При гистологическом исследовании в плацентах диагностированы реакции адаптации с участием систем материнского и плодового кровообращения, проявляющиеся дилятацией и полнокровием сосудов базальной части плаценты, материнских лакун и плодовых капилляров лабиринтного отдела. В краевых отделах последов площадь структур, обеспечивающих материнский кровоток, достоверно меньше, чем в группе контроля (р<0,05), что является следствием лигирования латеральной части пучка преплацентарных артерий.
Результаты эксперимента свидетельствуют о том, что в плацентах при применении гуминовых соединений по сравнению с группой, в которой не осуществлялась коррекция нарушений кровообращения преобладают приспособительные реакции как в центральных, так и в краевых отделах плацент с достоверным увеличением площади материнских синусоидов и плодовых капилляров (р<0,001). При этом в центральных отделах степень дилятации сосудов достоверно превышает контрольные значения (р<0,001%; табл. 2). Закономерен и тот факт, что указанные процессы отражаются и на значениях удельного объема материнского и плодового кровеносного русла (табл. 3).
Реологические нарушения плацентарного кровообращения, представленные очаговыми стазами в плодовых капиллярах, менее выражены, чем во 2 группе.
Достоверно уменьшена удельная доля фибриноида и патологических очагов, представленных дистрофически и некробиотически измененными базофильными клетками и очагами периваскулярной лейкоцитарной инфильтрации. В гликогеновых клетках, расположенных в лабиринте и базальном отделе, выявляется большое количество PAS-положительного материала. Клетки трофобласта богаты ДНК и РНК.
Сосуды амниотической оболочки умеренно полнокровны. В клетках амниотического эпителия выявляются средние и крупные PAS-положительные амилазочувствительные гранулы, что свидетельствует об активизации параплацентарного транспорта и энергетического обмена под влиянием гуминовых соединений.
В плацентарном ложе маточного рога обнаружены преплацентарные артерии с признаками полноценной гестационной трансформации. Стенка артерий полностью замещена фибриноидом и содержит клетки внутрисосудистого цитотрофобласта. Кроме перечисленного, дополнительно формируется коллатеральное кровообращение с образованием мелкокалиберных артериальных сосудов с узким просветом. Число артерий плацентарного ложа на единицу площади составляет 6,56±0,31 мм-2, что достоверно выше показателей контрольной и 2 группы (р<0,05 и р<0,001, соответственно) и связано, по нашему мнению, с ангиопролиферативным эффектом гуминовых соединений.
Фактор Виллебранда достоверно снижен в эндотелиальных и трофобластических клетках плаценты и плацентарного ложа матки по сравнению с группой, где коррекция нарушений кровообращения не проводилась. Однако значения среднего гистохимического коэффициента данной реакции превышают контрольные показатели (табл. 4).
В базальном отделе плаценты под влиянием гуминовых соединений повышается синтез васкуло-эндотелиального фактора роста в базофильных клетках периваскулярных зон. При этом количество положительно окрашенных клеток достигает 75-100%. В плацентарном ложе матки уровень продукции данного фактора в эндотелиальных, децидуальных и гладкомышечных клетках имеет аналогичную тенденцию. Значения среднего гистохимического коэффициента реакции с васкуло-эндотелиальным фактором роста в плаценте и плацентарном ложе достоверно превышают показатели 2 и контрольной групп (табл. 5). Иммунногистохимическая реакция наиболее выражена в зонах роста новых сосудов плацентарного ложа.
Таким образом, гуминовые соединения, применяемые для коррекции экспериментального нарушения маточно-плацентарного кровобращения, стимулируют формирование адаптивных реакций. К последним относятся дилятация и гиперемия сосудов материнского и плодового звена плацентарного кровообращения, активация энергетических процессов и параплацентарного обмена, а также ангиопротективное и стимулирующее действие с формированием коллатерального кровообращения, связанные с повышением продукции васкуло-эндотелиального фактора роста. Гуминовые вещества, влияя на продукцию фактора Виллебранда, нормализуют реологические свойства крови. Адаптивные процессы уменьшают повреждение плацентарных структур и нивелируют созданную в эксперименте плацентарную недостаточность. Плоды в данной группе соответствуют сроку гестации, без признаков задержки внутриутробного развития, более того их соматометрические показатели достоверно превышали значения 2 группы (р<0,001; табл. 6).
1.5 Морфологические изменения в тимусе, селезенке и надпочечниках потомства крыс
Тимус плодов от самок крыс, получавших во время беременности гуминовые соединения из торфа, представлен двумя долями округлой или овальной формы, с поверхности и на разрезе белесовато-серого цвета, эластичными по консистенции. Доли со всех сторон окружены соединительной тканью. Средняя масса органа достоверно больше показателя контрольной группы (1 гр. - 7,30,2; 2 гр. - 7,9±0,2 мг; р<0,05).
Орган с поверхности покрыт тонкой соединительнотканной капсулой. Среди матрикса кроме соединительнотканных клеток встречаются функционально активные единичные бластные формы, пролимфоциты, эозинофилы, зрелые лимфоциты и эпителиальные клетки.
Тимус имеет дольчатое строение. От тимусов плодов контрольной группы органы отличаются увеличением размера долек. Наряду с мелкими и средними в вилочковых железах до 30-40% паренхимы составляют крупные дольки с формирующимися как у взрослых крыс неполными септами. Как соединительная ткань, так и паренхима органа хорошо кровоснабжаются, что подтверждается увеличением числа полнокровных сосудов.
В дольках тимуса субкапсулярно расположены крупные ретикулоэпителиальные клетки с большими несколько вытянутыми овоидными по форме эухроматичными ядрами и базофильной цитоплазмой. Реже клетки лежат изолированно, чаще формируют группы из пяти-шести. Структура и функциональная активность клеток в группах различна. Среди высокофункциональных ретикулоэпителиальных клеток с крупными эухроматичными ядрами и субмембранной конденсацией хроматина встречаются 2-3 клетки с пикнозом или рексисом ядер и цитоплазмы.
В субкапсулярных отделах преобладают юные тимоциты, обнаруживаются немногочисленные бласты и пролимфоциты. Лимфоциты содержат в цитоплазме большое количество органелл, в частности полирибосом и митохондрий. Среди клеточных популяций паренхимы в толще коркового вещества расположены более крупные по размерам ядер ретикулоэпителиальные клетки второго типа. Ядра клеток вариабельные по форме - округлые, бобовидные, вытянутые, но независимо от формы эухроматичные, содержат одно эксцентрично расположенное ядрышко.
Увеличивается число зон формирования мозгового вещества в тимусах. В указанных зонах локализуются достаточно разнообразные по форме ядер и функциональному состоянию клетки ретикулоэпителия. Наряду с одиночным расположением клетки формируют мелкие группы (из 3-4), реже из большого числа клеток (14-20). В мелких группах целостность ядер и клеток не нарушена. Ретикулоэпителиальные клетки в центре клеточных ассоциаций имеют форму «перстневидных» за счет участков разрежения и вакуолизации цитоплазмы.
Формообразование телец Гассаля в тимусе находится на начальных этапах. Тимические тельца формируются в зонах группового скопления ретикулоэпителиальных клеток. В пограничной зоне между корковым и мозговым веществом и в формирующемся мозговом веществе визуализируется большое количество капилляров.
Относительная площадь коркового вещества тимуса плодов увеличена, по сравнению с контролем (1 гр. - 74,440,78%, 2 гр. - 78,240,75%, р<0,01). Как в корковом, так и мозговом веществе тимусов плодов данной группы увеличено процентное содержание малых и средних тимоцитов и достоверно уменьшено количество больших лимфоцитов и бластных форм клеток (табл. 7). Кроме того, в мозговом веществе достоверно увеличено количество телец Гассаля (р<0,01).
Следовательно, в тимусе плодов под влиянием гуминовых соединений осуществляются такие структурные перестройки как: гипертрофия долек и соответственно паренхимы органа; увеличение площади коркового вещества с увеличением корково-мозгового индекса; гиперплазия сосудов в соединительной ткани и паренхиме; уменьшение количества бластных клеток и больших лимфоцитов на фоне увеличения дифференцированных форм лимфоцитов; гиперплазия тимических телец; увеличение числа органелл в клетках лимфоидного ряда.
Селезенки плодов вытянуто-овальной формы, с поверхности и на разрезе вишневого цвета, покрыты соединительнотканной капсулой. Масса органа достоверно увеличена по сравнению с контрольной группой (1 гр. - 4,00,13 мг, 2 гр. - 5,00,25 мг; р<0,01).
Капсула селезенки равномерно тонкая, с поверхности покрыта мезотелием, ядра которого ориентированы параллельно волокнистым структурам. Основной волокнистый компонент - ретикулиновые волокна - фрагментированы, расположены в один ряд между матриксом. От капсулы в паренхиму органа отходят соединительнотканные трабекулы.
В селезенках плодов второй группы не завершено формирование структур в органе, в частности - дифференцировка пульпы на красную и белую. Формируются сосуды венозного и артериального русла (трабекулярные, пульпарные, или центральные артерии и кисточковые, или фолликулярные артериолы). Артериальные капилляры находятся на стадии формирования, при этом часть их полнокровна, а часть - в спавшемся состоянии, поскольку не функционируют.
Количество клеток в пульпе селезенки незначительное, при этом они находятся на значительном расстоянии друг от друга. Сформированные лакуны частично выстланы эндотелием, а их просветы содержат эритроциты.
В субкапсулярных зонах наряду с увеличением количества клеточных элементов, происходит их разобщение за счет формирующихся капилляров. В этих же зонах уменьшается количество бластных форм и эпителиальных клеток на фоне увеличения количества зрелых лимфоцитов и клеток-предшественниц и промежуточных форм эритро- и гранулопоэза. На субклеточном уровне в клетках лимфоидного ряда отмечено большое количество митозов.
Несмотря на существенное увеличение количества мегакариоцитов и ядер в них структура последних остается стереотипной и напоминает клетки, встречающиеся в селезенках контрольной группы.
В центральных зонах селезенки формируются артериолы с наползающими друг на друга эндотелиоцитами и перицитами и капилляры-лакуны. Клеточный состав периваскулярных зон следующий: немногочисленные фолликулярные отростчатые клетки и макрофаги с эухроматичными ядрами. Клетки предшественники лимфоцитопоэза и зрелые лимфоциты формируют периваскулярно клеточные скопления.
Изучение процентного соотношения популяций различных клеток в селезенках плодов показало следующее: на фоне уменьшения удельной доли больших лимфоцитов наблюдается достоверное увеличение клеток эритроцитарного и гранулоцитарного рядов, плазматических клеток, макрофагов, бластов и митотически делящихся клеток (табл. 8).
Таким образом, в селезенке плодов под влиянием гуминовых соединений происходят структурные изменения с увеличением количества капилляров-лакун и сосудов артериального и венозного русла; клеток-предшественников и промежуточных форм гемопоэза (эритро- и гранулоцитопоэза), что свидетельствует о напряжении функции кроветворения в селезенке; удельной доли бластов и митотической активности клеток лимфоидного ряда, что свидетельствует о высоком уровне лимфоцитопоэза в органе и количества плазматических клеток.
Надпочечные железы у плодов округлой формы, с поверхности белесовато-серого цвета, эластичные по консистенции. Средняя масса левого и правого надпочечников плодов соответствует контрольным и составляет соответственно 2,27±0,10 мг и 2,18±0,09 мг.
На поверхности органа, в пределах капсулы, и субкапсулярно из спонгиоциов формируются дополнительные микродольки. Последние представлены очаговым скоплением пролиферирующих спонгиоцитов. Клетки содержат гиперхромные ядра округлой, вытянутой, неправильной формы, с инвагинатами кариолеммы. Объем цитоплазмы у клеток минимальный, поэтому ядра расположены максимально близко друг к другу.
Средняя толщина коркового слоя надпочечников достоверно меньше параметра контрольной группы (1 гр. - 62,70,02 мкм, 2 гр. - 60,10,03 мкм, p<0,01). Клубочковая зона равномерно тонкая на всем протяжении. Дифференцированные клетки этой зоны округлые и овальные, с такой же формой ядер, в которых субмембранно локализуется гетерохроматин, а в центре - эухроматин.
Подлежащая пучково-сетчатая зона состоит из стереотипных полигональных клеток, которые отличаются по структуре в поверхностных и глубоких слоях. Если поверхностные спонгиоциты пучкового слоя с компактными, гиперхромными ядрами и неравномерной по окраске цитоплазмой, то клетки глубоких слоев сетчатой зоны с компактными эухроматичными ядрами.
На фоне более зрелых с высокой функциональной активностью клеток клубочкового слоя увеличивается его васкуляризация, причем капилляры зачастую полнокровны. Средняя площадь капилляров превышает показатель группы контроля (1 гр. - 40,20,6 мкм2, 2 гр. - 43,40,7 мкм2, р<0,01). Электронномикроскопически клетки пучково-сетчатой зоны надпочечников плодов обладают округлым, центрально расположенным ядром, содержащим эухроматин. В цитоплазме содержатся многочисленные рибосомы, липидные капли и митохондрии. Клеточные мембраны спонгиоцитов образуют немногочисленные, но разнообразные по форме, инвагинаты.