Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

Парциальные D-антигены и антитела

C 1951 г. по 1963 г. опубликована серия исследований, показавших, что лица D +, так же как D −, могут вырабатывать анти-D-антитела [216, 386, 446, 614, 645, 658, 671], реагирующие со всеми образцами эритроцитов D +, за исключением собственных. Авторы подчеркивали, что антиген D мозаичен и представлен на эритроцитах многими эпитопами, которые могут выступать в качестве самостоятельных иммуногенов.

Обычно эпитопы присутствуют на эритроцитах людей D + в полном составе. Люди, имеющие неполный комплект эпитопов, способны вырабатывать антитела к отсутствующим у них компонентам. Фенотип таких людей назван частичным, или парциальным, D.

При адсорбции сывороток анти-D, полученных от людей D −, эритроцитами разных категорий частичного D не удавалось выделить фракции, способные распознавать отдельные эпитопы D-антигена. Элюаты, как правило, содержали антитела, идентичные тем, что находились в сыворотке изначально. Другими словами, антитела анти-D не сепарировались на отдельные эпитопные специфичности и представляли собой единую рецепторную структуру, направленную одновременно против множества D-эпитопов.

Антитела анти-D, присутствующие у лиц с парциальным D, имеют более узкий диапазон реагирования, чем анти-D-антитела лиц D −, поскольку в них отсутствуют рецепторы к отдельным эпитопам D. Иными словами, антитела, продуцируемые людьми с парциальным D, также являются парциальными.

По характеру перекрестного реагирования парциальные антитела разделили на группы.

Wiener, Unger и другие исследователи [216, 614, 645, 671, 716 ], установившие,

чтоRhо-антигенсостоитиз4компонентов(Rh A,Rh B,Rh C иRh D),предложиликлассификациюRhо alphabet.Еслиодинизкомпонентоввфенотипеприсутствовал,егообозначали индексом с заглавной буквой, если отсутствовал –строчной буквой. Таким образом, эритроциты фенотипа Rh ABcd содержали компоненты Rh A и Rh B, а компоненты Rh C и Rh D в них отсутствовали. Как обнаружили исследователи, антитела, полученные от человека с эритроцитами Rh A, реагировали с нормальными эритроцитамиRhо иэритроцитамиRh a,нонереагировалисэритроцитамиRh A.Антитела, продуцируемые человеком, имевшим эритроциты Rh В, реагировали с эритроцитамиRhо иэритроцитамиRh b,нонереагировалисэритроцитамиRh Bит.д.

В настоящее время алфавитную классификацию Rhо alphabet не используют и она упоминается лишь как имеющая научно-познавательное значение.

Классификация по категориям, существенно расширенная в настоящее вре-

мя, предложена Tippett и Sanger [657, 661].

Первая ее версия опубликована в 1962 и 1963 гг. Суммируя результаты исследования сначала 18, а затем 29 сывороток анти-D, полученных от лиц с парциальными D-антигенами, авторы выделили 6 категорий антигенов, отличающихся неодинаковым перекрестным реагированием (табл. 4.12).

196

КI категории D-антигенов был отнесен обычный D-антиген. Люди с антигеном категории D I анти-D-антител не вырабатывают.

Ко II категории отнесен антиген D, содержащийся у людей, которые продуцируют антитела против D-антигенов I, III, IV и V категории. К D-антигенам II

иVI категории такие люди антител не вырабатывают.

КIII категории отнесен антиген D, встречающийся у лиц, продуцирующих антитела против D-антигенов I, II и IV категории.

Антиген D IV категории отличается от антигена D лиц первых трех категорий. Люди, имеющие этот антиген, способны вырабатывать антитела к D-антигенам всех категорий, за исключением IV.

Отличительные признаки D-антигенов V и VI категории сводятся к тому, что люди, имеющие эти антигены, способны продуцировать антитела к антигенам D других категорий, но лишены этой способности в отношении собственного D-антигена.

Эритроциты, содержащие антигены D разных категорий, различаются по частоте реагирования со стандартными сыворотками анти-D, полученными от людей D −. Образцы эритроцитов, отнесенные к категории IV, агглютинировались 96 % сывороток анти-D, категорииV– 74 %. Эритроциты категорииVI реагировали только с 35 % сывороток анти-D.

Из данных, представленных в табл. 4.12, можно заключить, что не все эпитопы D одинаково иммуногенны. По-видимому, эпитопы, отсутствующие на эритроцитах D VI, как раз и являются более иммуногенными, поскольку их отсутствие обусловливает низкий процент реагирующих с этими эритроцитами сывороток. Напротив, высокая частота реагирования D II, D III, D IV свидетельствует о том, что они лишены менее иммуногенных эпитопов. Если судить по данным табл. 4.14, к более иммуногенным следует отнести все эпитопы от epD1 до epD9, а к менее иммуногенным – те, которые «прячутся» за знаком минус (отсутствие сильного эпитопа).

Таблица 4.12

Взаимодействие эритроцитов и сывороток людей с парциальными D-антигенами и парциальными анти-D-антителами*

Примечание. * По Tippett [657], здесь и далее: + агглютинация, – отсутствие агглютинации, ± агглютинация слабо выражена.

197

Вторую, обновленную версию своей классификации Tippett и Sanger опубликовали в 1977 г. [660]. Она включала 5 категорий парциальных D-антигенов (табл. 4.13). Категория I была исключена, так как выяснилось, что некоторые образцы крови, отнесенные к этой категории в первоначальной версии, содержали транзиторные анти-D-антитела. Категории III, IV и V подразделены на субкатегории: IIIa, IIIb, IIIc; IVa, IVb и т. д. Новая версия не внесла принципиальных изменений в первоначальную, но, как комментировали Issitt и Anstee [374]: «дала элегантный серологический прогноз тех особенностей, которые позднее были обнаружены с помощью моноклональных эпитопспецифических анти-D-антител, а также в результате исследования генов, кодирующих частичные D-антигены». Позднее субкатегория Vc была упразднена, так как с помощью моноклональных анти-D-антител было показано, что антигены D Vc и D IVb представляют одну группу. Кроме того, были детализированы другие позиции (см. табл. 4.13).

* По Tippett, Sanger [660] и другим источникам.

Лица, имеющие эритроциты категории D III (a, b и c), содержат 2 разных анти- D-антитела. Об этом свидетельствует тот факт, что эритроциты D II, D III и других категорий реагируют с этими сыворотками неодинаково. В частности, анти- D-антитела людей D IIIb агглютинируют эритроциты D II, D IIIa − VI. В то же время эритроциты D IIIa и D IIIc сыворотками лиц D IIIb практически не агглютинируются. Такая же двойная специфичность характерна для антител, продуцируемых лицами D VI. Так, лица D VIi и D VIii продуцируют 2 типа антител, один из которых реагирует с эритроцитами D IVb, D Va и D Vc, а другой с этими эритроцитами не реагирует. Анти-D-антитела, вырабатываемые лицами D IVa и D IVb практически однотипны, так же как и антитела, вырабатываемые лицами D Va, D Vb и D Vc.

Эритроциты D IIIb представлены двумя группами. К одной группе относят эритроциты, содержащие антиген G (G + ), к другой – не содержащие этого

198

антигена (G −). Некоторые образцы эритроцитов категории D IVa не содержат антигена Go a (Go a −), другие содержат (Go a + ).

Моноклональные антитела анти-D, будучи узконаправленными, более контроастно дифференцируют отдельные эпитопы D-антигена в отличие от поликлональных парциальных антител, часто комбинированных с другими антителами.

В табл. 4.14 приведена характеристика парциальных антигенов, состав­ ленная на основании данных, полученных разными авторами с помощью метода конкурентного связывания [384, 385, 445, 446, 659].

Новые обнаруженные фенотипы (DFR [445], DHR [385], DBT, DNU, DHMi, DHMii [384], DTI [513] и др.) пока не отнесены к какой-либо категории.

Обращает на себя внимание тот факт, что эритроциты категории D IIIa, D IIIb

иD IIIc несут на себе все 9 эпитопов D. В то же время известно, что лица с эритроцитами категории D III способны вырабатывать аллоиммунные анти- D-антитела [660, 661]. Это обстоятельство со всей очевидностью указывает на то, что в эритроцитах D III отсутствуют какие-то неизвестные эпитопы D, которые не внесены в таблицу 4.14. Антитела к этим эпитопам пока не найдены. Аналогично ведут себя эритроциты категории D II,D IV, D V иD VII, которые в одних случаях реагируют с сыворотками анти-D, а в других не реагируют в зависимости от совпадения специфичности парциальных антигенов

ипарциальных антител.

Таблица 4.14

Распределение эпитопов на эритроцитах разных категорий*

199

Окончание табл. 4.14

Примечание. * По Faas и соавт. [276], Schenkel-Brunner [597], Jones и соавт. [386, 387], + эпитоп присутствует, − эпитоп отсутствует, ± эпитоп слабо выражен, ( + ) положительная реакция с эритроцитами, обработанными папаином, +/ − положительная реакция с одними / отрицательная с другими МКА одинаковой эпитопной специфичности, нд – нет данных.

Castilho и соавт. [198], обследовав 130 больных серповидно-клеточной анемией, обнаружили у 12 из них парциальный антиген D IIIa. Авторы отмечают, что повышенная частота этого антигена при данной патологии увеличивает риск аллоиммунизации пациентов, основным методом лечения которых являются трансфузии эритроцитов. Кроме того, интересен сам факт повышенной частоты антигена D IIIa при указанном заболевании. Возможно, неправильная форма эритроцитов и отсутствие в их мембране отдельных структурных элементов (эпитопов антигена D) каким-то образом связаны.

Calligas и соавт. [190] обследовали 162 больных серповидно-клеточной анемией, получавших трансфузии эритроцитов. У 15 из них авторы обнаружили резус-антитела, у 13 – антитела анти-K.

Эритроциты категории D IVa не несут на себе эпитопов epD1, epD2, epD3 и epD9, однако реагируют сильнее с большинством стандартных анти-D- сывороток, чем эритроциты, имеющие эти эпитопы. Считается, что эпитопы D на эритроцитах категории D IVa более доступны для анти-D-антител и, возможно, присутствуют в большем количестве, чем на других эритроцитах D +.

У лиц, носителей антигена категории D VI I типа, экзоны 4 и 5 гена сЕ замещены аналогичными экзонами гена D. У лиц, носителей антигена категории D VI II типа, экзоны 4, 5 и 6 гена Се замещены аналогичными экзонами гена D.

Wagner и соавт. [690] нашли новый парциальный D-антиген – DBS, или D V-like, являющийся разновидностью антигена D Va. Этот антиген кодируется гибридным геном RHD-RHcE(5)-RHD с делецией интрона 4 и части экзона 5. На

200