Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

феномен представляется весьма необычным, поскольку домены полипептида Cromer имеют дисульфидные связи.

Примечание. Частота здесь и далее: ↑ - высокая, ↓ - низкая.

С помощью метода задержки реакции агглютинации показано, что антигенные субстанции Cromer, присутствующие в растворенном виде в плазме, точно соответствуют имеющимся на эритроцитах (Medof и соавт. [61], Laird-Fryer

и соавт. [43], Levene и соавт. [46], Sistonen и соавт. [89], Daniels и соавт. [13, 17], Lublin,Atkinson [51]).

806

Таблица 21.2

Расовые и этнические особенности фенотипов системы Cromer

Активность антител анти-Cr a, -Tc a, -Dr a, -IFC и -UMC ингибировалась концентрированной мочой лиц, эритроциты которых содержали указанные антиге-

ны (Daniels и соавт. [14, 21]).

Распределение антигенов системы Cromer имеет расовые и этнические особенности (табл. 21.2).

Cra

В 1965 г. McCormick, Francis и Gelb [58] исследовали сыворотку беременной негритянки, миссис Cromer. Сыворотка реагировала с эритроцитами более чем 4000 доноров негров, но не реагировала с собственными эритроцитами и эритроцитами сестры. Поскольку обе женщины имели антиген Go а системы RH, авторы полагали, что обнаруженные ими антитела открывают новый часто встречаю- щийсяантиген–Go b,антитетичныйредковстречающемусяантигенуGo a.Однако вскоре выяснилось, что сыворотка миссис Cromer реагирует с эритроцитами

Rhnull, поэтому антитела не могут быть анти-Go b и не относятся к системе резус. Stroup и McCreary [95], обнаружившие второй образец таких антител, обо-

значили их как анти-Cr a и установили связь с антителами анти-Tc a, относящимися к системе Cromer.

Позднее были найдены другие образцы антител анти-Cr a (Smith и соавт. [90], Ross, McCall [84], Leatherbarrow и соавт. [45], Whitsett, Oxendine [107], Dickson

и соавт. [23]). Все сенсибилизированные, за исключением одного, негры. Winker и Hamilton [109] обследовали 8858 доноров негров в г. Детройте (США)

807

и выявили только 2 с фенотипом Cr(a −). Посемейные исследования показали, что наследованиегенаCr a происходитвсоответствиисзакономМенделя[58,90,95].

Трансфекция яйцеклеток китайского хомячка образцами кДНК с делециями по четырем ККП-доменам полипептида DAF показала следующее. Лизаты всех клеток, за исключением тех, в которые была введена кДНК, дефицитная по ККП-4, реагировали с антителами анти-Cr a. У лиц Cr(a −) в геномной ДНК имелась мутация G 679 C, ведущая к замене Pro 193 Ala в домене ККП-4 (Coyne и

соавт. [12], Telen и соавт. [101]).

Антитела анти-Cr a удавалось извлечь из сыворотки путем адсорбции как эритроцитами, так и тромбоцитами лиц, содержащих этот антиген (Sacks, Garratty [86], Judd и соавт. [38]).

Tca, Tcb, Tcc и TcaTcb

Daniels и соавт. [22] нашли два образца антител, которые, так же как и анти- Cr a-антитела, не реагировали с эритроцитами Inab. Они получили обозначение анти-Tc a после обнаружения Laird-Fryer и соавт. [43] еще одного образца таких же антител.

При обследовании 950 доноров негров с использованием сыворотки антиTc a был выявлен только один с фенотипом Tc(a −), все остальные были Tc(a + ). Фенотип Tc(a −) отсутствовал у 5000 доноров европейцев и 5000 доноров япон-

цев (Laird-Fryer и соавт. [43]).

Антитела анти-Tc b, найденные Lacey и соавт. [41], присутствовали в сыворотке одновременно с анти-Go a-антителами (анти-Rh30). Они реагировали с эритроцитами 6 % американских негров, фенотип которых был соответственно Tc(b + ). Среди европеоидов фенотип Tc(b + ) не обнаружен. Все негроиды с фенотипом Tc(а −) имели группу Tc(b + ). Посемейные исследования показали, что гены Tc a и Tc b являются аллельными (Lacey и соавт. [41]). По результатам обследования 350 американских негров рассчитана частота генов Tc a (0,97) и Tc b

(0,03), а также генотипов Tc a / Tc a (0,941), Tc a / Tc b (0,058) и Tc b / Tc b (0,001).

На эритроцитах белой женщины и ее сестры, имевших фенотип Tc(a −b −), Law и соавт. [44] обнаружили редкий антиген, обозначенный Tc с. Таким образом, фенотип женщин в действительности соответствовал Tc(a −b −с + ). Через 6 мес. после рождения ребенка у одной из женщин появились антитела антиTc a,Tc b, которые не удалось разделить путем адсорбции эритроцитами Tc(a +b −) и Tc(a −b + ). Антитела не реагировали с эритроцитами Tc(a −b −с + ), но давали положительные реакции с эритроцитами Tc(a −b +с–) и Tc(a +b −с −).

Второй образец антител анти-Tc a,Tc b выявили Bell и соавт. [4] у европейки, имевшей фенотип Tc(a −b −).

Эксперименты с трансфекцией клеточных линий показали, что эпитопы Tc a несет домен ККП-4 DAF. Трансверсии G → T и G → С в нуклеотиде 155, кодирующие заменыArg 18 Leu иArg 18 Pro, приводили к экспрессии антигеновTc b и

Tc с соответственно (Telen и соавт. [101], Udani и соавт. [104], Lublin и соавт. [52]).

808

Dra

Levene и соавт. [46, 47], Nakache и соавт. [66] выявили трех индивидов, узбекских евреев, содержавших антитела, получившие обозначение анти-Dr a. Соответственно указанные лица имели фенотип Dr(a −).

Лица Dr(a −), у которых имеются анти-Dr a-антитела, найдены как среди узбекских евреев (Reid и соавт. [79]), так и среди японцев (Daniels и соавт. [18])

и русских (Lublin и соавт. [54], Reid и соавт. [82]).

Выявлены лица Dr(a −), у которых анти-Dr a-антитела отсутствуют (Nakache и

соавт. [66], Uchikawa и соавт. [103]).

Эритроциты Dr(a −) несут слабовыраженные антигены Cromer: их экспрессия составляет 40 % от обычной (Wang и соавт. [106]). При этом фактор DAF не претерпевает качественных изменений, они носят количественный характер

(Lublin и соавт. [55], Daniels, Levene [20]).

Иногда эритроциты Dr(a −) ошибочно идентифицировали как Inab и относили к нулевому фенотипу (Lublin и соавт. [54], Reid и соавт. [82]).

Lublin и соавт. [52, 54] секвенировали геномную ДНК четырех неродственных лиц Dr(a −). У всех четырех обнаружена мутация С 596 Т в экзоне 5 гена DAF, сопровождавшаяся заменой серина на лейцин в домене ККП-3 протеина DAF. Эта мутация приводила к потере участка рестрикции TaqI. Выявлены два DAF-транскрипта: полной длины, присутствовавший в небольшом количестве, и укороченный за счет делеции 44 нуклеотидов. Данная мутация изменяла рамку считывания с образованием стоп-кодона. Полипептиды, синтезируемые в результате трансляции больших транскриптов, включали лидер-пептид, 165 аминокислот двух первых ККП-доменов и половину третьего домена. Полипептиды DAF кодировались короткими транскриптами, что, по-видимому, обусловливало низкую экспрессию антигенов Cromer на эритроцитах Dr(a −).

WESa и WESb

WES a – редко встречающийся антиген, выявлен у 61 из 10 982 финнов (Sistonen и соавт. [89]), 2 из 1610 белых американцев и 7 из 1460 американских негров (Copeland и соавт. [11]), 5 из 245 негров – жителей Лондона (Daniels и соавт. [17]). Он отсутствовал у 210 обследованных бельгийцев, 747 поляков, 1073 венгров, 707 латышей, 500 японцев и 1026 жителей Сомали (Daniels, Levene [20]).

Антитетичным по отношению к редкому антигену WES a является широко распространенный антиген WES b. Выявлено два образца антител анти-WES b,

оба у негритянок WES(a +b −) (Daniels и соавт. [17], Poole и соавт. [75]).

Эксперименты с трансфекцией клеточных линий фрагментами кДНК гена DAF показали, что антигенные эпитопы WES a и WES b расположены в ККП-1- домене гликопротеина DAF (Telen и соавт. [100]). Амплификация и секвенирование экзона 2 гена DAF позволили выявить точковую мутацию T 245 G, ведущую к замене лейцина на аргинин в положении 48. Таким образом, антигенные

809

различия WES a / WES b обусловлены одной аминокислотной заменой. Аллель WES a в отличие от WES b лишен участка рестрикции AflII.

Мышиные МКА против домена ККП-1 DAF блокировали связывание антител анти-Tc a, в то время как в отношении антител анти-WES b оставались инертными. Как полагают Petty и соавт. [74], проводившие эти эксперименты, эпитопы Tc a и WES b расположены на разных участках домена ККП-1, что согласуется с молекулярной моделью, предложенной Kurtner-Kondo и соавт. [40].

Esa

Антиген Es a широко распространен. В связи с этим лиц Es(a −), способных вырабатывать анти-Es a-антитела, очень мало. Известно всего два образца антител анти-Es a. Первый обнаружен в 1984 г. Tregellas [102] у мексиканки, родители которой были двоюродными братом и сестрой. Два из трех сибсов пробанда также имели фенотип Es(a −), третий был Es(a + ). Принадлежность анти- Es a-антител к системе Cromer подтверждалась тем, что сыворотка не реагирова-

ла с эритроцитами Inab (Crnull).

Второй образец анти-Es a-антител нашли в 1996 г. Reid и соавт. [83] у мужчины негра.

Другие лица Es(a −), за исключением 4 упомянутых выше, не выявлены. Из 3400 обследованных доноров все были Es(a + ).

Отмечено (Daniels и соавт. [17]), что эритроциты Es(a −) слабее реагируют с анти-WES b-антителами, чем эритроциты Es(a + ). Эритроциты WES(a +b −) в свою очередь реагируют с антителами анти-Es a, однако очень слабо, только при использовании метода адсорбции – элюции.

Petty и соавт. [73] установили, что эпитопы Es a расположены на домене ККП-1 гликопротеина DAF.

Секвенирование гена DAF упомянутого негра Es(a −) выявило его гомозиготность по мутации Т 239 А, кодирующей замену Ile 46 Аsn в домене ККП-1 (Lublin и соавт. [52]). Указанная аминокислотная последовательность расположена вблизи позиции Leu 48 Аrg, которая обусловливает специфичность антигенов WES a и WES b. Этим, очевидно, объясняется перекрестное реагирование антигенов Es a и WES b с сыворотками анти-WES b и анти-Es a соответственно.

UMC

Wang и соавт. [106] обнаружили у японки антитела с очень высокой частотой реагирования и обозначили их анти-UMC. Фенотип этой женщины соответствовал UMC −. Один из трех ее сибсов имел такой же фенотип. Остальные из 45 610 японских доноров, обследованных сывороткой антиUMC, были UMC +.

С помощью метода задержки реакции агглютинации рекомбинантными фрагментами DAF установлено, что анти-UMC-антитела распознают эпитопы, расположенные на домене ККП-4 (Daniels и соавт. [19]). В молекулярно-

810