Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

(продолжительностьциркуляции)эритроцитовin vivo (DeManисоавт.[19],Davis

и соавт. [18], Harrison и соавт. [28]).

Whitsett и соавт. [72] отметили, что у реципиента, имевшего аутоантитела анти-AnWj, продолжительность циркуляции собственных эритроцитов не отличалась от нормы, в то время как продолжительность жизни введенных донорских эритроцитов была существенно укороченной.

Knowles и соавт. [33] получили моноклональные антитела со специфичностью анти-AnWj. Антитела реагировали в антиглобулиновой пробе со всеми образцами эритроцитов взрослых лиц, за исключением Lunull и AnWj −. C эритроцитами новорожденных указанные антитела не реагировали.

Локализация антигенов IN иAnWj

Spring и соавт. [57] показали, что антигены системы Indian располагаются на гликопротеине CD44. Иммунопреципитация мембранных белков эритроцитов In(a +b −) и In(a −b + ) анти-In a- и анти-In b-антителами позволила выделить протеин с мол. массой 80 кДа. Последний оказался идентичным протеину CD44. Он не преципитировался специфическими антителами, когда эритроциты не содержали соответствующего антигена. Гликопротеин CD44, выделенный из эритроцитов человека, взаимодействовал с анти-In b-антителами в иммуноблоттинге (Spring и соавт. [57]). Указанные антитела взаимодействовали с CD44 из эри-

троцитов и лейкоцитов человека (Nunomura и соавт. [42], Telen, Ferguson [61]).

Аналогичные результаты получены при использовании моноклональных анти- CD44-антител (Rao и соавт. [53], Petty и соавт. [45]). Аминокислотная последовательность CD44 расшифрована (рис. 23.1).

Рис. 23.1. Аминокислотная последовательность CD44.

Полагают, что антиген AnWj, так же как антигены Indian, расположен на гликопротеинеCD44.Наэтокосвенноуказываютданные,полученныеParsonsисоавт.[44] приобследованиибольнойсврожденнойдизэритропоэтическойанемией.Убольной отмечался дефицит CD44 и одновременно отсутствовали антигены AnWj и Indian, чтосвидетельствуетовозможнойодинаковойлокализацииуказанныхсубстратов.

На одинаковое размещение антигенов CD44, In b и AnWj указывают результаты экспериментов с антигенспецифической иммобилизацией эритроцитов анти-

телами анти-CD44, анти-In b и анти-AnWj (Dalchau и соавт. [13], Rao и соавт. [53]).

Лейкемические клетки линии Jurkat, дефицитные по CD44, после трансфекции кДНК CD44 начинали реагировать с анти-AnWj-антителами (Telen и соавт.

846

[64]). Путем иммунопреципитации указанными антителами выделен полипептид с мол. массой 80 кДа. Telen и соавт. полагают, что антиген AnWj расположен на трипсинрезистентном участке изоформы CD44, отсутствующей у новорожденных. Авторы не исключают, что антиген AnWj может размещаться на изоформе CD44 с мол. массой 200 кДа.

Строение CD44

Протеин CD44 – один из кластеров дифференцировки. Его обозначают также: In(Lu)-ассоциированный р80 (р85), антиген Гермес, фактор хоминга лимфоцитов, хомингассоциированные клеточные адгезивные молекулы (H-CAM). В организме человека он присутствует во многих тканях (Barclay и соавт. [7], Harn и соавт. [26]).

Белок CD44 является компонентом мембраны эритроцитов, имеет мол. массу 80 кДа, чувствителен к действию сульфгидрилльных реагентов, N-гликозилирован, имеетнесколькоизоформ(Springисоавт.[57],Telenисоавт.[63,66]).

Количество эпитопов CD44 на одном эритроците составляет 6 000–10 000 (Anstee и соавт. [1]).

Рис. 23.2. Организация гена CD44.

Цифрами обозначены экзоны, белые прямоугольники – экзоны, подвергающиеся альтернативному сплайсингу, черные прямоугольники – экзоны, кодирующие трансмембранные домены.

Ген CD44 имеет протяженность 50 кб, состоит из 20 экзонов (рис. 23.2) (Screaton и соавт. [55], Tolg и соавт. [68]).

Возникновение изоформ CD44 зависит от характера сплайсинга и особенностей гликозилирования. Гемопоэтический вариант CD44 (CD44Н) считается стандартным и присутствует на эритроцитах и лейкоцитах. Экстрацеллюлярный N-терминальный домен содержит 248 аминокислот, трансмембранный – 21 аминокислоту, внутриклеточный – 72 (Stramencovic и соавт. [59], Goldstein и соавт. [25], Harn и соавт. [26]). Экстрацеллюлярный домен CD44 подразделяют на две области:

––проксимальный участок О-гликозилирования и хондроитинирования;

––дистальный участок дисульфидных связей и цистеиновых остатков

(рис. 23.3).

847

Рис. 23.3. Строение молекулы CD44, несущей антигены системы Indian.

По степени гликозилирования и гликозаминхондроитирования CD44 относят к протеогликанам. Цитоплазматический домен его взаимодействует с цитоскелетом через связь 4.1 или анкирин (Spring и соавт. [57], Nunomura и соавт. [42]).

Функции CD44

Гликопротеин CD44 широко представлен в организме человека и лишь немногие клетки его не содержат. Он имеется на эритроцитах, Т- и В-лимфоцитах,

гранулоцитах, моноцитах (Spring и соавт. [57], Telen и соавт. [65, 66], Dalchau и

соавт. [13]). CD44 присутствует в клетках тимуса, печени, легких, кожи, молочной железы, мышцах, а также в эпителии желудка, тонкой кишки и желчного пузыря (Anstee и соавт. [1], Flanagan и соавт. [22]).

Лиганд CD44 выполняет многочисленные биологические функции: участвует в адгезиистромальных,эпителиальныхиэндотелиальныхклеток,взаимодействииТ- и В-лимфоцитов в процессе иммунного ответа, фиксации лимфоцитов в очаге воспаления. Лиганду CD44 приписывается участие в формировании матрикса заживающей раны, альтернативном сплайсинге, а также в метастазировании опухолей (Bajorath [5], Borland и соавт. [10]). Многие из перечисленных взаимодействий происходятприучастиигиалуроновойкислоты,которая,являясьвысокомолекулярным гликозаминогликаном, входит в состав межклеточного вещества, а также структуру мембраны клеток. CD44 взаимодействует с коллагеном, фибронектином и ламинином, участвует в адгезии стромальных эритроидных предшественников в процессе образованияколоний(Chan,Watt[11],Ostendorpисоавт.[43]).

848

ЛигандCD44предположительносодержиттриучасткасвязываниягиалуроновойкислотычерезаргининилилизин.ЗаменаArg46Glyблокироваласвязывание CD44 с гиалуроновой кислотой (Yang и соавт. [73]).

Мутация гена CD44, приводящая к аминокислотной замене Pro 46 и возникновению фенотипа In(a +b −), не влияла на связывание CD44 и гиалуроновой кислоты in vitro (Telen и соавт. [67]).

Эксперименты с направленным мутагенезом показали, что для связывания гиалуроновой кислоты и CD44 имеют значение последовательности: Arg 41, Tyr 42, Arg 78 и Tyr 79. Процесс усиливается при Lys 68, Asn 100, Asn 101 и Tyr 105 (Bajorath и соавт. [6]).

Список литературы

1.AnsteeD.J.,GardnerB.,SpringF.A.etal.NewmonoclonalantibodiesinCD44andCD58:their usetoquantifyCD44andCD58onnormalhumanerythrocytesandtocomparethedistribution ofCD44andCD58inhumantissues//Immunology.–1991.–V.74.–P.197–205.

2.Badakere S.S., Joshi S.R., Bhatia H.M. et al. Evidence for a new blood group antigen in the Indian population (preliminary report) // Indian J. Med. Res. – 1973. – V. 61. – P. 563.

3.Badakere S.S., Parab B.B., Bhatia H.M. Further observations on the In a (Indian) antigen in Indian populations // Vox Sang. – 1974. – V. 26. – P. 400–403.

4.Badakere S.S., Vasantha K., Bhatia H.M. et al. High frequency of In a antigens among Iranians andArabs // Hum. Hered. – 1980. – V. 30. – P. 262–263.

5.Bajorath J. Molecular organization, structural features, and ligand binding characteristics of CD44, a highly variable cell surface glycoprotein with multiple functions // Proteins. – 2000. – V. 39. – P. 103–111.

6.Bajorath J., Greenfield B., Munro S.B. et al. Identification of CD44 residues important for hyaluronan binding and delineation binding site // J. Biol. Chem. – 1998. – V. 273. –

P.338–343.

7.Barclay A.N., Brown M.H., Law S.K.A. et al. The Leukocyte Antigens: FactsBook. – 2-nd ed. – London:Academic Press, 1997.

8.Bhatia H.M., Badakere S.S., Mokashi S.A., Parab B.B. Studies on the blood group antigen In a // Immunol. Commun. – 1980. – V. 9. – P. 203–215.

9.Blancher A., Oyen R., Tossas E. et al.Amacaque monoclonal antibody anti-CD44: a useful reagent for identifying the dominant type Lu(a −b −) // Immunohematology. – 1999. –

V.15. – P. 82.

10.Borland G., Ross J.A., Guy K. Forms and functions of CD44 // Immunology. – 1998. –

V.93. – P. 139–148.

11.Chan J.Y.-H., Watt S.M. Adhesion receptors on haematopoietic progenitor cells // Brit.

J.Haemat. – 2001. – V. 112. – P. 541–557.

12.Dahr W., Kruger J. Solubilization of various blood group antigens by the detergent Triton X-100 // Forensic. Sci. Int. – 1983. – V. 23. – P. 49–50.

13.Dalchau R., Kirkley J., Fabre J.W. Monoclonal antibody to a human brain-granulocyte-T

lymphocyte antigen probably homologous to the W3 / 13 antigen of the rat // Eur.

J.Immunol. – 1980. – V. 10. – P. 745–749.

14.Daniels G.L. Blood group antigens of high frequency: a serological and genetical study // PhD Thesis. – University of London, 1980.

15.Daniels G. Effect of enzymes on and chemical modifications of high-frequency red cell antigens // Immunohematology. – 1992. – V. 8. – P. 53–57.

16.Daniels G. Lutheran related antibodies // Rev. Franc. Transfus. Immunohemat. – 1988. –

V.31. – P. 447–452.

849

17.Daniels G.L., Flegel W.A., Fletcher A. et al. International society of blood transfusion committee on terminology for red celll surface antigens: Cape Town report // Vox Sang. – 2007. – V. 92. – P. 250–253.

18.Davis K., Lucchesi G., Lyle B., Bradley P. A further example of anti-Wj in an individual of common Lutheran phenotype [Abstract] // Joint. Congr. Int. Soc. Blood Transfus. andAABB, 1990.–P.153.

19.De Man A.J.M., van Dijk B.A., Daniels G.L.An example of anti-AnWj causing haemolytic transfusion reaction // Vox Sang. – 1992. – V. 63. – P. 238.

20.DumasiaA.N., Gupte S.C. Quantitation of In a blood group antigens // Indian J. Med. Res. – 1990. – V. 92. – P. 50–53.

21.Ferguson D.J., Gaal H.D. Some observations on the In b antigen and evidence that anti-In b causes accelerated destruction of radiolabeled cells // Transfusion. – 1988. – V. 28. – P. 479– 482.

22.Flanagan B.F., Dalchau R., Allen A.K. et al. Chemical composition and tissue distribution of the human CDw44 glycoprotein // Immunology. – 1989. – V. 67. – P. 165–175.

23.Garner S.F., Devenish A. Do monocyte ADCC assays accurately predict the severity of hemolytic disease of the newborn caused by antibodies to high-frequency antigens? // Immunohematology. – 1996. – V. 12. – P. 20–26.

24.Giles C.M. Antithetical relationship of the anti-In a with Salis antibody // Vox Sang. – 1975. – V. 29. – P. 73–76.

25.Goldstein L.A., Zhou D.F.H., Picker L.J. et al. A human lymphocyte homing receptor, the Hermes antigen, is related to cartilage proteoglycan core and link proteins // Cell. – 1989. –

V.56. – P. 1063–1072.

26.Harn H.-J., Isola N., Cooper D.L. The multispecific cell adhesion molecule CD44 is represented in reticulocyte cDNA// Biochem. Biophys. Res. Commun. – 1991. – V. 178. –

P.1127–1134.

27.Harris T., Steiert S., Marsh W.L., Bertman L.B. A Wj-negative patient with anti-Wj // Transfusion. – 1986. – V. 26. – P. 228.

28.Harrison C.R., Heinz R., Claudhuri T.K. Clinical management of a patient with anti-Anton [Abstract] // Transfusion. – 1985. – V. 25. – P. 463.

29.Joshi S.R. Immediate hemolytic transfusion reaction due to anti-In b // Vox Sang. – 1992. –

V.63. – P. 232–233.

30.Joshi S.R., Bhatia H.M. Effect of 2-aminoethyl isothiouroniumbromide on In a / In b blood group antigens // Indian J. Med. Res. – 1987. – V. 85. – P. 420–421.

31.Joshi S.R., Gupta D., Choudhury R.K., Choudhury N. Transfusion-induced anti-In a following a single-unit transfusion // Transfusion. – 1993. – V. 33. – P. 444.

32.JudsonP.A.,SpringF.A.,ParsonsS.F.etal.Reportongroup8(Lutheran)antibodies//Rev. Franc. Transfus. Immunohemat. – 1988. – V. 31. – P. 433–440.

33.Knowles R.W., Bai Y., Lomas C. et al. Two monoclonal antibodies detecting high frequency antigensabsentfromredcellsofthedominanttypeofLu(a −b −)Lu:–3//J.Immunogenet.– 1982. – V. 9. – P. 353–357.

34.Longster G.H, North D.I, Robinson E.A. Four further examples of anti-Inb detected during pregnancy // Clin Lab Haematol. – 1981. – V. 3. – P. 351–356.

35.LongsterG.H.,RobinsonE.A.E.Fourfurtherexamplesofanti-In bdetectedduringpregnancy

//Clin. Lab. Haematol. – 1981. – V. 3. – P. 351–356.

36.Lucas M.G., Green A.M., Telen M.J. Characterization of the serum In(Lu)-related antigen: identificationofaserumproteinrelatedtoerythrocytep80//Blood.–1989.–V.73.–P.596–600.

37.LukasavageT.Donorscreeningwithanti-AnWj//Immunohematology.–1993.–V.9.–P.112.

38.Magrin G., Harrison C. One hour 51Cr survival in a patient with anti-AnWj [Abstract] // 20-th Cong. Int. Soc. Blood Transfus, 1988. – P. 228.

850