Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

расценен как приобретенный, возникший вследствие дизэритропоэтических соматических мутаций.

Антиген In a у европейцев встречается редко (менее 0,1 %), In b – часто (более 99,9 %). Антиген In a чаще встречается у арабов и иранцев (табл. 23.1): 10,6 и 11,8 % соответственно (Badakere и соавт. [3, 4], Longster и соавт. [34]). Среди 700

индийских доноров были найдены 2 человека In(b −) (Joshi [29]). Фактическая частота лиц In(b −) (0,28 %) в 14 раз превысила расчетную (0,02 %). Среди 251 эмигранта из Азии, проживающих в Северной Англии, 2 имели фенотип In(а +b −), 8 – In(а +b + ) (Longster, Robinson [35]). Частота фенотипа In(а +b −) и в этой группе превысила ожидаемую. У других народов антигены Indian не изучены.

Антигенные различия In a / In b обусловлены заменой одной пары нуклеотидов G 252 C в экзоне 2 гена CD44. У лиц In(a + ) позицию 46 в протеине CD44 занимает пролин, у лиц In(b + ) в позиции 46 располагается аргинин. Это удалось установить путем трансфекции клеток лейкемической линии Jurkat человека образцами кДНК,полученнымиотлюдейIn(а + )иIn(b + ).Припроведенииэкспериментавы-

явлены мутацииT322 C – молчащая,T370 C – молчащая,A441 C,Y109 S,A831 G, Q 239 G. Все они, кроме G 252 C, не влияли на экспрессию антигена In a.

Таблица 23.1

Распределение антигена Ina у некоторых народов

Антигены Indian разрушаются папаином, трипсином, химотриписном и про-

назой (Badakere и соавт. [3], Dumasia, Gupte [20], Giles [24], Longster, Robinson [35]). В ряде случаев выявлялись эпитопы, устойчивые к действию трипсина и химотрипсина (Anstee и соавт. [1]).

Антигены Indian разрушаются сульфгидрильными реагентами, в том числе

AET и DTT (Dahr, Kruger [12], Daniels [15], Ferguson, Gaal [21], Joshi и Bhatia [29, 30]), иногда для этого требовалась повышенная концентрация редуцента.

Обработка эритроцитов сиалидазой не влияла на экспрессию антигенов In a и In b и экспрессию протеина CD44.

Эритроциты In(a −b + ) и In(a +b + ) отличаются по выраженности агглютинации сывороткой анти-In b, взятой в разведении (Joshi [29]).

Убеременных и новорожденных экспрессия антигена In a снижена (Bhatia

исоавт. [8], Dumasia, Gupte [20]). В непрямой радиометрической пробе количество антигена In a на эритроцитах беременных составило 38 %, на эритроцитах новорожденных 25 % от его уровня у взрослых лиц контрольной группы

841

(Dumasia, Gupte [20]). Через 3‒6 мес. после родов выраженность указанного антигена возвращалась к норме (Dumasia, Gupte [20]).

Антигены Indian присутствуют в растворимой форме в плазме крови, и могут быть выявлены методом нейтрализации соответствующих антител (Lucas и

соавт. [36], Telen и соавт. [60]).

INFI и INJA

В 2006 г. к системе Indian отнесены еще 2 часто встречающихся антигена – INFI и INJA (Daniels и соавт. [17]). Оба антигена идентифицированы Poole и соавт. [49, 50]. Авторы собрали 5 сывороток с высокой частотой реагирования, но отличающиеся специфической направленностью. Сыворотки были получены от беременных женщин: 3 марокканок и 2 пакистанок, и изучались в течение 10 лет. Посредством иммобилизации моноклональных антител удалось показать, что антитела всех 5 сывороток реагируют с детерминантами, расположенными на гликопротеине CD44. Далее Poole и соавт. провели секвенирование гена CD44 указанных женщин. Оказалось, что марокканки гомозиготны по мутации С 255 G в экзоне 3, пакистанки гомозиготны по мутации С 488 A в экзоне 5. Первая мутация вызвала аминокислотную замену His 85 Glu, вторая ‒ Tre 163Arg. Антиген, открываемый сыворотками марокканок, получил обозначение INFI, открываемый сыворотками пакистанок – INJA. После включения в систему Indian антигены получили обозначение ISBT – IN3 и IN4 соответственно.

Известно, что одиночные аминокислотные замены в субстрате способны стимулировать синтез специфических антител, распознающих эти участки. В связи с этим не исключено, что замены Glu 85 иArg 163 могут проявляться фенотипически как редко встречающиеся антигены, антитетичные часто встречающимся антигенам INFI и INJA, подобно редкому фактору In a по отношению к часто встречающемуся In b.

AnWj

Как отмечают Race и Sanger [52], часто встречающийся антиген Anton (An) впервые обнаружили Boorman и Tippett в 1972 г., однако эта находка не была опубликована. Вторую сыворотку со специфичностью анти-An нашел в 1980 г. Daniels [14]. Оба образца антител не реагировали с эритроцитами Lunull (Lutherannull) и эритроцитами новорожденных, на основании чего выявляемый ими антиген сначала был причислен к системе Lutheran и получил обозначение LU15. Однако Poole и Giles [47] показали, что антитела анти-An реагируют с эритроцитами Lunull рецессивного типа и следовательно выявляемый ими антиген не может быть производным гена LU.

В 1983 г. Marsh и соавт. [40] нашли аутоантитела, получившие обозначение анти-Wj. Они реагировали с эритроцитами 415 случайно выбранных лиц и тремя образцами эритроцитов Lunull рецессивного типа. С помощью метода адсорбции ‒ элюции авторы установили, что эритроциты Lunull доминантного типа и

842

эритроциты новорожденных, не реагировавшие в реакции агглютинации с антителами анти-Wj, все же содержат некоторое количество антигена Wj.

В1985 г. Poole и Giles [46] высказали предположение, что антитела анти-An

ианти-Wj идентичны и открывают один и тот же антиген. Вскоре это предположение нашло подтверждение. Mannessier и соавт. [39] наблюдали пациента с болезнью Ходжкина, у которого констатировали временную утрату антигенов Wj

иAn. Его эритроциты не реагировали с сывороткой анти-Wj и сывороткой антиAn. В крови больного присутствовали антитела, идентифицированные как аутоиммунные анти-Wj. Через 6 мес. на фоне ремиссии антитела исчезли, а больной обрел фенотипAn + Wj +. Полученные данные сочли доказательными для заключения о том, что антигеныAn и Wj идентичны. Новый антиген получил обозначение AnWj и был включен в серию 901 «Часто встречающиеся антигены» под номером 901009. Обозначение LU15 (005015) по отношению к этому антигену больше не используют и из классификации ISBT исключили.

Нулевой фенотип AnWj − обычно приобретенный транзиторный, вместе с тем, как показали Poole и соавт. [48], он может быть генетически детерминированным. Так, из 7 детей, родившихся у арабской женщины AnWj −, имевшей анти-AnWj-антитела, 2 были AnWj −. Поскольку другие дети женщины имели фенотип AnWj +, а ее муж приходился ей кровным родственником, возникло предположение, что носителями фенотипа AnWj − могут быть лица, гомозиготные по редко встречающемуся рецессивному молчащему гену.

Посемейное исследование показало, что антиген AnWj не связан с локусом

LU, так же как и с локусами ABO, MNS, RH, KEL, FY, JK, XG и XK.

Среди 2400 американских доноров, эритроциты которых были исследованы

сывороткой анти-AnWj, 3 имели фенотип Lunull. Лица AnWj − с нормально выраженными антигенами Lutheran отсутствовали (Lukasavage [37]), в связи с чем возникли сомнения относительно полной независимости антигенаAnWj от гена LU.

Следует отметить, что антиген In b, не входящий в систему Lutheran, и антиген AnWj, не входящий ни в систему Indian, ни в систему Lutheran, одинаково слабо

выражены на эритроцитах Lunull доминантного типа. На таких эритроцитах присутствие антигенаAnWj удается показать только с помощью адсорбции ‒ элюции

(Poole и соавт. [48]). На эритроцитах Lunull рецессивного и Х-ассоциированного типа антигенAnWj выражен нормально (Poole, Giles [47], Norman и соавт. [41]).

АнтигенAnWj в противоположность антигенам Indian и Lutheran устойчив к трипсину, химотрипсину и сульфгидрильным реагентам.

Своеобразным является онтогенез антигена AnWj. У новорожденных фенотипAnWj − меняется наAnWj + на 3‒46 день после рождения, причем преобразование происходит в течение суток (Poole,VanAlphen [51]). Этот феномен пока не имеет объяснения. Эритроциты поступают в кровоток постепенно. Полагать, что в кровяном русле появляется фактор конверсии, одномоментно превращающий эритроцитыAnWj − вAnWj +, нет оснований. Возможно, растворимая форма веществаAnWj, достигаякритическойконцентрациивплазмекрови,адсорбируетсянаэритроцитах.

843

В редких случаях наблюдалась обратная конверсия: превращение фенотипа

AnWj + вAnWj −.

Остается без объяснений транзиторная утрата антигена AnWj на эритроцитах, сочетающаяся с появлением аутоантител анти-AnWj у больных, а также в отдельных случаях у здоровых (Mannessier и соавт. [39], Poole, Van Alphen [51], Harris и соавт. [27], Magrin и соавт. [38]).

Антиген AnWj может выступать в роли рецептора для бактерий Haemophilis influenza. Эти микробы вызывают воспаление слизистой оболочки верхних дыхательныйпутейумаленьких детей.НекоторыештаммыH. influenzae агглютинировали все образцы эритроцитов, за исключением AnWj −. Агглютинация ингиби-

ровалась антителами анти-AnWj (VanAlphen и соавт. [71],Whitsett и соавт. [72]).

Бактерии H. influenzae связывались с эпителием полости рта, однако этого не наблюдалось у лиц AnWj − среди членов описанной выше арабской семьи (Van Alphen и соавт. [69], Whitsett и соавт. [72]). Адгезия бактерий к эпителиальным клеткамнеингибироваласьантителамианти-AnWj(VanAlphenисоавт.[70]).Хотя рецепторы эритроцитов и рецепторы эпителия, притягивающие H. influenza, неидентичны,онимогутиметьодинаковуюгенетическуюимолекулярнуюоснову.

Влияние гена In(Lu) на экспрессию CD44, Inb иAnWj

Присутствие гена In(Lu), молчащего гена системы Lutheran, угнетает экспрессию ряда эритроцитарных антигенов, в том числе CD44, In b иAnWj. Это было показано с помощью проточной цитофлюориметрии. Связывание анти-CD44-антител эритроцитами лиц Lunull доминантного типа составляло 25‒39 % от уровня связывания этих антител эритроцитами, имевшими обычный набор антигенов Lutheran (Daniels[16],Springисоавт.[57],Telenисоавт.[65]).Втожевремяэритроцитылиц

Lunull рецессивного и Х-ассоциированного типов связывали нормальное и даже по-

вышенноеколичествоанти-CD44-антител(Judsonисоавт.[32],Telen,Green[62]).

Титр анти-In b-антител был существенно ниже при титровании сывороток эритроцитами Lunull доминантного типа по сравнению с титром, полученным при использовании эритроцитов с другим набором антигенов Lutheran, в том числе с эритроцитами Lunull рецессивного и Х-ассоциированного типа (Spring и

соавт. [57], Ferguson, Gaal [21]).

Telen и соавт. [60] отметили, что у лиц Lunull доминантного типа концентрация протеина CD44, обычно присутствующего в сыворотке крови в растворимой форме, снижена. Нормальная сыворотка нейтрализовала около 70 % анти- CD44-антител, в то время как сыворотка лиц Lunull доминантного типа – 33 %.

Антитела Indian

Антитела анти-In a и анти-In b не обладают способностью связывать комплемент (Reid, Lomas-Francis [54]), лучше выявляются в непрямой анти-

глобулиновой пробе (Giles [24], Longster, Robinson [35], Bhatia и соавт. [8]).

Некоторые из них вызывали прямую агглютинацию эритроцитов донора и

844

выявлялись при проведении пробы на индивидуальную совместимость перед гемотрансфузией.

Аллоиммунизация антигенами Indian развивается достаточно быстро, поскольку они обладают относительно высокой иммуногенностью.

По данным Bhatia и соавт. [8], у 30 из 39 добровольцев D −In(a −), искусственно иммунизацированных эритроцитами D + In(a + ) с целью получения сырья для производства иммуноглобулина резус, помимо анти-D-антител, выработались анти-In a-антитела.

Joshi и соавт. [31] наблюдали реципиента, у которого анти-In a-антитела образовались после переливания одной дозы эритроцитов In(a + ).

Ferguson и Gaal [21] описали анти-In b-антитела у первобеременной, не имевшей гемотрансфузий.

Изучение выживаемости эритроцитов In(a + ) в кровяном русле сенсибилизированных лиц показало, что анти-In a-антитела быстро разрушают иногруппные эритроциты. Последние исчезали из кровотока реципиента по истечении 20 мин с момента введения (Bhatia и соавт. [8]).

Быструю убыль In b-положительных эритроцитов наблюдали Ferguson и Gaal [21] у больного, сенсибилизированного указанным антигеном.

Описан случай немедленной гемолитической реакции, обусловленной анти- In b-антителами, после переливания 50 мл несовместимой крови (Joshi [29]).

При очевидной трансфузионной значимости антитела Indian не проявляли себя в качестве причины ГБН. Прямой антиглобулиновый тест с эритроцитами новорожденных лишь иногда был положительным, однако клинических про-

явлений ГБН не наблюдалось (Garner, Devenish [23], Reid, Lomas-Francis [54], Sosler и соавт. [56]).

Получены моноклональные анти-CD44-антитела (Stoll и соавт. [58], Blancher

и соавт. [9]) и анти-In b (Stoll и соавт. [58]).

Анти-AnWj

Антитела анти-AnWj могут быть как аутоиммунными, так и аллоиммунными. Описаны две женщины AnWj − с наличием аллоиммунных анти-AnWj- антител. Обе имели беременности. В сыворотке крови их брата, также AnWj −, указанные антитела отсутствовали.

Poole et al [48] выразили сомнение относительно того, что образование анти- AnWj-антител может быть инициировано ничтожно малыми количествами антигена, имеющимися на эритроцитах плода.

Антитела анти-AnWj вызывали гемолитические посттрансфузионные реакции (Magrin и соавт. [38], De Man и соавт. [19]), но ни разу не были описаны как причина ГБН.

Считается, что наилучшей трансфузионной средой для реципиентов, имею-

щих анти-AnWj-антитела, являются эритроциты доноров Lunull. Гемолитический потенциал анти-AnWj-антител характеризует приживаемость

845