Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

чем они были первоначально обозначены как анти-Er ab (далее анти-Er3), а антиген, открываемый ими, – Er3. Родители указанного выше носителя редкого фенотипа и антител являлись кровными родственниками. Других лиц, имеющих нулевой фенотип Er: −1, −2, −3, среди европеоидов не найдено.

Необычный фенотип Er(а −) в японской семье описали Naoki и соавт. [8]. Эритроциты трех сестер Er(а −) агглютинировались тремя из восьми сывороток анти-Er а, найденных в Европе. Одна из сестер имела анти-Er a-антитела, что указывает на существование либо двух вариантов антигена Er а, либо еще одного, четвертого, антигена этой коллекции, отличающегося от Er а. Известны и другие образцы сывороток анти-Er a, которые реагировали с эритроцитами Er(а −). Результаты перекрестных реакций при сравнении этих сывороток в разных лабораториях не всегда совпадали, однако во всех случаях свидетельствовали о гетерогенности вещества Er и анти-Er-антител.

Лиц, имеющих фенотип Er(а −), крайне мало. Daniels и соавт. [2], Gale и соавт. [4] и Thompson и соавт. [11] не нашли ни одного Er(а −) из 63 762 обследованных европейцев. Naoki и соавт. [8] обследовали 13 521 японца и также не нашли ни одного Er(а −), за исключением упомянутой выше уникальной находки. Среди 605 обследованных доноров 4 имели фенотип Er(b + ).

По расчетным данным, генная частота аллеля Er a составляет 0,9967, аллеля Er b – 0,0033. Частота фенотипа Er(a −) у европеоидов соответствует 1 на 100 тыс.

Популяционные, в том числе посемейные, исследования показали, что антигены Er не связаны с группами крови ABO, MN, P, Duffy, Kidd и Dombrock (Daniels и соавт. [2], Hamilton и соавт. [5], Naoki и соавт. [8]).

Антиген Er a полностью развит к моменту рождения, устойчив к действию трипсина, химотрипсина, папаина, фицина, проназы и сульфгидрильных реагентов (Daniels и соавт. [2, 3], Liew, Uchikawa [6]). Экспозиция эритроцитов в ЭДТА с глициновым буфером приводила к утрате эритроцитами антигена Er a. Полное исчезновение Er a наблюдалось при рН 2,0; при рН 2,5 утрата носила ча-

стичный характер (Liew, Uchikawa [6]).

Антиген Er b также оказался устойчивым к действию протеаз и сульфгидрильных реагентов (Hamilton и соавт. [5]).

Анти-Er-антитела

В анамнезе всех без исключения носителей анти-Er a-антител были гемотрансфузии или беременности (Daniels и соавт. [2], Lylloff и соавт. [7], Naoki и соавт. [8], Rowe [10], Thompson и соавт. [11]). Антитела относились к классу IgG, способностью связывать комплемент не обладали (Daniels и соавт. [2], Naoki и соавт. [8], Thompson и соавт. [11]). У 2 реципиентов, имевших анти- Er a-антитела, после переливания им эритроцитов Er(a + ) наблюдали положительную прямую антиглобулиновую пробу, однако признаков гемолиза in vivo не отметили (Daniels и соавт. [2], Thompson и соавт. [11]). Эксперименты с монослоем моноцитов показали, что указанные антитела не относятся к клинически

896

значимыми. У 2 новорожденных, матери которых имели анти-Er a-антитела, была положительная прямая проба Кумбса, однако симптомов гемолитической болезни не наблюдали.

К сожалению, образец анти-Er b-антител, полученный Hamilton и соавт. [5], остается единственным. Исследователи констатируют, что осталось небольшое количество указанной сыворотки лишь для крайне необходимого сопоставления и она в настоящее время практически недоступна.

Список литературы

1.Arriaga F., Garratty G., Poole J., Marty M.L. A novel antibody against antigens of the Er system: anti-Er ab // Vox Sang. – 2000. – V. 78 (Suppl. 1). – abstract P.154.

2.Daniels G.L., Judd W.J., Moore B.P.L. et al. A ‘new’ high frequency antigen Er a // Transfusion. – 1982. – V. 22. – P. 189–193.

3.Daniels G.L. Effect of enzymes on and chemical modifications of high-frequency red cell antigens // Immunohematology. – 1992. – V. 8. – P. 53–57.

4.GaleS.A.,RoweG.P.,NorthfieldF.E.Applicationofamicrotitreplateantiglobulintechnique todeterminetheincidenceofdonorslackinghighfrequencyantigens//VoxSang.–1988.–

V.54. – P. 172–173.

5.HamiltonJ.R.,BeattieK.M.,WalkerR.H.,HartrickM.B.Er b,analleletoEr a,andevidence for a third allele, Er // Transfusion. – 1988. – V. 28. – P. 268–271.

6.LiewY.W.,UchikawaM.LossofEr a antigeninverylowpHbuffers//Transfusion.–1987.–

V.27. – P. 442–443.

7.Lylloff K., Georgsen J., Grunnet N., Jersild C. On the inheritance of the Er a red cell antigen // Transfusion. – 1987. – V. 27. – P. 118.

8.Naoki K., Okuma S., Uchiyama E. et al. Er(a −) red cell phenotype in Japan //Transfusion. – 1991. – V. 31. – P. 572–573.

9.Reid M.E., Lomas-Francis C.The Blood GroupAntigen: FactsBook. – 2-nd. Ed. – London: Academic Press, 2004. – 561 p.

10.Rowe G.P. On the inheritance of Er and the frequency of Er a // Transfusion. – 1988. –

V.28. – P. 87–88.

11.Thompson H.W., Skradski K.J., Thoreson J.R., Polesky H.F. Survival of Er(a + ) red cells in a patient with allo-anti-Er a // Transfusion. – 1985. – V. 25. – P. 140–141.

897

Глава 29.

Система GIL

О выявлении анти-GIL-антител, открывающих одноименный часто встречающийся антиген, сообщили Frederick и соавт. [2] в 1981 г. Антиген традиционно получил обозначение по имени женщины, у которой впервые были обнаружены упомянутые антитела. Позднее были выявлены еще 4 женщины GIL −, имевшие анти-GIL-антител (Daniels и соавт. [1]).

К настоящему времени система представлена одним антигеном GIL и двумя фенотипами: GIL + и GIL −.

В 2002 г. Rodier и соавт. [4] установили локализацию детерминант GIL, которые расположены на акваглицеропорине-3 (AQP3).

Синтез вещества GIL контролируется геном AQP3, который картирован на хромосоме 9 в позиции 9р13 и не зависит от других групповых антигенных систем эритроцитов.

Серология

Daniels и соавт. [1] провели детальное серологическое обследование 5 женщин GIL −, европеек, имевших анти-GIL-антитела.

Наблюдение 1. Миссис Gil, американка, группа крови А(II), гемотрансфузий не было. Эритроциты ее первого ребенка давали слабоположительную реакцию в прямойантиглобулиновойпробе.Каких-либопроявленийГБНненаблюдалось.У второго ребенка прямая проба Кумбса при рождении была отрицательной, однако его эритроциты реагировали in vitro с сывороткой крови матери. Три сибса миссис Gil имели фенотип GIL +, родители не были кровными родственниками.

Наблюдение 2. Миссис Boi, француженка, группа крови О(I). После переливания крови во время хирургического вмешательства у нее развилась гемолитическая трансфузионная реакция, обусловленная, как позже выяснилось, анти-GIL-антителами. Интересно отметить, что эритроциты женщины реагировали в прямой антиглобулиновой пробе. Через 3 мес. после трансфузионной реакции титр анти-GIL-антител снизился с 1 : 1024 до 1 : 2. Эритроциты 2 сибсов женщины и 6 детей реагировали с сывороткой ее крови. Ни у одного из детей признаков ГБН не отмечалось. Эритроциты миссис Boi не реагировали с сывороткой Gil в антиглобулиновой пробе. Отсутствие на них антигена GIL подтверждалось отрицательными результатами адсорбции – элюции. Вместе с тем активность сыворотки миссис Boi полностью устранялась путем адсорбции аллогенными эритроцитами GIL +. Сыворотка миссис Boi после

898

нейтрализации анти-А-антител группоспецифической субстанцией А не реагировала с эритроцитами Gil +.

Эритроциты миссис Boi, исследованные 13 годами позже, давали слабоположительную реакцию с сывороткой Gil, а также с элюатом сыворотки Hun.

Наблюдение 3. Миссис Hun, немка, группа крови О(I). После родов в сыворотке ее крови обнаружены антитела с высокой частотой реагирования. Эритроциты новорожденного давали сильную (3 + ) реакцию в прямой антиглобулиновой пробе, однако симптомов гемолитического заболевания у ребенка не было. Девять лет спустя антитела в сыворотке миссис Hun попрежнему выявлялись. В очередной раз их выявили в другой лаборатории после рождения еще одного здорового ребенка. Эритроциты миссис Hun не реагировали с сывороткой Gil, а эритроциты Gil не реагировали с сывороткой миссис Hun.

Наблюдение 4. Миссис Gou А(II), в анамнезе четыре беременности, гемотрансфузий не было. Ее сыворотка давала слабоположительную реакцию с эритроцитами миссис Hun, но не реагировала с эритроцитами миссис Gil.

Наблюдение 5. Миссис Mil, американка, 78 лет, в анамнезе одна беременность. За 5 недель до обнаружения антител ей перелили две дозы эритроцитов. Антитела до трансфузий отсутствовали. Эритроциты миссис Mil не реагировали с анти-Gil-антителами. Элюаты, полученные с эритроцитов GIL + после контакта с сывороткой миссис Mil, не реагировали с эритроцитами миссис Gil и эритроцитами миссис Gou. Адсорбция сыворотки миссис Mil эритроцитами GIL − не влияла на ее активность.

Перекрестная адсорбция указанных пяти сывороток эритроцитами GIL +, специально отобранными для этой цели, показала, что в четырех из них присутствовали анти-GIL-антитела, пятая сыворотка (Mil) содержала анти-GIL- антитела и сопутствующие им анти-Р1-антитела.

Детальное изучение двух образцов анти-GIL-антител позволило установить принадлежность их к субклассам IgG. Так, антитела сыворотки миссис Gil относились к субклассу IgG1, антитела сыворотки миссис Hun были представлены смесью IgG1 и IgG2.

Антитела сыворотки миссис Boi (женщины, перенесшей гемолитическую посттрансфузионную реакцию) обладали способностью связывать комплемент. Другие анти-GIL-антитела комплемент не связывали. Ни один из образцов антител не обладал агглютинирующей способностью по отношению к эритроцитам GIL +. Все образцы антител обладали сенсибилизирующими эритроциты свойствами и их можно было выявить только в непрямой антиглобулиновой пробе. Реакция усиливалась при энзимировании эритроцитов.

Антиген GIL устойчив к действию папаина, фицина, трипсина, химотрипсина, протеазы и сульфгидрильных реагентов (Reid и Lomas-Francis [3]). Активность антител не ингибировалась плазмой и сывороткой крови, слюной, молозивом, мочой, а также группоспецифическими субстанциями Lewis и Р1.

899

Исследование сывороток миссис Gil и миссис Hun в реакции с монослоем моноцитов показало, что анти-GIL-антитела, содержащиеся в них, потенциально способны вызвать разрушение эритроцитов GIL + in vivo.

Среди обследованных доноров (23 449 европеоидов, 2 841 негроид и 101 монголоид) индивиды, имеющие фенотип GIL −, не выявлены.

Посемейные исследования из-за ограниченности данных не позволили показать передачу молчащего гена GIL − по наследству, в связи с чем антиген GIL не был включен в номенклатуру ISBT. Статус системы он обрел в 2002 г., после того как была установлена его локализация и идентифицирован соответствующий ген.

Daniels и соавт. [1] полагают, что, хотя отдельные образцы анти-GIL-антител в эксперименте проявляют себя как потенциально клинически значимые, прямых доказательств этого нет. Единственный случай гемолитической трансфузионной реакции у миссис Boi, по их мнению, недостаточно документирован и не убеждает в том, что посттрансфузионную реакцию обусловили именно анти-GIL-антитела.

Биохимия, молекулярная генетика

Ген AQP3, контролирующий синтез акваглицеропорина-3, носителя антигена GIL, представлен 6 экзонами (рис. 29.1).

Рис. 29.1. Строение гена AQP3.

Кодируемый гликопротеин состоит из 342 аминокислот (рис. 29.2), содержит один N-гликан и 6 цистеиновых остатков. Он пересекает мембрану эритроцита 6 раз (рис. 29.3), имеет мол. массу 46 кДа. На одном эритроците насчитывается около 26 тыс. антигенных участков GIL.

Рис. 29.2. Аминокислотная последовательность гликопротеинаAQP3.

Молекулярной основой нулевого фенотипа системы GIL является гомозиготность по мутации в участке g>a интрона 5 гена AQP3. Она приводит к смещению рамки считывания и остановке трансляции (Rodier и соавт. [4]).

900