Микробиологическая диагностика
Исследуемым материалом для лабораторной диагностики бруцеллеза служат: кровь, костный мозг, моча, грудное молоко (у кормящих матерей), пунктат лимфатических узлов. Основные методы диагностики – бактериологический,
биологический, серологический, аллергический. Для выделе-
ния чистой культуры материал засевают в две пробирки с мясопептонным печеночным бульоном, одну из которых инкубируют в анаэробных условиях, а к другой добавляют 10% углекислого газа. Затем из пробирки с признаками роста делают высев на плотную питательную среду. Выделенная культура идентифицируется: по способности расти на средах с красителями, образованию сероводорода, чувствительности к Тб-фагу (тбилисский фаг), реакции агглютинации с монорецепторными сыворотками. Биологическая проба проводится на морских свинках. Этот метод актуален в тех случаях, когда исследуемый материал контаминирован другими микроорганизмами и выделение чистой культуры из-за этого затруднено. Серологические методы включают постановку реакций агглютинации Хеддльсона и Райта. Первая ставится на стекле и актуальна при массовых обследованиях, так как дает возможность выявлять агглютинины в первые дни болезни и быстро получать результат. Для определения титра антител ставят развернутую реакцию Райта в пробирках. Используется также РНГА с эритроцитарным диагностикумом, РИФ, опсоно-фагоцитарная реакция, латекс-агглютинация. Для выявления неполных антител ставят реакцию Кумбса. Аллергический метод включает постановку внутрикожной пробы Бюрне с аллергеном бруцеллином. Положительной считается реакция, когда диаметр отека больше 2–3 см.
31
Лечение и профилактика
Для лечения бруцеллеза применяют антибиотики (стрептомицин, пенициллин, левомицетин, тетрациклины, эритромицин). Специфическая профилактика проводится по эпидемиологическим показаниям и лицам, входящим в профессиональные группы риска. С этой целью используют живую бруцеллезную вакцину (ЖБВ), приготовленную из штамма B.abortus. Недостатком этой вакцины является ее сильное аллергенное действие. Поствакцинальный иммунитет сохраняется в течение 1 года. Вместо вакцины ЖБВ предложена менее аллергенная химическая бруцеллезная вакцина (ХБВ), содержащая антигены клеточной стенки бруцелл. Указанные вакцины используют и для лечения хронических форм бруцеллеза.
2.2. ВОЗБУДИТЕЛЬ СИБИРСКОЙ ЯЗВЫ
Характеристика возбудителя
Возбудитель сибирской язвы Bacillus anthracis относится к роду Bacillus семейства Bacillaceae. Микроорганизм представляет собой неподвижную грамположительную палочку со слегка закругленными концами. Капсула образуется в организме человека и животных и на специальных кровяных или сывороточных средах. При неблагоприятных условиях возбудитель образует центрально расположенную спору. Бациллы сибирской язвы располагаются поодиночке, парами, но чаще цепочками (стрептобациллы).
Тип дыхания – аэробный. Растет на простых питательных средах при температуре +37˚С, рН 7,2–7,6 и образует на плотных средах колонии R-формы, похожие на гриву
32
льва. Такой тип колоний характерен для вирулентных штаммов. Слабовирулентные и авирулентные штаммы образуют S-формы колоний. В жидких средах дают придонный рост в виде осадка, похожего на комочек ваты.
Микроорганизм активен в биохимическом отношении. Он ферментирует глюкозу, мальтозу, сахарозу, трегалозу до кислоты, образует при разложении белков сероводород, пептонизирует молоко, превращает нитраты в нитриты и разжижает желатину.
Антигенная структура представлена соматическим и капсульным антигенами. Соматичекий антиген полисахаридной природы термостабилен, не разрушается при кипячении и выявляется в реакции термопреципитации по Асколи. Капсульный антиген имеет белковую природу и обусловливает антифагоцитарное действие.
К факторам патогенности Bacillus anthracis относятся капсула и экзотоксин. Потеря капсулы приводит к утрате патогенности. Экзотоксин представляет собой комплекс из 3 факторов, различающихся по химической природе и действию на макроорганизм, – фактор отечности, протективный антиген и летальный фактор. Синтез каждого фактора кодируется специальными генами. Наибольшей иммуногенностью обладают все 3 фактора в комплексе.
Возбудитель сибирской язвы в вегетативной форме достаточно быстро погибает под действием как физических, так и химических факторов. Высокой степенью устойчивости обладают споры, которые сохраняются десятилетиями и даже столетиями в почве, несколько лет не погибают в воде, выдерживают кипячение в течение 1 ч. и воздействие прямых солнечных лучей до 20 сут. и более. Споры долго сохраняются в шерсти и шкурах погибших животных и в засоленном мясе.
33
Эпидемиология, патогенез, клинические проявления, иммунитет
Сибирская язва – особо опасная зоонозная инфекция, которая получила свое название в связи с эпидемией, возникшей на Урале в конце XIX в. Эпидемиология этой болезни имеет особенность, состоящую в том, что от человека к человеку эта инфекция не передается (тем не менее при заболевании людей их изолируют и предпринимают необходимые меры предосторожности).
Источником инфекции являются больные животные (преимущественно травоядные – крупный и мелкий рогатый скот, лошади, верблюды, свиньи и др.). Они заражаются через корм или воду, в которых находятся споры возбудителя. Иногда сибиреязвенная бацилла может быть передана трансмиссивно при укусе мух, оводов, слепней и других кровососущих насекомых. Эти насекомые являются неспецифическими переносчиками, поскольку возбудитель не проходит никаких циклов развития в их организме. Человек может заразиться сибирской язвой при уходе за больными животными, разделке туш, употреблении мяса, а также при обработке кожи и меха. Существуют профессиональные группы риска: животноводы, ветврачи, работники боен, мясокомбинатов, предприятий кожевенной и меховой отраслей производства.
Входные ворота инфекции – кожа (чаще поврежден-
ная), слизистые оболочки дыхательных путей и пищеварительного тракта.
Инкубационный период – от 6 до 8 дней, чаще 2–3 дня.
Отмечен и еще более короткий период, составивший 15– 20 ч. Сибирская язва в зависимости от места проникновения возбудителя и вызываемых им поражений может протекать в нескольких клинических формах: кожной, кишечной, легочной и септической. При кожной форме в месте локализации возбудителя образуется карбункул – очаг геморрагического
34
некроза, покрытый блестящей корочкой черного цвета, похожей на каменный уголь – антрацит. Отсюда и латинское название болезни «anthrax» – углевик и название возбудителя – Bacillus anthracis. Нагноившийся карбункул вскрывается
иобразуется язва. Кишечная форма проявляется общей интоксикацией и сопровождается тошнотой, рвотой с примесью крови, кровяной диареей. Достаточно редкая легочная форма протекает по типу тяжелой бронхопневмонии. Наиболее тяжелая септическая форма сибирской язвы возникает при нарушении барьерной функции трахеобронхиальных, бронхопульмональных или мезентериальных лимфоузлов и проникновении возбудителя в кровь. Летальный исход при различных формах болезни может наступить через 2–5 сут.
Постинфекционный иммунитет достаточно стойкий
инапряженный, антимикробный и антитоксический, однако есть сведения о повторных случаях заболевания.
Микробиологическая диагностика
В зависимости от клинической формы заболевания материалом для исследования могут служить отделяемое карбункула или язвы, испражнения, моча, мокрота, кровь. При исследовании объектов внешней среды материалом являются почва, вода, корма, животное сырье (кожа, шерсть, щетина, мясо). Основные методы диагностики – бактерио-
скопический, бактериологический, биологический, аллергиче-
ский. Используется также серологический метод (реакция термопреципитации по Асколи) для выявления антигена в объектах внешней среды и патологическом материале. Бактериоскопический метод включает приготовление препаратов и окрашивание их по Граму и методами, позволяющими выявить капсулу. Для люминесцентной микроскопии мазок окрашивают флюорохромными красителями.
35