экспрессию антигенов k, Kp b, Js b, Ku и K12 на эритроцитах. Выводы авторов нашли подтверждение в исследованиях Kaita и соавт. [220], сообщивших о том, что гетерозиготы K о / KpbJs b имели на эритроцитах относительно нормальную экспрессию k, Kp b и Js b.
Далее, Marsh и соавт. [261] описали больную K13 + c остро развившейся, «горячей», как указывают некоторые авторы, АГА, вызванной ауто-K13- антителами. Сначала авторы нашли, что антигены системы Kell и пара-Kell были нормально экспрессированы на эритроцитах пациентки, но в другом сообщении это заключение было ими пересмотрено (Marsh и соавт. [265]). Аутоантитела, фиксированные к поверхности эритроцитов (резко выраженная прямая антиглобулиновая проба), затрудняли фенотипирование, и, кроме того, экспрессия антигенов Kell на эритроцитах пациентки была сниженна.
Ауто-K13-антитела были элюированы с эритроцитов больной (Marsh и соавт. [261]). Они относились к IgG-классу и были вторым образцом антител со специфичностью анти-K13. Других образцов не найдено.
Молекулярная основа фенотипа K13 − неизвестна, хотя с помощью методы иммунопреципитации было установлено, что сам антиген K13 располагается на гликопротеине Kell [269].
K15
На эритроцитах Kо обнаружен другой антиген, Kx (см. система Kx), который присутствует и на нормальных эритроцитах, но скрыт под более разветвленной структурой Kell-гликопротеина. Отсутствие антигенов Kell и одновременное присутствие антигена Kx послужили основанием причислить Kx к системе Kell, и он получил обозначение K15. Однако постепенно выяснилось, что Kell-антигены и Kx-антиген, хотя структурно и связаны, но относятся к разным антигенным системам. Антиген Kx находится на иных мембранных компонентах эритроцитов, чем гликопротеин, который несет на себе антигены системы Kell. Продукция Kx кодируется локусом XK, расположенным на Х-хромосоме, в то время как локус KEL находится на хромосоме 7. В связи с этим обозначение K15 было упразднено, антиген Kx получил статус системы, которой присвоен номер ISBT 019 [141].
K16
В 1976 г. Marsh [цит. по 204] описал k-подобный антиген, получивший номер K16, который выявляли на эритроцитах 99,8 % людей. Ранее Marsh и Allen отметили, что k-подобный антиген присутствует на эритроцитах k + и отсутствует на эритроцитах k −. Различие между антигенами k и K16 заключалось лишь в том, что эритроциты фенотипа McLeod имели слабовыраженный k-антиген, k + w, но при этом были K16 −. Осталось невыясненным: была ли разница количественной или качественной. Других сообщений об исследовании антигена K16 не было, и он продолжает оставаться в номенклатуре ISBT.
356
K18
Антиген K18 – единственный из всех антигенов, наследственную передачу которого не удалось проследить, поскольку все тестированные люди являлись носителем этого антигена, т. е. были K18 +. Исключение составили 2 человека (женщина и мужчина), эритроциты которых не содержали антигена K18, а в сыворотке их крови имелись анти-K18-антитела [98, 307]. Среди 54 450 доноров не найдено ни одного K18 − (Barrasso и соавт. [97]).
Первый образец сыворотки анти-K18 нашли Barrasso и соавт. [98] в 1975 г.
уженщины, имевшей 8 беременностей и 1 трансфузию крови. Сыворотка содержала смесь антител анти-K1 и антител IgG, получивших наименование анти-K18. Последние реагировали со всеми исследованными эритроцитами (2000 образцов K −), включая редкие фенотипы: K12 −, K13 − и др., но не ре-
агировали с эритроцитами Kо и эритроцитами самой женщины. Авторы отметили, что антиген K18 сильнее экспрессирован на эритроцитах Kp(b + ), чем Kp(b −), а также сильнее выражен на эритроцитах K13 +, чем K13 −. Экспрессия антигена K18 на эритроцитах фенотипа McLeod была самой слабой.
В1983 г., через 8 лет после своей находки, Barrasso и соавт. [97] опубликовали дополнительные данные о K18-антителах и их вероятном клиническом значении. Антитела анти-K18 представляли собой комбинацию иммуноглобулинов в основном субкласса IgG4 и небольшого количества IgG1 и, как предполагалось, не должны были вызывать сильного разрушения эритроцитов in vivo. Однако пробная инъекция эритроцитов K1 −K18 +, меченных Cr51, показала, что более 60 % перелитых клеток разрушались в кровотоке пациентки в течение первых 24 ч после введения. Проба с фагоцитозом в моноцитарном монослое также свидетельствовала о несовместимости эритроцитов K18 + и возможности их быстрого выведения из циркуляции. Полученные результаты побудили лечащих врачей отказаться от трансфузии эритроцитов и изменить тактику лечения.
Второй образец K18-антител обнаружили Pehta и соавт. [307] в 1990 г.
умужчины 78 лет, получившего трансфузию. В его сыворотке, так же как у описанной выше женщины, присутствовали антитела анти-K1 и анти-K18. Авторы указали на интересную особенность: эритроциты пациента не реагировали с сыворотками анти-Yt a и анти-Yt b, т. е. были Yt(a −b −). По этому поводу Issitt, Anstee [204] дали комментарий, что это второй из известных случаев Cartwright-отрицательного фенотипа. Первый был обусловлен транзиторным подавлением экспрессии антигенов системы Cartwright. Пробанд Yt(a −b −), описанный Pehta и соавт. [307], представлял собой, по-видимому, такой же феномен.
Вметоде проточной цитометрии эритроциты K18 + сына пациента реагировали слабее, чем эритроциты K18 + других лиц, что, как считают авторы, подтверждает принадлежность этого пара-Kell-антигена к системе Kell. Отсутствие
357
антигена K18 у отца отразилось в силу эффекта дозы на слабой выраженности антигена K18 у сына.
Lee и соавт. [231] показали, что, несмотря на серологическую идентичность обоих пробандов, фенотип K18 − сочетался с различными нуклеотидными заменами в одном и том же кодоне экзона 4: в первом случае – C 508T, приводящая к за- мещениюArg130Thr;вовтором–G509A,приводящаякзамещениюArg130Gln.
K19
Первые анти-K19-антитела обнаружили Sabo и соавт. [337] в 1997 г. в сывороткебелойженщинысорокалет,имевшей7беременностей,однаизкоторых закончилась рождением живого ребенка, 6 – самопроизвольными выкидышами при сроках от 2 до 5 мес. Сыворотка женщины содержала, помимо K19-антител, слабые K1-антитела и реагировала со всеми эритроцитами, имевшими обычный фенотип по антигенам системы Kell, а также с эритроцитами, не содержавшими рядаобщихантигеновKellипара-Kell.Сыворотканереагироваласэритроцитами гомозигот Ko, собственными эритроцитами и эритроцитами трех ее сибсов.
Экспрессия k, Kp b, Js b и других часто встречающихся антигенов системы Kell и пара-Kell на эритроцитах K19 − была нормальной в отличие от фенотипа K13 −, для которого характерна сниженная экспрессия указанных антигенов.
Антиген K19, как и антиген K18, был сильнее экспрессирован на эритроцитах Kp(b + ), чем Kp(b −), а также сильнее выражен на эритроцитах K13 +, чем K13 −. На эритроцитах фенотипа McLeod экспрессия антигена K19 была наименьшей.
Среди7294обследованныхдоноровSaboисоавт.[337]ненашлиниодногоK19 −. Второй случай K19-антител в том же 1979 г. описали Marsh и соавт. [260] у 47-летнего мужчины (негра), которому произвели несколько трансфузий крови в связискровотечением.Авторынаблюдалиотсроченнуютрансфузионнуюреакцию за счет анти-K19-антител, которая проявилась в том, что все перелитые эритроциты K19 + (4 дозы) через 10 дней после переливания исчезли из кровяного русла реципиента. Убыль эритроцитов K19 + в кровотоке реципиента обусловливалась такжесамимкровотечением.Попыткаавторов найтисовместимогодоноранепривела
куспеху:из3463обследованныхнеудалосьнайтичеловекаK19 −.
Витоге из 10 757 человек, в основном представителей белой расы, не оказалось ни одного K19 −.
Lee[231]приисследованиимолекулярнойосновыфенотипаK19 −нашел,чтооба пробандаK19 −имелитранзициюG1595Aвэкзоне13,кодирующуюArg492Gln.
K22
Антиген K22, часто встречающийся (общий), обнаружен в 1982 г. Bar Shany
исоавт. [96]. Лица, не содержащие этого антигена (K22 −), найдены только среди евреев персидского происхождения. Первую сыворотку анти-K22 Bar Shany
исоавт. получили от женщины израильтянки, когда она сдавала кровь в качестве донора. Женщина никогда не имела трансфузий, ни у одного из ее 4
358
сыновей, имевших фенотип K22 +, признаков ГБН при рождении не зарегистрировано. Антитела реагировали со всеми образцами эритроцитов общих и редких Kell-фенотипов, в том числе с одним образцом эритроцитов McLeod. Со вторым образцом эритроцитов McLeod сыворотка визуально не реагировала, но, как потом выяснилось, анти-K22-антитела адсорбировались на этих эритроцитах. Антитела не реагировали с эритроцитами гомозигот Ko, собственными клетками женщины и эритроцитами одной из трех ее сестер. При обследовании более 500 израильских доноров (в основном представителей смешанных рас) лиц K22 −, кроме носительницы K22-антител и ее сестры, обнаружено не было.
Второй образец K22-антител обнаружили Manny и соавт. в 1985 г. [256]. Как
ив первом случае, антитела образовались у женщины, еврейки из Ирана, живущей в Израиле. Анти-K22-антитела были выявлены во время ее 4-й беременности. У ребенка после рождения отмечали небольшую желтуху, прямая проба Кумбса была положительная.
Уместно подчеркнуть, что обследованная была D − K −. После 1-й беременности она получила трансфузию крови, четверо ее детей имели группу крови D +, один из них был K +, тем не менее образовавшиеся антитела имели только анти- K22-специфичность. Многие сыворотки, содержащие аллоиммунные антитела к часто встречающимся антигенам Kell и пара-Kell, также содержат анти-K и другие антитела. Описанный Manny и соавт. случай является исключением.
Четвертая и две последующие беременности этой женщины были описаны в более поздней публикации Levene и соавт. [247]. Авторы нашли, что 4-я
и5-я беременность сопровождалась анти-K22-антителами IgG1. У обоих детей при рождении прямая проба Кумбса положительная. Купирование легкой степени ГБН в обоих случаях ограничилось фототерапией. При рождении 6-го ребенка также наблюдали положительную прямую пробу Кумбса с эритроцитами пуповинной крови. Антитела имели изотип IgG1 и IgG3. Ребенок был тяжело болен, и для его лечения произведено обменное переливание отмытых эритроцитов матери.
Исследование семьи 2-го пробанда (родителей и 5 детей, включая обследуемую) позволило Manny и соавт. придти к заключению, что антиген K22 связан с системой Kell. От родителей, имеющих фенотип K +k + K22 +, ген K22 передавался вместе с K, а K22 − (молчащий ген) – вместе с k. Иными словами, пробанд и 2 ее сибса были K −k + K22 −, а другие 2 сибса – K +k + K22 +. Как указывают авторы, родители обследованнойбыликровнымиродственниками.Тестирование217несвязанныхродством людейизэтническойгруппыевреев(выходцевизИрана)невыявилолицK22 −.
Антиген K22 нормально экспрессирован на эритроцитах Kp(a +b −) и K13 − в отличие от других антигенов (k, Kp b, Js b, Ku, K12, K18 и K19), которые на эритроцитах Kp(a +b −) и особенно K13 − выражены слабо.
Антиген K22 находится на гликопротеине с мол. массой 93 кДа. Три не связанных родством лица K22 − имели нуклеотидную замену C 1085 T, кодирую-
щуюAla 322 Val (Lee [231]).
359
K23
В 1987 г. Marsh и соавт. [270] нашли редко встречающийся антиген, получивший обозначение K23. Сыворотка, выявляющая этот антиген, принадлежала женщине, итальянке по происхождению, имевшей 4 беременности. У ее 3-го ребенка при рождении прямая проба Кумбса резко положительная, однако симптомы ГБН отсутствовали. Сыворотка крови женщины и антитела, элюированные с эритроцитов ребенка, реагировали с эритроцитами двух ее детей, эритроцитами мужа и свекрови. В то же время сыворотка не реагировала со стандартными эритроцитами, содержавшими в различных комбинациях часто и редко встречающиеся антигены Kell, а также не реагировала ни с одним из 2116 образцов эритроцитов обычных доноров.
Эритроциты мужа утрачивали серологическую активность после обработки АЕТ или ZZAP. Гликопротеин, выделенный из них посредством иммунопреципитации антителами обследуемой, имел мол. массу 93 кДа, и, как потом было установлено, реагировал с кроличьими антителами к гликопротеину Kell.
Антиген K23 не имеет антитетичного партнера.
Два члена семьи, гетерозиготные по антигену K23 (K23 +/K23 −), имели замещение A 1265 G, кодирующее Gln 382 Arg и создающее участок рестрикции
BcnI (Lee [231]).
VLAN (K25)
Первый и единственный образец анти-VLAN-антител с изотипом IgG1 + IgG2 обнаружили Jongerius и соавт. [215] при проведении пробы на совместимость. Сыворотка крови больного 60 лет (выходца из Голландии), содержащая эти антитела, реагировала в непрямой антиглобулиновой пробе только с 4 образцами эритроцитов: эритроцитами донора (датчанина по происхождению), эритроцитами двух его сестер и племянницы. Других лиц VLAN + авторы не нашли, обследовав 1068 доноров.
Попытка обнаружения антигена, антитетичного антигену VLAN, к успеху не привела: анти-VLAN-антитела не реагировали ни с одним из образцов стандартных эритроцитов, лишенных того или другого часто и редко встречающегося антигена.
Обработка эритроцитов АЕТ вызывала инактивацию антигена VLAN.
Для того чтобы установить локализацию антигена VLAN, авторы использовали метод конкурентного связывания антител (MAIEA): сравнивали блокирующий эффект VLAN-антител по отношению к 6 моноклональным антителам, направленным против различных эпитопов гликопротеина Kell. Эксперименты показали, что антиген VLAN располагается на гликопротеине Kell с мол. массой 93 кДа примерно в том же участке, где расположены антигены Kp а, Kp b и Kp с. Высказано предположение что ген, кодирующий продукцию VLAN, является 4-м аллелем сублокуса KpаKpbKpс.
Полученные Jongerius и соавт. данные позволили причислить VLAN к
360