Антиген FPTT сопровождает также некоторые фенотипы с подавленной экс-
прессией антигенов Rh: Ro Har (Rh33), D IVa(C) −, D(C)(e) (табл. 4.17).
Эритроциты DFR (и FPTT) несут половину (15 из 30) эпитопов антигена D (см. табл. 4.16).
RN (Rh32)
Редко встречающийся антиген Rh32 считается продуктом гаплотипа R N у негров и гаплотипа (C)D(e) у белых. Оба гаплотипа кодируют ослабленную форму антигена С и е [130, 224]. Установлено, что этот антиген присутствует на эритроцитах, содержащих парциальный D-антиген, известный как DBT.
Антиген Rh32 фенотипически выражен только при отсутствии гена D в обеих позициях, цис и транс. Однако эритроциты Rh32 + вряд ли можно отнести к резус-отрицательным, поскольку они содержат включения антигена D.
Эритроциты R N (Rh32 + ) характеризуются слабой выраженностью антигенов С и е, а также отсутствием в них антигена с (hr') и широко распространенного антигена Sec (Rh46).
Молекулярно-генетическое обследование 3 доноров R N (Rh32 + ), проведенное Rouillac и соавт. [582], показало, что этот антиген является продуктом гибридного гена RHCe-D-Ce, в котором экзон 4 (в одном случае часть экзона 3) гена RHCe заменен эквивалентной частью гена RHD.
Гибридный полипептид, кодируемый геном R N, отличается от протеина, кодируемого нормальным геном RHCe, наличием седьмого или восьмого аминокислотного остатка, специфичного для RHD-протеина.
Как полагает Schenkel-Brunner [597], 3 аминокислоты (Met 169, Met 170 и Ile 172), расположенные в 3-й экстрацеллюлярной петле гибридного полипептида, обусловливают присутствие антигена Rh32 и соответственно отсутствие анти-
гена Sec (Rh46).
Ген Dennis
Приводим описание варианта гена RN – гена Dennis. Chown и соавт. [224] наблюдали семью с необычным распределением генов RH. Мать CDe / CDe, отец CDe / cDE имели 7 детей, 4 из которых были CDe / CDe, 2 – CDe / cDE и 1, по имени Dennis, – cDuE / Сueu.
Эритроциты Dennis’а имели нормально реагирующие антигены cD uE, но давали слабую или отрицательную реакцию с сыворотками анти-С и анти-е. Их фенотип мог быть обозначен как сD uЕ − или с(С)D uЕ(е). Вместе с тем они реагировали с сывороткой Bill, которая содержала антитела, способные связываться с эритроцитами D u. Эритроциты родителей Dennis’а и его 6 братьев и сестер не реагировали с сывороткой Bill. Обследование 4 сестер матери Dennis’а и 212 лиц, так или иначе связанныхродствомснаблюдаемойсемьей,показало,чтовсеонидаютотрицательнуюреакциюссывороткойWiel,т.е.несодержатантигенаR N (Rh32).
Оказалось, что Dennis содержит простую дозу антигенов с и Е, а его мать и 4 братьев и сестер – двойную дозу антигенов С и е. На основании этого авторы
206
предположили, что мать Dennis’а имеет гаплотипы CDue / CDe и не несет антигенов C u и e u, которые, будучи ассоциированными с CD ue, реагируют с сыворотками Wiel, Troll и Reynolds. У представителей другой семьи наблюдали эритроциты CD ue / C ue u, реагирующие с указанными тремя сыворотками.
Появилось сомнение: не является ли Dennis чужим ребенком. Однако тщательное изучение обстоятельств рождения Dennis’а, исследование документов роддома, где он родился, опрос персонала, серологическое обследование двух детей, родившихся в тот же день, и их родителей, позволило установить, что Dennis является ребенком упомянутой выше супружеской пары.
Эритроциты Dennis’а давали слабые или негативные реакции с сыворотками анти-С и анти-е, но в то же время реагировали с сывороткой Wiel, обнаруживающей присутствие антигена, ассоциированного с D u, а также с двумя сыворотками (Troll и Reynolds), которые не реагировали с эритроцитами D u. Следовательно, эритроциты Dennis’а содержали антиген, который не мог являться антигеномWiel. Из этого также следовало, что фенотип Dennis’а не является продуктом генного комплекса cDuE, а является продуктом другого гена, который авторы назвали геном Dennis.
Указанные 3 сыворотки позволили выделить три группы людей:
1.Wiel + Troll (Reynolds) +. Этот фенотип очень редко встречается среди европеоидов и в 1 % у негроидов. Он обнаружен у женщин по имени Charlie By и Co-Gar, а также у мужчины-негра по имени Harper (см. ниже).
2.Wiel + Troll (Reynolds) −. Этот фенотип редок у европеоидов. Он встречается у 4 % резус-положительных негроидов.
3.Wiel −Troll (Reynolds) −. Частота этого фенотипа более 99 % у европеоидов
и98 % среди негроидов.
Характеристика тестовых сывороток
Сыворотка Wiel (см. DW) выделена в 1963 г. Chown и соавт. [227] из сыворотки женщины, миссис Bill cD uE / cde, сенсибилизированной четырьмя трансфузиями и беременностью плодом C uD ue / cde. Исходная сыворотка содержала антитела анти-С, анти-Се, анти-С u, анти-V и анти-D W (Wiel). Очищенные анти-Wiel-антитела были получены адсорбцией сопутствующих антител, а также элюцией анти-Wiel-антител с эритроцитов, принадлежащих донору Wiel с фенотипом c uDe / cde. В тех случаях, когда говорят о сыворотке Bill, подразумевают цельную сыворотку, а когда о сыворотке анти-Wiel или анти-D W –адсорбированную сыворотку или элюат, полученный из сыворотки Bill.
Сыворотка анти-Wiel реагирует с антигеном D W лиц cDWe / cde, CDWe / cde и, по данным Tippett [657], – с антигеном V (ce S) лиц D-анти-D категории D V. С эритроцитами людей CDWe / CDe сыворотка анти-Wiel не реагировала, поскольку ген D в позиции trans формировал у этих лиц нормальный D-антиген. Теперь очевидно, что фактор Dennis является продуктом гена RN.
207
Сыворотка Troll найдена в 1958 г. у белой женщины с генотипом Cde / cde. Причина сенсибилизации не установлена. Женщина имела 2 детей; трансфузий или инъекций крови ей не проводили. Сыворотка содержала антитела анти-C x, анти-Wr a, анти-Tr a, анти-By и антитела, обозначенные авторами как TrollReynolds. Чистые антитела анти-Troll были получены адсорбцией и элюцией. Они имели такую же специфичность, как и сыворотка Reynolds.
Сыворотка Reynolds найдена Harris в 1961 г. у женщины по имени Elva Reynolds с генотипом CDe / cDE, сенсибилизированной трансфузиями крови (беременностей не было). Ее сыворотка содержала, помимо указанных атипичных антител, антитела анти-Jk b.
Наследование гена RN
Ген RN, названый так Rosenfield и соавт. [575], был обнаружен у женщины по имени Charlie By и у 3 из 6 ее детей, а также у ее брата и у 3 из 4 его детей. Другими словами, носителями этого гена были сестра и брат семьи By, которые передали его детям. By были неграми, откуда и появился символ N в обозначении этого гена. Далее он был описан в виде генного комплекса, который можно было интерпретировать как (С)D u(e) с сомнительной продукцией антиге-
нов C (rh') и е (hr").
Rosenfield и соавт. не использовали сыворотки Wiel, Troll и Reynolds. Однако позднее Tippett исследовала мать семьи By и одного из ее детей R N + и нашла, что оба они Troll (Reynolds)-положительны. Признак Troll + в этой семье был менее устойчив, чем ген RN, однако сочетание этих редких признаков [слабый С, слабый е и Troll (Reynolds) −] не были взаимосвязаны.
Fred c соавт., а затем Rosenfield и соавт. исследовали семью Co-Gar: мать была Е −е +,ребенок–Е +е −.Позднеебылустановленфенотипмужаибабушкиполинии матери. Все они, за исключением мужа, былиWiel +Troll (Reynolds) +. Фенотип ребенкаоказалсятакимже,какуDennis’аиBy,ивсе3человекабылиTroll +.
Интересны их генотипы: муж CD ue / cD uE, мать C ue u / cDe, ребенок C ue u / cDuE, бабушка C ue u / CDue. Характерно, что у ребенка антигены С и е слабые, у матери слабый С и, возможно, слабый е, который маскируется нормальным е, унаследованным от отца, имевшего, по-видимому, хромосому cde или сDe. У бабушки слабые антигены С и е маскировались нормальными антигенами Cde.
При серологическом обследовании произвольно взятых лиц некоторые из них оказались Wiel / Troll / Reynolds-положительными:
Мистер Harper – донор-негр. Он был обследован, помимо упомянутых выше Chown и соавт. [224], другими исследователями, в том числе Race и Sanger. Его эритроциты имели антиген D, слабый C, E, c, слабый e, Rh32. Антигена f они не содержали.
Миссис Tillery. Доктор Molthan исследовала нескольких доноров, родители которых относились к типу R N. Tillery была одним из них. Ее кровь содержала антиген D, Е, с, слабые C и е.
208
Миссис Novella Council – негритянка. При тщательном изучении ее эритроцитов было установлено, что она не Cde / Cde, как считали ранее, а CuDue / Cde и относится к типу R N, подобно бабушке из семьи Co-Gar.
Редкий тип крови R N обнаруживают в основном у негров, среди белых он встречается редко. Его не удалось выявить при обследовании 906 лиц белой расы и 1217 их детей.
Закономерен вопрос: не являлся ли ген Dennis геном RN? Проведено сравнительное изучение крови Dennis’а и образцов крови с фенотипами Wiel + Troll (Reynolds) +, Wiel + Troll (Reynolds) − и Wiel −Troll (Reynolds) −. Образцы крови Dennis’а, матери из семьи Co-Gar и донора Tillery оказались Wiel + Troll + Reynolds +, из чего можно заключить, что ген Dennis идентичен гену RN. Исследование крови другими сыворотками позволило сделать аналогичный вывод. В частности, эритроциты Dennis’а при исследовании их 6 сыворотками анти-С, 3 анти-Се и 1 анти-СЕ показали такие же результаты, как эритроциты матери из семьи Co-Gar, т. е. со всеми сыворотками анти-С не реагировали, с анти-Се реагировали, с анти-СЕ давали слабоположительную реакцию.
Адсорбция – элюция, выполненная в нескольких лабораториях, не опровергла вывод о том, что гены Dennis и RN идентичны.
По мнению авторов, ген Dennis возник в результате мутации гена CD ue, который приобрел способность инициировать наряду с антигенами CD ue новый антиген – Troll.
Высказанная гипотеза могла быть подтверждена при обследовании потомков от брака Dennis’а и его супруги, которые могли нести ген RN и содержать анти-
гены Troll и Wiel.
Как отметили авторы, Dennis и его жена, имеющая генотип CD ue / CDue, – выходцы из многодетных семей. Однако, несмотря на большое стремление супругов иметь детей, их брак на протяжении многих лет оставался бесплодным. Проведенные специальные исследования не позволили выяснить причину бесплодия.
RoHar (Rh33)
Антиген Ro Har (D RoHar) получил свое название по имени донора Har, эритроциты которого были использованы Giles и соавт. [306] для приготовления первой тестовой сыворотки анти-Rh33. Донор Har был резус-отрицательным , однако его эритроциты реагировали с некоторыми сыворотками анти-D и анти-DC. Элюат с эритроцитов Har после адсорбции одной из сывороток анти-D содержал анти-Ro Har- антитела,реагирующиесэритроцитами2из1060доноров(включаясамогоHar).
Эритроциты D RoHar имеют трудно выявляемую форму D-антигена, а также сниженное количество антигенов е, f, и Hro, не содержат часто встречающихся антигенов hr S, G и Hr, то есть содержат набор серологически выявляемых фенотипических признаков, отличающих гаплотип RoHar. В связи с этим антиген Rh33 считается маркером гаплотипа RoHar, а сыворотки анти-Rh33 используют
209
соответственно для идентификации лиц-носителей гаплотипа RoHar в гомо- и гетерозиготной форме. Однако следует заметить, что не все 100 % лиц Ro Har являются Rh33 +, бывают и исключения.
Антиген Rh33 встречается на эритроцитах с редкими фенотипами: D + G −, e +hr S − и Hrо + Hr −.
Эритроциты Ro Har при использовании обычных серологических методов типируются как D −.
В литературе приведено 2 наблюдения анти-Rh33-антител. В одном случае эти антитела присутствовали в сыворотке в комбинации с анти-D-антителами [306], в другом – с антителами анти-D, анти-с, анти-V, анти-K и аутоантителами, мимикрирующими под аллоантитела анти-D [Issitt и соавт., Transfusion, 1986, V. 26, P. 506]. В обоих случаях анти-Rh33-антитела удавалось выделить в виде моноспецифической фракции с помощью дифференциальной адсорбции.
По данным Beckers и соавт. [161], гаплотип RoHar, обусловливающий выработку антигена D RoHar, инициирует продукцию частичного D-антигена категории D IV. При гаплотипе D IV(C) − антиген D RoHar также может вырабатываться. Эпитопный состав антигена D RoHar (Rh33) представлен в табл. 4.14 и 4.16 в строке D RoHar. Известен случай ГБН, вызванный антителами анти-Rh33. Лица с фенотипом Ro Har легко вырабатывают анти-D-антитела [161].
Исследуя эритроциты D RoHar c помощью панели моноклональных анти-D- антител, Wallace и соавт. [697] пришли к выводу, что этот антиген кодируется гаплотипом (D)c(e) Rh33 и является парциальным. Авторы нашли, что при указанном гаплотипе не экспрессированы эпитопы epD1–epD4, epD8 и epD9, в то время как способность экспрессировать эпитопы epD5 и epD6 / 7 сохранена.
Антиген D у лиц D RoHar отличается от других парциальных D-антигенов. В противоположность слабым D-антигенам, которые выявляются неполными IgGантителами, а с полными IgM-антителами не реагируют, D-антиген на эритроцитах D RoHar хорошо реагирует с полными антителами и не реагирует с большинством реагентов, содержащих неполные антитела. Wallace и соавт. [697] подтвердили эти данные, показав в своих исследованиях, что моноклональные антитела IgM лучше выявляют антиген D RoHar, чем IgG.
Как установлено молекулярно-биологическими исследованиями Beckers и соавт. [160, 161], продукция антигена D RoHar обеспечивается геном RHce, в котором экзон 5 замещен эквивалентным экзоном RHD-гена.
Riv (Rh45)
Антиген Riv обнаружен в 1983 г. Delehanty и соавт. [257] у людей с фенотипом D IV(C) −, с другими фенотипами антиген Riv не был найден.
Присутствие антигенов Go a, Evans, D W, BARC, Tar, Rh32, Rh33, Riv и
др. (табл. 4.17) может быть использовано как признак того, что данные эритроциты принадлежат к категории частичного D. Например, у человека с генотипом CD IVe / cde парциальный D IV-антиген выявляют с помощью
210