Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

генетических исследованиях выявлена гомозиготность пробанда по мутации С 749 Т в экзоне 6 гена DAF, кодирующей Thr 216 Met.

GUTI

Антиген GUTI открыт в Чили в 2002 г. Storry и соавт. [94]. Антитела антиGUTI присутствовали в сыворотке крови индейской женщины. Она и ее сестра имели фенотип GUTI −. Среди чилийских индейцев племени мапуче, к которому принадлежали эти женщины, 15 % были гетерозиготными по молчащему гену GUTI −. Экспрессия антигена GUTI была слабой на эритроцитах Dr(a −) (Reid, Lomas-Francis [81]). Молекулярно-генетические исследования показали, что у лиц GUTI − в домене ККП-4, в позиции 206, содержится гистидин, тогда как в полипептиде DAF дикого типа эту позицию занимает аргинин (Storry и соавт. [94]). ПеремещениеArg 206 His было обусловлена нуклеотидной заменой G 719 А в экзоне 6 гена DAF.

SERF

Антиген SERF открыт в 2004 г. Banks и соавт. [3] с помощью антител, обнаруженных авторами в сыворотке крови женщины из Таиланда. У женщины имелась мутация C 647Tв экзоне 5 гена DAF. Результатом последней являлась аминокислотная замена Pro 182 Leu в ККП-3-домене DAF. Сенсибилизированная женщина оказалась гомозиготной по указанной мутации.

Среди жителей Таиланда мутантный ген SERF встречался с частотой 1,1 % (Palacajornsuk и соавт. [71]).

ZENA, CROV и CRAM

В 2005–2006 гг. появились сообщения об открытии сразу трех новых антигенов системы Cromer. Все они встречались с высокой частотой, идентифицировались специфическими аллоиммунными антителами, которые были выявлены у лиц, не содержавших эти антигены. Антитела к этим антигенам не реагировали с эритроцитами Inab. Молекулярно-генетические исследования показали, что все три пробанда были гомозиготными по мутациям в разных участках гена

DAF (Daniels и соавт. [16], Ivankovik и соавт. [37], Hue-Roye и соавт. [33, 34]).

Мутация His 242 Glu сочеталась с фенотипом ZENA, мутация Glu 156 Lis – c фенотипом CROV, мутация Glu 247Arg – с фенотипом CRAM −.

Установлено, что антигенные эпитопы CROV содержатся в ККП-2-домене, в то время как участки антигенов ZENA и CRAM расположены в домене ККП-4 (Daniels и соавт. [16], Ivankovik и соавт. [37], Hue-Roye и соавт. [34]).

Лица CROV− были выявлены среди хорватов (Ivankovik и соавт. [37]). Антитела анти-CRAM, присутствовавшие у сенсибилизированной женщи-

ны, в период беременности исчезли.

Антигены ZENA, CROV и CRAM получили обозначения ISBT: CRОM13, CRОM14иCRОM15соответственно(Danielsисоавт.[16],Hue-Royeисоавт.[33]).

811

Фенотип Inab

Нулевой фенотип – Inab, характеризующийся отсутствием антигенов Cromer, встречается редко. Описаны 6 обладателей указанного фенотипа: 3 японца

(Wang и соавт. [106], Daniels и соавт. [18, 22], Hue-Roye и соавт. [35]), американ-

ский еврей (Walthers и соавт. [105]), американка итальянского происхождения и

еебрат (Lin и соавт. [48]).

Удвух других лиц, первоначально отнесенных Reid и соавт. [82] и Holguin и соавт. [31] к группе Inab, позднее было выявлено небольшое количество веществаDAF(Lublinисоавт.[54]),одинизнихимелфенотипDr(a −).Транзиторный фенотип Inab с наличием антител анти-IFC описан у пациента негра. Годом позже в эритроцитах этого мужчины обнаружено нормальное количество вещества

DAF (Matthes и соавт. [57]).

Эритроциты Inab не реагировали с моноклональными мышиными и кроли-

чьими антителами анти-DAF (Telen и соавт. [98, 99], Parsons и соавт. [72], Merry

и соавт. [62]). В то же время комплементчувствительные эритроциты больных пароксизмальной ночной гемоглобинурией не реагировали с антителами антиCROM (Telen и соавт. [99], Parsons и соавт. [72]).

Lublin и соавт. [54], секвенируя геномную и кодирующую ДНК одного из упомянутых выше японцев с фенотипом Inab, выявили носенс-мутацию в кодоне 53 гена DAF, экзон 2. Кодон триптофана TGG был заменен на стоп-кодон TGA, в связи с чем в ККП-1-домене синтез полипептидной цепи в позиции 53 прекращался. Второй обладатель фенотипа Inab, также японец, оказался гомозиготным по указанной мутации; его родители были гетерозиготами (Daniels и соавт. [18]). У третьего японца фенотип Inab сочетался с трансверсией C 1579 А 24 нуклеотидов в области 3ʹ экзона 2, которая инициировала новый участок сплайсинга (TGGTCAGA на TGgtaaga) и приводила к делеции внутри РНКтранскрипта, смещению рамки считывания с возникновением стоп-кодона в точке мутации (Wang и соавт. [106]). Соответственно трансляция прекращалась в области, кодирующей первые шесть аминокислот ККП-2. Имелась точковая мутация в геномной ДНК, приводящая к утрате участка сплайсинга MboI.

Сыворотка крови 4 носителей фенотипа Inab содержала анти-IFC-антитела, которые реагировали со всеми образцами эритроцитов за исключением соб-

ственных (Daniels и соавт. [18, 22], Walthers и соавт. [105], Lin и соавт. [48], Yazer [111]). Эксперименты с задержкой гемагглютинации рекомбинантными фрагментами DAF показали, что анти-IFC-антитела являются смесью фракций, реагирующих с участками, находящимися на разных ККП-доменах.

Антитела со специфичностью анти-IFC были найдены в сыворотке крови больного 12-летнего негра (Daniels и соавт. [18]). Его эритроциты не были фенотипированы по системе Cromer, однако более вероятно, что он имел транзиторный фенотип Inab. Анти-IFC-антитела исчезли из сыворотки крови больного после того, как нормализовалось содержание вещества DAF на его эритроци-

тах (Matthes и соавт. [57]).

812

У3 из 6 лиц с истинным фенотипом Inab, а также упомянутого мальчика негра, имелась патология кишечника: энтеропатия, сопровождавшаяся потерей белка (Daniels и соавт. [18, 22]), болезнь Крона (Walthers и соавт. [105]), геман-

гиома тонкой кишки (Daniels и соавт. [18]).

Уостальных обладателей фенотипа Inab, среди которых была японка, 86-лет- ня итальянка и ее 70-летний брат, никакой патологии не отмечено (Lin и соавт. [48], Wang и соавт. [106]).

В настоящее время получено несколько серий мышиных МКА к гликопротеину DAF, последние распознают эпитопы на всех четырех ККП-доменах (Spring

исоавт. [91], Daniels и соавт. [19], Coyne и соавт. [12], Moulds и соавт. [64]). В

целом их специфичность подобна специфичности анти-IFC-антител: они не реагируют с эритроцитами Inab и дают слабоположительные реакции с эритроци-

тами Dr(a −) (Moulds и соавт. [64]).

Следует упомянуть два аспекта, привлекающие внимание исследователей к антигенам и антителам системы Cromer. Первый: антитела этой системы имеют прямое отношение к функции комплемента. Неясен и тем более интересен феномен их исчезновения во время беременности. Второй: у большинства антигенов отсутствуют антитетичные партнеры. Их следует искать на эритроцитах лиц, имеющих редкие фенотипы Cromer. Можно полагать, что в ближайшем будущем система Cromer пополниться новыми антигенами, характер распределения которых также может иметь этнические особенности.

Биохимия и генетика

Фактор DAF, выделенный из эритроцитов, имеет мол. массу 70 кД, богат сиаловыми кислотами, имеет 15 участков О-гликозилирования и один участок N-гликозилирования (Lublin и соавт. [53]).

Caras и соавт. [8], Medof и соавт. [60]) показали, что кДНК гена DAF, выделенная из эпителиальной клеточной линии HeLa и линии HL-60 промиелоцитарного лейкоза, кодирует синтез полипептида, состоящего из 327 аминокислот. Полипептид DAF имеет четыре гомологичные области, включающие примерно по 60 аминокислот, которые получили название «короткие конценсусные повторы» (ККП). Далее следует О-гликозилированный участок из 70 аминокислот, богатый серином и треонином, и гидрофобный фрагмент, включающий 24 аминокислоты (рис. 21.1). Расшифрована аминокислотная последовательность DAF-гликопротеина (рис. 21.2).

Меньшая по величине кДНК гена DAF имела вставочную последовательность Alu из 118 нуклеотидов (табл. 21.3), образовавшуюся в результате альтернативного сплайсинга (Caras и соавт. [8]).

Генный локус системы Cromer – DAF (CD55) – картирован на длинном плече хромосомы 1 в позиции 1q32 (Post и соавт. [76]). Ген DAF имеет величину около 40 кб и представлен 11 экзонами (см. табл. 21.3).

813

Рис. 21.1. Строение гликопротеина Cromer.

814

Рис. 21.2. Аминокислотная последовательность DAF.

Клиническое значение

Антитела системы Cromer представлены преимущественно классом IgG (Daniels [15]), встречаются анти-Cr a-антитела IgM (Dickson и соавт. [23]).

Большинство антител IgG относится к субклассу IgG1, однако описаны анти-

тела, относящиеся к субклассам IgG2, IgG3 и IgG4 (Dickson и соавт. [23], Issitt, Anstee [36], Nakache и соавт. [66], Reid и соавт. [79, 80, 83], Sistonen и соавт. [89], McSwain, Robins [59],Anderson и соавт. [1], Byrne и соавт. [7]).

Антитела системы Cromer не имеют существенного значения в трансфузиологии. Опубликованы сообщения о благополучных исходах трансфузий эритроцитов, несовместимых по антигенам этой системы, реципиентам, которые име-

ли антитела анти-Cr a (Smith и соавт. [90], Whitsett, Oxendine [107], Chapman и соавт. [9]) и анти-Tc a (Hoffer и соавт. [30]).

Вместе с тем описаны посттрансфузионные реакции, причиной которых были антитела анти-Cr a (Byrne и соавт. [7]) и анти-Tc a (Kowalski и соавт. [39]). В последнем случае реципиенту перелили шесть доз эритроцитов Tc(a + ), из которых первые три гемолизировались in vivo в день проведения трансфузии.

Попытки оценить клиническое значение антител Cromer с помощью экспериментальных тестов in vivo и in vitro не дали однозначных результатов.

Smith и соавт. [90], Leatherbarrow и соавт. [45] и другие авторы [4, 9, 23, 66, 79, 84, 86, 107,] сделали вывод об отсутствии клинического значения антигенов

иантител этой системы.

Вдругих случаях были получены данные, свидетельствующие о способности антител Cromer уменьшать продолжительность циркуляции перелитых эри-

троцитов [1, 7, 27, 38, 39, 43, 59, 79, 83, 105].

ПривведенииэритроцитовIFC +реципиенту,имевшемуанти-IFC-антитела,отме- чалосьследующее.Водномслучаечерезсуткипослеинъекциивкровотокесохранилось38 %эритроцитов(Walthersисоавт.[105]),вдругомслучаенаблюдалиисчезно- вениеIFC-несовместимыхэритроцитовчерез15минпослевведения(Daniels[15]).

Антитела анти-Tc a IgG1, IgG2 и IgG4 проявляли себя как клинически значимые при испытании в монослое моноцитов. Через 2 года антитела того же лица содержали только IgG2 и IgG4 и не проявляли себя in vitro как клинически зна-

чимые (Anderson и соавт. [1]).

Трансплантация почки от донора Dr(a + ) реципиенту Dr(a −), имевшему анти- Dr a-антитела IgG2 и IgG4, была успешной: приживление трансплантата и его

815