Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

меньше – 77,2 % (табл. 4.29). Относительный риск сенсибилизации (R) для резусотрицательных соответствовал 3,56. Вместе с тем частота нереспондеров (не выработавших антитела) среди резус-отрицательных­ лиц была почти в 3 раза ниже.

Полученные данные свидетельствуют о том, что резус-отрицательные лица более склонны вырабатывать антитела не только к аллоантигенам, но и к гетероантигенам (в данном случае к стафилококковому анатоксину).

Таблица 4.29

Распределение Rh + и Rh − среди лиц, иммунизированных стафилококковым анатоксином

Разные соотношения резус-положительных и резус-отрицательных лиц в популяции и среди людей, имеющих антилимфоцитарные, антиэритроцитарные и антистафилококковые антитела, дают основание предполагать существование определенной связи между генами RH и генами иммунного ответа Ir, несмотря на то, что они располагаются на разных хромосомах.

Поскольку в отсутствие гена D выработка антител происходила в 2 раза чаще, чем при его наличии, можно предположить, что способность к гуморальному иммунному ответу на аллоантигены связана с генoм RHce.

Полученные нами фактические данные о неодинаковой способности лиц Rh + и Rh − вырабатывать антитела, помимо теоретического интереса, могут быть использованы в прикладных целях: при заготовке сывороток HLA, отборе респондеров для искусственной иммунизации с целью получения диагностических и лечебных сывороток.

Антителогенез у больных СПИДом

Считается, что люди, инфицированные вирусом иммунодефицита человека (синдром приобретенного иммунодефицита), не способны вырабатывать антитела к антигенам эритроцитов. Вирус угнетает функцию Т-лимфоцитов­ CD4 + и таким образом разрывает цепь кооперированного клеточного взаимодействия, присущего нормальному иммунному ответу. При таких условиях продукция иммунных антител затруднена. Иллюстрацией этого положения могут служить наблюдения Boctor и соавт. [176]. Авторы исследовали сыворотку крови 8 резус-отрицательных больных СПИДом, получавших множественные переливания резус-положительных­ эритроцитов в связи с развившейся у них анемией. Скрининг антител проводили спустя 8–65 недель после трансфузий. Ни у одного из больных не выработалось анти-D-антител, несмотря на то, что им было перелито от 2 до 11 доз эритроцитов каждому. В то же время 6 больных D −, лечившихся по поводу других заболеваний, получилиот1до9трансфузийэритроцитовD +.Увсехбольныхвтечение7–19не- дельпослетрансфузийвыработалисьанти-D-антитела.

266

Онтогенез и филогенез антигенов Rh

Rh-антигены формируются у человека в раннем периоде внутриутробного развития: как только в тканях эмбриона появляются эритроидные клетки.

Первые работы об обнаружении антигенов резус в тканях абортированных эмбрионов относятся к началу 1940-х годов. Bornstein и Israel в 1942 г., Stratton

в 1943 г., Chown в 1955 г. нашли антигены резус у 6–9-недельных эмбрионов, а Bergstrom и соавт. [165] – у 38-дневного эмбриона.

П.Н.КосяковиЛ.Н.Муравьева[71]выявили5антигеноврезус–C,c,D,Eиe– у всех 94 обследованных ими плодов 10–28-недельного возраста. Таким образом, к моментурождениявсеRh-детерминанты­ полностьюсформированы.

Раннее формирование антигенов резус у плода имеет медицинское значение. Искусственное прерывание беременности в срок 10–12 недель может привести к аллоиммунизации женщины и невозможности для нее в дальнейшем родить здоровых детей. Пагубное влияние на закладку тканей эмбриона могут оказывать резус-антитела матери, стимулированные предыдущими родами. В этом случае гемолитическая болезнь плода выражена в особо тяжелой форме, несовместимой с жизнью (водянка головного мозга, уродства).

Ballas и соавт. [152], Sieff и соавт. [6111] установили, что экспрессия вещества Rh увеличивается по мере дифференцировки эритроидных предшественников в зрелые эритроциты.

Mazumdar [468] отметил, что эритроидные клетки способны агглютинироваться сыворотками антирезус на стадии нормобластов.

Green и Daniels [312] применили экспериментальную модель, воспроизводящую in vitro стадии эритропоэза. Авторы выделили клетки CD34 из пуповинной крови, используя для этого ферромагнетики, конъюгированные с антителами, и магнитные колонки. Далее взвесь культивировали в сывороточной среде с эритропоэтином. Культуральные клетки исследовали методом проточной цитометрии с моно- и поликлональными антителами анти-D, анти-C, анти-c и анти-e. Поверхностные группоспецифические мембранные протеины и гликопротеины появились в такой последовательности: на 4-й день культивирования – CD47 и RhAG (Rh-ассоциированный­ гликопротеин), на 7-й день – гликофорин А, на 10–12-й день – Rh-полипептиды. Эпитопы epD6 / 7 выявляли несколько раньше, чем эпитопы epD1–epD9 и антигены C, с и е.

Rh-антигены в процессе эмбриогенеза формируются в определенной последовательности. В начале нормобластной фазы эритропоэза появляются Rhгликопротеины, затем Rh-полипептиды, не несущие еще Rh-специфичности­ . Через некоторое время, к концу нормобластной фазы, на полипептидах начинают появляться эпитопы антигенов D и C.

Серологически активный субстрат Rh, в противоположность групповым субстанциям полисахаридной природы не растворяется в воде. Он присутствует исключительно в мембране эритроцитов и их предшественников [281].

Антигены Rh обнаружены в клетках раковых опухолей и в метастазах у

267

резус-положительных больных (П.Н. Косяков [69]). Раковые клетки резусотрицательных больных не содержали антигенов Rh.

В других органах и тканях, а также жидкостях организма Rh-антигены отсутствуют. Специально проведенные исследования не выявили Rh-анти­генов в слюне, амниотической и семенной жидкости, лейкоцитах, тромбоцитах. Rhантигены отсутствовали также в культивируемых клетках амниона [293] и спер-

матозоидах [426, 269, 540].

Rh-антигены находят только у человека и некоторых видов обезьян, в основном человекообразных [120, 486, 487, 710]. Однако, как показали Moore и соавт. [Abstracts 14 th Congr. ISBT, 1975, P. 58], эритроциты шимпанзе, бабуинов и зеле-

ных мартышек не адсорбируют антитела анти-Hr / Hro, т. е. не содержат характерного для людей Hro-антигена.

ИнтересныенаходкиописалиBlancherисоавт.[170].Авторыиспользовалинабор моноклональных анти-D-антител (70 серий IgG и 27 серий IgM) для сравнительного исследования эритроцитов человекообразных обезьян – шимпанзе, го- рилл,орангутанов,гиббонов–инечеловекообразныхобезьян–макакибабуинов. Положительные реакции с эритроцитами обезьян сыворотки IgM давали реже, чем сыворотки IgG. Эритроциты африканских обезьян реагировали в основном с сыворотками IgG. Большинство анти-D-антител IgG (61 из 70) реагировали с эритроцитами горилл, подтверждая таким образом, что антиген, присутствующий в эритроцитах горилл, подобен D-антигену человека. Большинство анти-D- антител, не реагирующих с эритроцитами шимпанзе, не взаимодействовали также с эритроцитами людей, которые содержали парциальный антиген D IVb. В то же время сыворотки, агглютинирующие эритроциты D IVb человека, давали положительные реакции почти со всеми образцами эритроцитов шимпанзе. Результаты, наблюдаемые с сыворотками антирезус других (не анти-D) специфичностей, подтвердили, что шимпанзе, гориллы и гиббоны экспрессируют с-подобный (c-like) антиген. Антигены C, E и e у всех видов исследованных приматов отсутствовали.

Shaw [608] исследовал эритроциты приматов тремя моноклональными сыворотками анти-LW ab и несколькими сериями сывороток с различной специфичностью антирезус. Первая из анти-LW ab-сывороток реагировала с эритроцитами горилл и макак-резус, но не реагировала с эритроцитами орангутанов, бабуинов и мартышек. В противоположность этому 2 другие сыворотки реагировали с эритроцитами всех указанных обезьян. Эритроциты шимпанзе реагировали только с третьей из использованных сывороток анти-LW ab.

Неодинаковое реагирование эритроцитов обезьян свидетельствовало о том, что использованные анти-LW ab-антитела распознают разные эпитопы антигена LW на эритроцитах обследованных животных. У некоторых обезьян LW-антиген экспрессирован в виде парциальных вариантов, не встречающихся у людей.

Моноклональные сыворотки анти-D реагировали по-разному: одни агглютинировали эритроциты человека, горилл и шимпанзе, другие – эритроциты всех исследованных групп приматов, включая человека.

268

Далее Blancher и соавт. [171] исследовали 53 моноклональные анти-D- сыворотки с панелью эритроцитов шимпанзе. Панель включала образцы, содержащие различные комбинации антигенов R, C, E и F, которые считаются гомологами антигенов системы Rh-Hr человека. Результаты реакций с эритроцитами шимпанзе и человека иногда совпадали, однако не позволяли идентифицировать шимпанзе как резус-положительных и резус-отрицательных­ подобно человеку. Установлено, что эритроциты обоих сравниваемых видов (человека и шимпанзе) содержат эпитопы epD5, epD6 / 7 и epD8 и в то же время эритроциты шимпанзе не содержат эпитопов epD1, epD2, epD3 и epD4, как это имеет место в эритроцитах человека, содержащих парциальные антигены D IVb и D Vc.

Поликлональные сыворотки анти-D не реагировали с эритроцитами макак-резус [620].

Socha и соавт. [619], используя 49 анти-D-моноклональных реагентов IgG и IgM, отметили, что антитела IgM сильнее и чаще реагировали с эритроцитами нечеловекообразных обезьян как Старого, так и Нового Света. Эритроциты человекообразных обезьян Нового Света, наоборот, реагировали лучше с IgG, но хуже с IgM. Некоторые эпитопы, выявляемые этими антителами на эритроцитах макак, напоминали D-антиген человека.

Как показали Roubinet и соавт. [579], число участков антигена D на эритроцитах человека и шимпанзе приблизительно одинаково. У горилл оно отличается большой вариабельностью – от 48 до 230 тыс. на 1 эритроцит. Авидность анти-D-антител по отношению к эритроцитам шимпанзе и горилл несколько ниже, чем по отношению к эритроцитам человека. Интересно отметить, что обработка эритроцитов шимпанзе папаином усиливает реакцию с IgG анти-D- антителами, а обработка этим ферментом эритроцитов горилл угнетает реакцию вследствие разрушения D-подобных эпитопов, которые имеют эти обезьяны.

При хромосомном картировании RH-подобного локуса шимпанзе, проведенном Calvas и соавт. [191], установлено, что этот локус располагается на хромосоме 1 в области1р36.1–р34.2,т.е.практическивтойжеобластигенома,чтоиучеловека.

Наряду с антигенным сходством эритроцитов человека и обезьян было выявлено их существенное различие. Blancher и соавт. [169] использовали 18 серий моноклональных антител к эритроцитам человека, продуцируемых гетерогибридомами макака × мышь. Все серии антител давали одинаковые положительные реакции с эритроцитами человека любого фенотипа, за исключением эритроцитов Rhnull. Одни сыворотки содержали антитела, реагирующие с антигенами Kell и Rh, другие – антитела к антигенам CD55, CD44, CD59 или к гликофоринсвязанным антигенам системы Diego (Wr b), системы

Gerbich (Ge4) и других.

Westhoff и соавт. [703] сравнили геномную организацию Rh-локуса человека и гомологичную Rh-структуру мышей Mus musculus. Для сравнения использовали мРНК из библиотеки кДНК спленоцитов мыши. Оказалось, что мыши несут только один ген RH. Полипептид, кодируемый этим геном, отличается от

269

Rh-полипептида человека на одну аминокислотную последовательность. Rhполипептид мыши состоит из 418 аминокислот, Rh-полипептид человека – из 417. Нуклеотидная последовательность генов и последовательность аминокислот в Rh-полипептиде мыши и человека на 85 % были идентичны. Rh-белок, экспрессируемый на поверхности эритроцитов мышей, имеет мол. массу 32 кДа, сопоставимую с Rh-полипептидом человека (30–32 кДа). Предполагают, что рассматриваемые виды млекопитающих отделились от общего предка в процессе эволюции около 80 миллионов лет назад.

Несмотря на большое структурное сходство Rh-белка мыши и человека эритроциты мыши не реагируют с анти-D-антителами человека в серологических реакциях. Авторы объясняют это тем, что одинаковые Rh-полипептидные­ последовательности, экспрессированные на эритроцитах человека и мыши, размещаются на разных экстрацеллюлярных петлях полипептида. Размещение D-подобных эпитопов мыши не соответствует конфигурации рецепторов анти- D-антител человека.

Геногеография антигенов Rh

Во время Первой мировой войны два немецких врача, супруги Гиршфельд, анализируя переливания крови бесчисленному количеству раненых, обратили внимание на неодинаковое распределение групп крови у представителей­ разных национальностей.

Действительно, частота групп крови неодинакова у различных народов. Общая закономерность выражается в том, что по мере продвижения с Запада на Восток уменьшается частота группы А(II); с Востока на Запад уменьшается частота группы В(III); с Севера на Юг увеличивается частота группы O(I). Среди европеоидов до 19 % резус-отрицательных. Монголоиды почти все резусположительные. Частота Rh-фактора (антигена D) у китайцев – 99,4 %; у япон-

цев – 99,6 %; у корейцев ≈ 100 %.

В фашистской Германии работы Гиршфельда, основоположника геногеографии, послужили научным обоснованием теории высшей арийской расы. Поскольку резус-фактор впервые обнаружен у обезьян, народы Азии, среди которых концентрация резус-антигена особенно высока, причислили к низшей расе, не достойной занимать высшие этажи социума. Концепция высшей (арийской) расы со временем трансформировалась в идею создания этнического оружия, с помощью которого можно было бы избирательно разрушать генетический аппарат представителей отдельных рас и этнических групп. В известном смысле это оружие было создано самой природой. Неодинаковое распределение групп крови на Земле объясняют антигенной мимикрией возбудителей чумы и оспы. Бациллы чумы содержат антиген О, вирусы оспы – антиген А. Эпидемии чумы, имевшие место в средние века, выбивали из популяции преимущественно людей группы O(I), оспы – людей группы А(II). В Центральной Азии, Индии, Китае, Северной Африке, где чума и оспа

270