Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

Молекулярно-биологические исследования Lee и соавт. [234] подтвердили,

что K14 и K24 являются аллелями (см. Молекулярная основа антигенов Kell).

Получены мышиные моноклональные IgG анти-K14-антитела [144, 297].

Другие редкие и частые антигены Kell

Редкими Kell-антигенами у европеоидов являются Js a,Ul a, Kp c (или Levay), K23, VLAN, частота которых составляет менее 0,1 %.

Частые антигены, среди которых большинство пара-Kell, присутствуют практически у всех людей за чрезвычайно редким исключением. К частым от-

носятся антигены Bockman, Sgro, Marshall, Sublett, Km, Ikar,TOU (см. табл. 5.1).

Обе упомянутые категории антигенов (редкие и частые) отсутствуют на эритроцитах Ko, слабо экспрессированы или совсем не экспрессированы на эритроцитах с фенотипом McLeod. Как показано с помощью иммунохимических методов, все они, за исключением K24, расположены на Kell-гликопротеине [210, 213, 215, 269, 307, 310], и их молекулярное строение изучено, кроме

K5 (Ku), K13 (Sgro), K16 (k-like), K30 (Km).

Пара-KEL-антигены

В группу пара-KEL выделены антигены, связь которых с системой KEL недостаточно подтверждена популяционными и посемейными исследованиями, но результаты ДНК-типирования носителей антигенов и антител дают основание полагать, что таковая может иметь место. KEL и пара-KEL располагаются на одном протеине [241]. Трудность причисления пара-KEL-антигенов к системе KELобусловлена высокой частотой их встречаемости – почти 100 %. Для того чтобы найти людей, не содержащих пара-KEL-антигенов, и доказать существование антитетичных им антигенов, требуется обследовать огромное число людей. Однако эти антигены могут и не иметь антитетичного партнера, а антитела к ним продуцируют единичные лица, имеющие редкую, возможно неповторимую, точечную мутацию в локусе KEL.

К пара-KEL-антигенам относятся Bockman, Sgro, Marshall, Sublett, Ikar, K23. Им присвоены соответствующие порядковые номера и индексы ISBT (см. табл. 5.1).

Некоторые антигены, относимые ранее к пара-KEL, например Cote и Santini, переведены в разряд образующих систему Kell: Cote (K11), как указывалось выше, является аллелем четвертой пары антитетичных антигенов – K11 и K17; Santini (K14) – аллелем пятой пары антитетичных антигенов – K14 и K24.

Ku (K5)

Антиген Ku присутствует на эритроцитах всех людей, за исключением лиц Kellnull (см. Ko). Соответственно антитела анти-Ku могут вырабатывать только лица с фенотипом Ko, эритроциты которых лишены всех известных антигенов Kell, в том числе антигена Ku.

ИсторияоткрытияантигенаKuмалочемотличаетсяотисторииобнаружения

351

других антигенов эритроцитов, но вместе с тем имеет свои оттенки. В 1957 г. Chown и соавт. [125] описали женщину (миссис Peltz), эритроциты которой не содержали 4 известных к тому времени антигенов Kell: K, k, Kp a и Kp b. Это было первое описание необычного фенотипа K −k −Kp(a −b −), получившего название Ko. В сыворотке крови миссис Peltz авторы обнаружили антитела, которые затем более подробно были изучены Corcoran и соавт. [134]. Сыворотка анти-Пельтц, как ее обозначили сначала, содержала смесь антител против нескольких антигенов Kell. Они реагировали с эритроцитами K + и k +. С помощью методов дифференциальной адсорбции и элюции антител эритроцитами K −k +, K +k − и Kp(a +b −) было показано, что в сыворотке анти-Пельтц присутствовало антитело, которое, будучи изолированным от других антител, реагировало со всеми эритроцитами, кроме фенотипа Kellnull. Это антитело получило обозначение анти-Ku. Авторами был сделан вывод, что Ku-антитела направлены к антигену, присутствующему на всех эритроцитах, несущих антигены Kell, независимо от их сочетания.

Ku-антитела реагируют с эритроцитами лиц, имеющих фенотип McLeod (см. McLeod), при котором антигены Kell выражены крайне слабо. Эту особенность Ku-антител используют для того, чтобы отличить фенотип Ko, полностью лишенный антигенов Kell, от фенотипа McLeod, содержащего исчезающие количества антигенов Kell. По-видимому, для распознавания антигена Ku анти-Ku-антителами достаточно следов гликопротеина Kell на поверхности эритроцитов.

Молекулярная структура антигена Ku не установлена. Основная трудность ее расшифровки, по-видимому, заключается в том, что иммунодоминантная аминокислотная последовательность антигена Ku чрезвычайно проста и по многу раз повторяется в структуре Kell-антигенов. Можно провести определенную аналогию между специфичностью Ku-антигена и видовой специфичностью. Видовая (общая) специфичность присуща всем антигенам независимо от их качественных различий. Вместе с тем видовой антиген как химическая структура не обозначен. Точно так же специфичность Ku присуща каждому из 24 известных антигенов системы Kell. Большинство мышиных моноклональных антител к различным участкам гликопротеина Kell напоминают Ku-антитела по их реакции со всеми образцами эритроцитов, исключая Ko

[128, 144, 202, 303, 304, 329].

Несмотря на то что люди с фенотипом Ko встречаются редко, описано много случаев анти-Ku-антител у лиц польского, финского, голландского, австралийского и другого происхождения. Характерно, что почти у половины из них родители были родственниками: двоюродными и троюродными братьями и се-

страми [253, 269, 299, 318, 346]).

Анти-Ku-антитела вызывают гемолитические трансфузионные реакции, вплоть до анурии [299], и ГБН [125, 269].

352

Kw (K8)

Обнаруженный Bove и соавт. [106] антиген K w получил порядковый номер K8, однако исследование этого антигена осталось незавершенным из-за утраты антител анти-K w, в связи с чем он был исключен из номенклатуры ISBT.

KL(K9)

В 1968 г. голландские исследователи Van der Hart и соавт. [377] нашли в крови пятилетнего мальчика по фамилии Клаас (Claas) антитела, получившие название анти-KL. Последние не реагировали с его собственными эритроцитами и эритроцитами McLeod, но вступали в реакцию с эритроцитами 6150 доноров Красного Креста Нидерландов, включая K +k −, Kp(a +b −), Js(a +b −), а также 4 образцами эритроцитов Kо. Ребенок имел фенотип, подобный фенотипу McLeod: K −k± Kp(a −b±) Js(a −b±). Пробы с адсорбцией – элюцией позволили установить, что анти-KL-антитела направлены против всего комплекса антигенов Kell. Путем адсорбции сыворотки анти-KLэритроцитами с разным фенотипом Kell удалось выделить 2 фракции антител, одна из которых активно реагировала с эритроцитами K −k +, но слабо – с эритроцитами Kо, другая, наоборот, сильнее реагировала с Kо-клетками и содержала анти-Kx-антитела. Тот факт, что анти-KL-антитела реагировали с эритроцитами Kо,лишенными всех Kell-антигенов, но не реагировали с эритроцитами McLeod, содержащими некоторое количество антигенов Kell, указывал на определенную связь антигена KLс системой Kell.

Родителимальчикаоказалисьтроюроднымибратомисестрой.Ониимелиобычныйфенотип:K −k +Kp(a −b + )Js(a −b + ),какидвадругихродственникапробанда.

Описано несколько случаев анти-KL-антител, все они – у больных хроническим гранулематозом [360]. У мальчика Клааса при ретроспективном рассмотрении отмечали рецидивирующие кокковые инфекции, которые, по-видимому, являлись проявлением недиагностированного гранулематоза.

Антиген KLполучил номер ISBT 006009, означающий принадлежность к системе Kell, однако позднее (в 1995 г.) исключен из номенклатуры Kell-системы.

Ula (K10)

В 1967 г. Furuhejelm и соавт. [169] при проведении пробы на индивидуальную совместимостьобнаружилиантиген,который,какпозжевыяснилось,встречается почти исключительно у финнов. Антиген получил обозначение Ul a – по фамилии больного (Karhula), носителя антител.Из 2620 доноров, жителей Хельсинки, 68 (2,6 %) были Ul(а + ). Среди обособленно проживающих коренных финнов частота Ul a была выше – до 5 %. У шведов 1 из 501 обследованного оказался носителемантигенаUl a (0,19 %).ЧастотаUl a средияпонскихдоноров,поданнымOkubo и соавт. [300], составила 0,46 % (37 лиц Ul(а + ) из 8000 обследованных). Антиген Ul a не был найден Bowel, Strange [цит. по 318] при обследовании 140 саамов, 66 негров, 5000 англичан и 314 других белых – не скандинавов.

Исследование семей (около 350 человек, 18 из которых были Ul а + ), показало,

353

что антиген Ul a наследуется независимо от многих групповых антигенов за исключением системы Kell. Несмотря на относительно низкую частоту антигена K у финнов – 4,1 %, и малую частоту антигена Ul a – 2,6 %, Furuhjelm и соавт. [168]нашли 3 семьи, родители и дети в которых были K + Ul(a + ), и установили, что у всех 13 детей Ula наследовался без K1 как Ula / k. Авторы пришли к заключению, что ген Ula контролируется локусом KEL (или очень близко к нему расположен), однако не является аллелем K и k; Kpа, Kpb или Kpс.

Не накоплено еще данных, позволяющих считать антиген Ul a антитетичным по отношению к Js a и Js b, Wk a и K11, K14 и K24, а также к часто встречающим-

ся антигенам Kell и пара-Kell: K12, K13, K18, K19, K20 и K22, не имеющим ан-

титетичных партнеров.

Анти-Ul a-антитела встречаются редко. Описано 4 случая: 2 – в Финляндии

(Furuhejelm и соавт. [168, 169]), 2 – в Японии (Okubo и соавт. [300], Sakuma и со-

авт. [338]). В 3 случаях антитела присутствовали у пациентов, имевших трансфузии эритроцитов, причем 1 из них, японец, получил трансфузию 15 лет назад. В четвертом случае Ul a-антитела обнаружены у японской женщины, имевшей 3 беременности (Sakuma и соавт. [338]). У женщины не было переливаний крови, но у ее ребенка зафиксирована ГБН средней тяжести, причиной которой, как полагают авторы, послужили Ul a-антитела. При обследовании 19 финских женщин UI(a −), родивших детей UI(a + ), анти-UI a-антитела не были обнаруже-

ны (Furuhejelm и соавт. [169]).

Okubo и соавт. [300] не выявили Ul a-антител при обследовании 66 000 японских доноров.

Как отметили Race и Sanger [318], если бы удалось найти антиген Ul b, то гены Ula и Ulb составили бы четвертую пару аллелей комплекса KEL. Однако антиген Ul b до сих пор не обнаружен. Race и Sanger [318] высказали суждение, что антиген Ul а у финнов подобен антигену Js a у негров. И тот, и другой входят в систему Kell, но присутствуют только у лиц определенной расовой принадлежности.

Антиген Ul a является результатом трансверсии (рассечения) экзона 13 гена KEL в участке А 1601 Т, приводящей к замещению Glu 494 Val (Lee и соавт. [241]).

Более ранние исследования, проведенные Miyata и соавт. (цит. по Issitt, Anstee [204]), показали, что, как и другие антигены системы Kell, UI a полностью развит при рождении.

K12

В1973 г. Marsh и соавт. [272] описали две сыворотки, Boos и Sp, которые выявляли часто встречающийся антиген, присутствующий на всех эритроцитах, кроме эритроцитов носителей антител. Антиген получил обозначение K12.

В1982 г. Beanie и соавт. [99] обнаружили антитела с аналогичной специфично- стьюанти-K12у2братьевсфенотипомK12 −,имевшихтрансфузииэритроцитов.

354

В 1995 г. был описан (Reid и соавт. [327]) еще 1 мужчина, эритроциты которого были K12 −, а сыворотка крови содержала анти-K12-антитела.

Причислить антиген K12 к системе Kell позволили 3 обстоятельства: этот антиген отсутствовал на эритроцитах гомозигот K о, имел слабую экспрессию на эритроцитах лиц с фенотипом McLeod, разрушался (как все другие антигены Kell) при обработке эритроцитов АЕТ.

С помощью методов конкурентного связывания антител и иммунопреципитации (MAIEA*) установлено, что K12 расположен на гликопротеине Kell и его можно считать полноправным антигеном этой системы, а не относить, как ранее, к пара-Kell-антигенам.

Лица K12 − найдены только среди белых. Сообщение Marsh и соавт. [272] о том, что один из K12 − был негром, позднее скорректировал Taylor [366]: как он выяснил, этот пациент относился к белой расе.

Beanie и соавт. [99], Reid и соавт. [327] отметили, что переливание эритроцитов K12 + больным, имеющим анти-K12-антитела, существенно не сказывалось на клиренсе эритроцитов in vivo и не имело каких-либо отрицательных последствий для реципиентов. После трансфузии у больных появлялась положительная прямая проба Кумбса и по прошествии времени повышался, но не во всех случаях, титр анти-K12-антител.

Случаев ГБН, обусловленных анти-K12-антителами, не описано. Все найденные антитела были связаны с трансфузиями эритроцитов.

K13

Антитела к часто встречающемуся антигену K13 обнаружены в 1974 г. Marsh и соавт. [267] в сыворотке крови белого американца итальянского происхождения, который в прошлом получал трансфузии. Антитела реагировали in vitro с эритроцитами любого фенотипа системы Kell, включая McLeod, но не реагировали с эритроцитами Kо и собственными. О клиническом значении анти-K13- антител сведения отсутствуют. Сестра пробанда была K13 −, имела 7 беременностей, но анти-K13-антител не выработала. Авторы не указали, были ли родители упомянутых K13-отрицательных сибсов кровными родственниками.

На эритроцитах пробанда и его сестры наряду с отсутствием антигена K13 авторыотметилинизкуюэкспрессиюантигеновk,Kp b,Js b,KuиK12.Втожевремяэри- троцитысильнореагировалиссывороткойанти-Kx,чтохарактернодляэритроцитов Ko-гетерозигот. Анализируя полученные данные, Marsh и соавт. пришли к заключе- нию,чтоотсутствиеантигенаK13наKell-гликопротеинеугнетаетэкспрессиюдругих антигеновKell-системыаналогичноKp а-эффекту(см.Kpа-эффект),когдаулицсKpа наоднойхромосомеиKo надругойснижаетсявыраженностьвсехKell-антигенов.

Эффект ослабления Kell-антигенов у пробанда и его сестры, как полагали Marsh и соавт., был связан именно с гаплотипом K13 −, а не с гаплотипом K o, поскольку другие члены семьи, которые были K о / K13, имели нормальную

* MAIEAmonoclonal antibody-specific immobilisation of erythrocyte antigens assay.

355