Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

* Диспермия – редкое явление, при котором организм развивается из яйцеклетки, оплодотворенной двумя сперматозоидами, или из двух слившихся оплодотворенных яйцеклеток.

Л.П. Порешина и др. [88, 89], Е.А. Зотиков и др. [58], Ren и соавт. [560]). В литературе обсуждаются 2 типа трансплантационных химер. Первый тип – полные химеры – полная замена эритроцитов реципиента на эритроциты донора. В буквальном смысле полная замена это уже не химера, поскольку присутствует только одна популяция эритроцитов донорского фенотипа. Второй тип – смешанные, или истинные, химеры – частичная замена эритроцитов реципиента на эритроциты донора.

Оригинальная классификация трансплантационных химер предложена Л.П. Порешинной и соавт. [88, 89]. Авторы отметили вариабельность эритроцитарного химеризма и выделили несколько типов, подтипов, вариантов и подвариантов химер. Варианты химер по антигенам Rh отражают характер приживления костного мозга.

281

Свойства резус-антител

Серологические и физико-химические свойства резус-антител изучены в основном с начала 1940-х до конца 1970-х годов (табл. 4.38).

Вотличиеотгрупповыхизогемагглютининоврезус-антителаимеют,какправило, иммунное происхождение. Они являются тепловыми. Их температурный оптимум находится в пределах 37  оС, поэтому подавляющее большинство методов выявления резус-антител и определения резус-фактора основано на использовании различных нагревательныхприборов.Установленотакже,чтодляактивностирезус-антителнаи- болееблагоприятнасредаснейтральнымилислабокислымpH(Carter[195]).

По своему характеру антирезусные антитела могут быть 2 видов: полные (бивалентные, IgM), проявляющие агглютинирующие свойства как в солевой, так и в коллоиднойсреде,инеполные(моновалентные,IgG),которыевсолевойсредефиксируются к поверхности эритроцитов, но их не агглютинируют. Неполные антителамогутагглютинироватьэритроцитытолькоприопределенныхусловиях.Такими условиями является введение в реакцию коллоидных растворов, антиглобулиновой сывороткиилиобработкаэритроцитовпротеолитическимиферментами.

Полные и неполные резус-антитела отличаются не только своими серологическими свойствами. Campbell, Sturgeon и Vinograd [193], применив ультрацентрифугирование, показали, что неполные антитела (9S) по сравнению с полными (19S) имеют меньшую константу седиментации и, соответственно, меньшую мол. массу. В связи с этим неполные резус-антитела легко проникают через плацентарный барьер, поэтому чаще вызывают гемолитическую болезнь новорожденных. Таким образом, неполные антитела имеют большее значение

282

вклинике, чем полные, тем более, что они встречаются значительно чаще по сравнению с полными. Очевидно, выработка неполных антител в процессе иммунизации резус-антигеном является более совершенной формой иммунного ответа, чем образование полных антител. Обоснованием этого положения могут служить наблюдения Diamond и Denton [263], подтвержденные в последующие 50 лет многими исследователями. Авторы установили, что первичная иммунизация резус-антигеном завершается выработкой полных резус-антител, которые при повторных антигенных воздействиях трансформируются в неполные.

Мы наблюдали при искусственной иммунизации добровольцев переключение синтеза антител с полных на неполные [121]. У одной из иммунизированных женщин после первого курса иммунизации (6 внутривенных введений по 8–10 мл эритроцитов Rh + ) сразу выработались неполные антитела с титром 1 : 8, у другой – полные антитела с титром 1 : 2. После второго курса иммунизации (3 инъекции эритроцитов Rh + ) титр неполных антител достиг у первой – 1 : 256, у второй – 1 : 32. Полные антитела отсутствовали.

Учитывая большую роль неполных резус-антител как в клинической, так и

влабораторной практике, в частности в работе по приготовлению тестовых антирезусных сывороток, считаем необходимым более подробно остановиться на описании их серологических свойств.

Впервые годы после открытия резус-фактора многие исследователи отмечали, что при помощи существующего в то время метода солевой агглютинации у 40–50 % лиц, сенсибилизация которых позже подтвердилась тяжелыми посттрансфузионными осложнениями или смертью плода от эритробластоза, не удавалось выявить резус-антитела (Diamond и Denton [263]). Это обстоятельство ставило под сомнение этиологическую роль резус-фактора в развитии указанных осложнений. Однако в 1944 г. Race [542] показал, что причиной этих осложнений были неполные резус-антитела, качественно иные, чем те, которые выявляют реакцией агглютинации в солевой среде.

Втом же году Wiener [705] показал, что если к эритроцитам, нагруженным неполными резус-антителами, добавить агглютинирующие, полные, резусантитела, то агглютинации эритроцитов не происходит. Фактором, ингибирующим агглютинацию, являлись неполные антитела, которые блокировали поверхность эритроцитов, делая ее недоступной для агглютинирующих антител. Wiener назвал такие антитела блокирующими, а несколько позднее они получи-

ли название ингибирующих (Diamond,Abelson [262]).

Далее Diamond и Abelson [262], Diamond и Denton [263] нашли, что непол-

ные антитела не только связываются с эритроцитами, но и могут вызывать их агглютинацию, однако для этого необходимо солевой раствор заменить плазмой или альбумином.

Wiener высказал предположение, что этот феномен обусловлен конглютининами плазмы и предложил назвать эту реакцию реакцией конглютинации в отличие от агглютинации, наблюдаемой в солевой среде.

283

Это предположение в некоторой степени подтвердили исследования Cameron и Diamond [192], которые установили, что все известные компоненты плазмы (за исключением α-глобулинов) обладают конглютинационными свойствами, т. е. в их присутствии неполные антитела проявляют агглютинирующую активность.

Вскоре было показано, что конглютинационные свойства присущи не только коллоидам плазмы, но и целому ряду природных и синтетических коллоидных растворов: желатину (Fick, Mc Gee [286]), декстрану (Grubb [324]), поливинилпирролидону (А.Я. Ашкенази [13]), гепарину (Spielmann [624]).

Вопрос о конглютинирующем действии коллоидов и механизме реакции конглютинации различные авторы рассматривают по-разному.

Wiener полагал, что агглютинация эритроцитов неполными антителами возможна лишь под воздействием сложного белкового комплекса, содержащегося в плазме и представляющего собой комбинацию альбуминов, глобулинов, фибриногена и фосфолипидов. По мнению Wiener, этот третий компонент реакции, адсорбируясь на сенсибилизированных неполными антителами эритроцитах, способствует их агглютинации.

Bocci [175] связывает конглютинационную активность плазмы с содержанием в ней Х-протеина. В подтверждение этого автор приводит данные о том, что бедная Х-протеином плацентарная сыворотка в отличие от нормальной донорской не обладает конглютинационными свойствами.

Dausset [252] предложил другое объяснение. Согласно его концепции, неполные резус-антитела являются не одновалентными, как считают многие авторы, а двухвалентными. Одной из валентностей неполные антитела могут связываться с эритроцитами в солевой среде подобно агглютининам, в то время как другая, «неполная», валентность проявляет свою активность только в растворе коллоида.

По мнению Dausset, действие коллоида основано не на создании недостающей неполным антителам валентности, как считал Wiener, а на создании условий, обеспечивающих фиксацию «неполного» конца антитела к соответствующему антигену.

С точки зрения Hummel [367], агглютинация эритроцитов неполными антителами в коллоидной среде обусловлена свойством коллоидов нарушать суспензионную стабильность эритроцитов дегидратацией их водных оболочек. Агглютинация наступает только в том случае, если водные оболочки эритроцитов (водные перемычки, отделяющие эритроциты друг от друга) полностью дегидратированы, т. е. переведены в гидрофобное состояние.

Hummel полагал, что неполные резус-антитела в отличие от полных не обладают способностью дегидратировать водные оболочки эритроцитов, поэтому агглютинации не происходит. Добавление какого-либо конглютинирующего коллоида завершает процесс дегидратации эритроцитов и приводит к их агглютинации.

284

Hummel объясняет механизм реакции конглютинации суммарным дегидратирующим эффектом неполных антител и коллоида, приводящим эритроциты к потере суспензионной стабильности и последующему склеиванию.

С.С. Харамоненко [124] считает, что в основе агглютинации сенсибилизированных неполными антителами эритроцитов в коллоидной среде лежат 2 взаимосвязанных фактора: с одной стороны, дегидратация эритроцитов, с другой – снижение их электрического заряда.

Определенный интерес представляют данные, полученные Punin [539]. Автор установил зависимость конглютинационных свойств коллоидов от их мол. массы и силы электрического заряда. В роли конглютининов, по мнению Punin, могут выступать только высокомолекулярные отрицательно заряженные коллоиды, которые вступают в связь с положительно за­ряженными группами сенсибилизированных неполными антителами эритроцитов и вызывают их склеивание.

Hirszfeld и Dubiski [350] придерживаются иного мнения. Известно, что эритроциты в коллоидных средах – декстране, желатине и др. – легче агрегируются, быстрее оседают и их осадок занимает меньший объем по сравнению с осадком в изотоническом растворе натрия хлорида. Это обстоятельство авторы положили в основу своей концепции. Они полагают, что неполные антитела в данном растворе не вызывают агглютинации эритроцитов, поскольку их молекулы значительно короче молекул полных антител. Добавление конглютинирующих коллоидов способствует сближению эритроцитов.

Hirszfeld, Dubiski установили также, что агглютинацию эритроцитов неполными антителами можно вызвать и в солевой среде ультрацентрифугированием эритроцитов при 12 000 об / мин. При этом эритроциты приближаются друг к другу на короткое расстояние, достаточное для проявления агглютинирующей способности неполных антител.

Таким образом, авторам удалось экспериментально подтвердить свое предположение и доказать, что сближение эритроцитов является основным условием, способствующим их агглютинации неполными антителами. По-видимому, подобное объяснение роли коллоидов в механизме реакции конглютинации наиболее близко к действительности.

Значительным достижением в изучении неполных резус-антител явилось открытие ферментных реакций.

В 1946 г. Pickles [525] было обнаружено, что неполные резус-антитела приобретают способность агглютинировать эритроциты, обработанные фильтратом культуры холерного вибриона.

Через год Morton и Pickles [490] получили аналогичный эффект после обработки эритроцитов раствором трипсина.

С этого времени началось интенсивное изучение протеолитических ферментов с целью использования в серологических методиках. За короткий срок, с 1946 по 1960 год, различными авторами был предложен целый ряд ферментов

285