Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

эритроцитах D V-like отсутствуют эпитопы epD4, epD12, epD17, epD18 и epD22,

которые обычно присутствуют на эритроцитах D Va. Указанное отличие антигена D V-like от антигена D Va было ассоциировано только с одной нуклеотидной заменой А 226 Р, которая, видимо, и привела к выпадению некоторых эпитопов. Ранее Wagner и соавт. [691] описали разновидности парциальных антигенов D IVb-like, DNU-like и DFR-like, различающиеся точками мутаций в RHD-гене и отсутствием некоторых эпитопов (табл. 4.15). По данным Zhou и соавт. [729], полиморфизм антигена D Va обусловлен гибридным геном RHD / CE, в котором экзон 5 и интрон 5 гена D замещен гомологичными последовательностями генаСЕ.

Flegel и соавт. [288, 289] обнаружили III тип парциального антигена D VI. В категории D VI III типа экзоны 3, 4, 5 и 6 гена D замещены эквивалентными частями гена Ce. Авторы нашли, что число антигенных участков на 1 клетку для разных типов антигена составляет: для D VI I типа – 500, для D VI II типа – 2400 и для D VI III типа – 12 000. Таким образом, эритроциты, несущие антиген D VI III типа, содержат нормальное для эритроцитов D + количество антигенных участков.

Два типа эритроцитов D VI (I и III) содержат антиген BARC (Rh52), эритроциты D VI II типа не содержат этого антигена.

Jones и соавт. [385] описали новый парциальный антиген – DHR. Фенотип DHR обусловлен одной мутацией – G 686 → A – в экзоне 5 гена D, которая приводит к замене Arg 229 → Lis в 4-й экзофациальной петле полипептида D. Аминокислотная замена приводит к утрате epD1, epD2, epD12 и epD20.

Генная конверсия считается более частым механизмом появления парциально- гоD-фенотипа.Однакоестьнесколькопримеровпростыхзамен,обусловливающих парциальные антигены D различных категорий: D VII – Leu 110 → Pro [589, 694], D II–Ala354→Asp[144],DNU–Gly353→Arg[144],DHMi–Thr285→Ile[384].

В 2004 г. Körmöczi и соавт. [395] описали парциальный D-антиген, названный ими DWI. Он был обнаружен у 74-летней жительницы Восточной Австрии, имевшей группу крови O(I) Rh +. Сыворотка женщины содержала анти-D-антитела, что послужило основанием заподозрить у нее парциальный вариант D. В анамнезе имелись 2 беременности от мужа D + и несколько гемотрансфузий в связи с гинекологической операцией. Женщина и 2 ее родственницы (сестра и племянница) имели генотип DWICe / cde. На эритроцитах

201

DWI + отсутствовали редкие антигены С X, V, VS, D W, Go a, Evans, Tar, Riv, FPTT, BARC, JAL, которые ассоциированы с парциальными антигенами D, Cc или Ee. Антигенная емкость эритроцитов DWI + составила 8000–8600 антигенных участков на 1 эритроцит. При семейном исследовании установлено, что антиген DWI передается с гаплотипом DWICe, но не с DWIсe. При эпитопном картировании зафиксирована незначительная модификация антигена D, проявляющаяся в виде ослабленной экспрессии эпитопов D1.1, D9.1 и D16.1. При ДНК-типировании авторы нашли в экзоне 7 гена RHD простую нуклеотидную замену Т 1073 → С, приводившую к замещению Met 358 → Thr в 6-й экстрацеллюлярной петле D-полипептида.

Эритроциты DWI + не агглютинировались одной из 79 моноклональных анти-D-сывороток, хорошо реагировавших с другими фенотипами D +. Авторы применили эту сыворотку для отсева лиц D +, с тем чтобы среди оставшихся нереагирующих или слабореагирующих образцов найти DWI +. Однако среди 2288 резус-положительных австрийцев антиген DWI выявлен не был, за исключением трех упомянутых выше женщин.

Вначале была предложена 9-эпитопная модель парциальных D-антигенов­ . Специально отобранные моноклональные антитела дифференцировали 8 эпитопов антигена D (epD1–epD9). Эпитопы D6 и D7 были объединены в epD6 / 7, так как серологические реакции эритроцитов, несущих эти эпитопы, оказались практически одинаковыми.

Faas и соавт. [276] предложили 15-эпитопную модель, в которой эпитопы epD1, epD2, epD5, epD6 / 7 и epD9 подразделяют на субэпитопы (D1.1, D1.2; D5.1, D5.2; D9.1, D9.2 и т. д.) – от 2 до 10 субэпитопов в каждом эпитопе. Кроме того, авторами установлено 6 новых эпитопов, получивших номера с 10 по 15.

Jones и соавт. [386] разработали модель, включающую 30 серологически различимых эпитопов D (табл. 4.16). Как видим, эпитопная конструкция антигена D, сложившаяся к настоящему времени, еще далека от своего завершения.

Таблица 4.16

Характер реагирования парциальных D-антигенов с 30 эпитопспецифическими сыворотками (30-эпитопная модель)*

202

Окончание табл. 4.16

* По Jones и соавт. [386, 387] и другим источникам.

Маркеры парциальных D-антигенов и другие ассоциированные с ними антигены

Часто отсутствие одного антигена сопровождается наличием другого. На этом принципе построен поиск новых специфичностей в иммуносерологии. Этот же принцип лежит в основе структуры клеточной мембраны: нет одного субстрата, значит, на его месте должен быть другой. Указанная закономерность не могла не проявиться и в парциальных антигенах D, в которых отсутствуют отдельные эпитопы. В связи с тем, что парциальные D-антигены встречаются редко, то и антигены, «замещающие» их отсутствие, также редки. Приводим их описание.

Goa (Rh30)

В 1964–1967 гг.Alter с соавторами [135, 136] описали антитела анти-Go a, послужившие причиной гемолитической болезни новорожденного у негритянки по фамилии Gonsales из Пуэрто-Рико. В настоящее время известно много случаев выявления анти-Go a-антител у негров.

По данным Alter и соавт. [135], антиген Go a встречается с частотой 1,86 % среди американских негров, но не был обнаружен при исследовании более чем 3000 англичан и канадцев. Частота Go a у негров, по данным Lovett и Crawford [448], составляет 2,8 %.

Lewis и соавт. [436], Lovett и Crawford [448] установили, что Go a является ча-

стью системы резус. К такому же заключению пришли Chown и соавт. [223], исследуя 2 большие негритянские семьи. Авторы подтвердили ассоциацию Go a с

203

системой резус и установили, что антиген Go a присутствует на эритроцитах, которые несут парциальный D-антиген категории D IV. При отсутствии этого антигена антитела анти-Go a практически не реагируют с эритроцитами D +.

В настоящее время известно, что антиген Go a находится на эритроцитах категории D IVа и наследуется в виде комплекса DIVaGo(a + ), а на эритроцитах категории D IVb он отсутствует. Антиген Go a встречается у людей, имеющих гаплотип D IVce, D IVCe, D IVcE илиD IV(C) −,и,по-видимому,невстречаетсяпригенотипеcde / cde.

Присутствие антигена Go a у лиц с фенотипом cDE сопровождается ослаблениемантигенаЕ,чтопроявляетсявменеевыраженной,чемобычно,агглютинациис анти-Е-сыворотками. Как отмечают Delehanty и соавт. [257], гаплотип DIV(C) − кодирует редко встречающиеся антигены Go a, Rh33, Riv (Rh45) и FPTT(Rh50).

Антиген D Cor, обнаруженный Rosenfield, Haber и Gibbel в 1956 г. у негров,

иантиген Go a, открытый десятью годами позже, представляют собой один

итот же антиген, однако, несмотря на приоритет в открытии этого антигена Rosenfield и соавт., в литературе укоренилось обозначение Go a.

Evans (Rh37)

Антиген Evans (Rh37) был обнаружен Wiener и соавт. в 1966–1968 гг. у членов одной семьи англичан, фенотип которых напоминал фенотип­ −D −, но не был ему идентичен. Пробанд, его сестра, отец и дед по отцу имели антиген Evans. Мать пробанда, бабушка по материнской линии и ее сестра этого антигена не имели. Анти-Evans-антитела не реагировали с эритроцитами гомо- и гетерозигот −D −.

Спустя десятилетие Contreras и соавт. [236] установили, что антиген Evans присутствует на эритроцитах категории D IVbGo(a −) и является маркером антигена D указанной категории. Антиген Evans присутствует также на эритроцитах *D*, хотя в других фенотипах Rh-делеций он отсутствует (см. Фенотипы делеций). Анти-Evans-антитела найдены как сопутствующие в сыворотках, которые содержали анти-Go a-антитела [244]. Моноспецифические антитела анти-Evans, без анти-Go a,не обнаружены.

DW (Rh23)

Антиген D W (Wiel) выявили Chown и соавт. [227] в 1962–1964 гг. с помощью сыворотки, содержащей комбинированные антитела анти-D W, анти-С, анти-C W и другие, которые удалось разделить адсорбцией. Антиген D W присутствовал у 9 из 235 обследованных негров. У 13 000 обследованных белых людей этот антиген отсутствовал.

Антиген D W присутствовал только на эритроцитах с парциальным антигеном категории D Va [227, 439]; на эритроцитах с другим фенотипом его нет (см. RN).

Reid и соавт. [558] нашли 2 сыворотки, которые реагировали с эритроцитами

D W + Rh32 − и D W −Rh32 +. Антитела анти-D W и анти-Rh32 (анти-R N) в этих сыво-

ротках не сепарировались и представляли собой комплекс, направленный к общему антигену, сопровождающему как фенотип D W, так и фенотип Rh32 (R N).

204

Ранее было известно, что некоторые сыворотки анти-D W содержат несепарируемый компонент, слабо реагирующий с антигеном R N (Rh32). Сыворотки, полученные Reid и соавт., давали одинаково сильные реакции с эритроцитами D W + и эритроцитами R N + и, по-видимому, выявляли комплексный антиген D W / R N.

Rouillac и соавт. [581, 582], Beckers и соавт. [158, 160], считают, что амино-

кислотные замены, приводящие к образованию парциальных антигенов D Va, R N, Ro Har, D DBT обусловлены сходными конверсиями гена D и СЕ в экзонах 4 и 5. Результатом указанных конверсий, очевидно, и является продукция антигенов D W, R N, а также D W / R N, идентифицируемых с помощью антител анти-D W / R N.

BARC (Rh52)

Антиген BARC, который обнаружили Green и соавт. [314], выявляют только на эритроцитах лиц, имеющих гаплотип CDVIe. На эритроцитах лиц, имеющих гаплотип CDVIE, антиген BARC отсутствует. Из 78 образцов эритроцитов лиц CDVIe / cde 76 были BARC +; в группе обследованных людей cDVIE / cde (21 человек) все оказались BARC −.

Mouro и соавт. [498] делят антигены категории D VI на 2 генетических типа. Гаплотип cDVIE, кодирующий только антиген D VI, является типом 1. Гаплотип CDVIe, который кодирует антигены D VI и BARС, представляет собой тип 2. Не исключено, что образцы эритроцитов лиц CDVIe / cde BARC − и лиц CDVIe / cde BARC + представляют собой еще одну разновидность фенотипов в рамках категории D VI,помимо 2 указанных выше типов. Образование генов CDVIe и CDVIE обусловлено конверсией.

Tar (Rh40)

Редко встречающийся антиген Tar обнаружили Lewis и соавт. [437] на некоторых эритроцитах D + и эритроцитах с частичным D. Кате­гория D-антигенов, реагирующих с сывороткой анти-Tar (Rh40), по предложению Lomas и соавт. [444], обозначена D VII. Антиген D на эритроцитахTar + дает более слабую, чем в норме, реакцию с поликлональными­ сыворотками анти-D. ЛицаTar + вырабатывают анти-D-антитела против недостающих у них D-эпитопов [444].

FPTT (Rh50)

В 1994 г. Lomas и соавт. [445], используя панель моноклональных эпитопспецифических сывороток анти-D, открыли новый парциальный D-антиген, названный DFR. Этот антиген присутствовал у 17 человек D +, двое из которых имели анти-D-антитела. В результате семейных исследований установлено, что антиген DFR чаще наследуется в комбинации с аллелем Се, чем сЕ. Авторы отметили, что на всех образцах эритроцитов DFR присутствует антиген FPTT (Rh50), не встречающийся на других эритроцитах. Оба антигена (DFR и FPTT) связаны друг с другом. Определив один антиген на эритроцитах, можно с большой долей вероятности полагать, что исследуемые эритроциты содержат и второй антиген.

205