, отражающий патологическое состояние материнской и плодовой частей плаценты, сопровождающийся нарушением ее функций и приводящий к замедлению развития и роста плода. При этом оценка морфологических изменений в плаценте наряду с состоянием компенсаторно-приспособительных реакций на субклеточном, клеточном и тканевом уровнях позволяет дифференцировать стадии компенсации, субкомпенсации и декомпенсации (Федорова М.В., Калашникова Е.П., 1986).
Острая плацентарная недостаточность является результатом нарушений маточно-плацентарного и плацентарно-плодного кровообращения, приводящих к ургентной акушерской патологии. С морфологической позиции острая плацентарная недостаточность развивается при апоплексии, преждевременной отслойке нормально расположенной плаценты, предлежании плаценты с кровотечением, крупноочаговой нодулярной ишемии, обширных острых геморрагических инфарктах и массивной тромбозе венозных синусов (Савельева Г.М., 1991; Серов В.Н., 1997; Милованов А.П., 1999).
Острым нарушениям кровообращения чаще всего предшествуют следующие структурные изменения со стороны плацентарного ложа матки: недостаточность децидуализации базального эндометрия, персистирующий эндометрит, поствоспалительный или посттравматический очаговый склероз стромы. Перечисленные морфологические изменения в свою очередь приводят к недостаточной цитотрофобластической инвазии с частичной гестационной перестройкой миометриальных сегментов маточно-плацентарных артерий, что сопровождается недостаточным притоком материнской крови в межворсинчатое пространство плаценты, ультраструктурными повреждениями микроворсинок синцитиотрофобласта (Корнилова Н.К., 2003) и суперкоагуляцией материнской крови, находящейся в межворсинчатом пространстве (Радзинский В.Е., 2003). Сопоставление темпов тромбообразования в маточно-плацентарных артериях и венах плацентарного ложа при преждевременной отслойке нормально расположенной плаценты указывает на опережающий тромбоз венозных коллекторов, приводящий к блоку венозного оттока и быстрому формированию ретроплацентарной гематомы (Милованов А.П., 2006).
В патогенезе вторичной хронической плацентарной недостаточности, развивающейся на фоне сформировавшейся плаценты, выделяют следующие основные механизмы: недостаточность первой или второй волны инвазии вневорсинчатого трофобласта в стенки спиральных артерий, реологические нарушения, патологическую незрелость ворсин, нарушения перфузии ворсин, патологию плацентарного барьера, недостаточность эндокринной функции плаценты (Милованов А.П., Фокин Е.И., 1995).
Основываясь на гистологических изменениях в плаценте с учетом УЗИ критериев зрелости плаценты и доплерометрического идекса кровотока в маточных артериях и пуповине Милованов А.П. с соавторами (1999) выделяют следующие формы хронической плацентарной недостаточности: маточно-плацентарная, плацентарная, фетоплацентарная дисфункция. Наиболее выраженные нарушения маточно-плацентарного кровотока наблюдаются при маточно-плацентарной форме, составляющей 35% случаев ХПН. Характерным проявлением этой формы является неполная гестационная перестройка спиральных артерий с сохранением внутренней эластической мембраны, мышечной оболочки и развитием гиперпластического артериосклероза вплоть до полной облитерации. В результате неполной гестационной перестройки спиральных артерий происходит некроз микроворсинок синцитиотрофобласта, тромбоз межворсинчатого пространства, формирование обширных геморрагических и ишемических инфарктов.
В условиях эксперимента разработаны различные модели острых и хронических нарушений маточно-плацентарного кровообращения. Острая недостаточность моделируется путем полной окклюзии сосудов матки лабораторных животных в конце срока гестации (Попов В.А., Щепеткин В.А., 1985). При этом происходит гибель большей части потомства (80-90%), а в лабиринтной части плацент развиваются тяжелые циркуляторные расстройства в виде резкого полнокровия, стаза в плодовых капиллярах, расположенных преимущественно в центре долек и вокруг материнских лакун.
Модель хронических нарушений маточно-плацентарного кровотока достигается путем уменьшения кровоснабжения беременной матки с помощью лигатур, наложенных на часть преплацентарных сосудов в последнем триместре беременности (Гармашева Н.Л., Константинова Н.Н., 1978). Обнаружено, что уменьшение кровоснабжения матки в пределах 25-35% вызывает задержку развития плода. Менее значительные нарушения кровоснабжения матки приводят к недостоверному снижению массы тела плодов, а уменьшение кровоснабжения свыше 40-50% - к внутриутробной гибели плодов.
С целью достижения дозированного уменьшения кровоснабжения и контроля над динамикой патологического процесса П.А. Клименко с соавторами (1982) предложили новый способ моделирования недостаточности маточно-плацентарного кровообращения. Способ заключается во введении 20%-го раствора хлорида натрия в область расположения преплацентарных сосудов каждого плодовместилища под контролем состояния микроциркуляции и гемодинамики. Исследователи при создании данной модели достигали 30%-ного уменьшения кровоснабжения беременной матки. Указанными авторами в последующем разработана и предложена методика введения тромбопластина под контролем флоуметрии для создания регионарного тромбоза. Моделирование 30% недостаточности маточно-плацентарного кровотока авторы достигали при окклюзии 25-50% вен каждого плодовместилища. Морфологическими исследованиями выявляли в зоне тромбоза спазм, четкообразное расширение артериол и венул, отек ткани и большое количество переполненных, нефункционирующих капилляров.
Для моделирования гипотензивного синдрома беременных и возникающих при нем расстройств маточно-плацентарного кровообращения Бородин Ю.И. с соавторами (1987) предложил проводить лигирование каудальной полой вены до впадения в нее почечных вен.
Профилактика и лечение плацентарной недостаточности, по мнению Г.М. Савельевой с соавт. (1991) и В.И. Бычкова с соавт. (1999), должна носить комплексный характер. Считается, что при хронической плацентарной недостаточности для восстановления функций плаценты необходимо, в первую очередь, улучшить маточно-плацентарное кровообращение. Однако подобное воздействие целесообразно сочетать с терапией, направленной на нормализацию коагуляционных свойств крови, восстановление физиологического газообмена в системе “мать-плацента-плод”, улучшение метаболизма в плаценте и на регенерацию структуры и функций клеточных мембран.