Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

индивидуальную совместимость перед гемотрансфузией (Clark, Dorman [14]). Антитела анти-Ls a в одном случае сопровождали ГБН, потребовавшую для лечения обменного переливания крови, однако их причинная роль в ГБН осталась недоказаной (Sistonen [113]). Один образец анти-Ls a найден при скрининге 4000 сывороток европеоидов (Kornstad и соавт. [51], Race, Sanger [90]). При обследовании 44 000 доноров японцев найдено 19 образцов сывороток с антителами анти-Ls a (Onodera и соавт. [82]).

Таблица 20.5

Распределение редких антигенов Gerbich у разных народов

Антиген Ls a чувствителен к действию трипсина, но устойчив к фицину и сиалидазе (Macdonald и соавт. [59]). Ассоциация фактора Ls a с системой Gerbich установлена по наличию на эритроцитах лиц Ls(a + ) необычных молекул гликофоринов С и D в дополнение к нормальным. Необычные гликофорины имели мол. массу, превышающую на 5,5 кДа мол. массу нормальных гликофоринов С и D (Macdonald и соавт. [59]).

Указанные атипичные гликофорины реагировали с антителами анти-Ge3. Гликофорин GPC.Ls a взаимодействовал с МКА анти-Ge4 и связывал антитела анти-Ge2.

У лиц Ls(a + ) выявлена дупликация экзона 3 гена GYPC. Присутствие второго экзона 3 объясняет повышенное содержание в эритроцитах Ge3 +

791

гликофорина GPC.Ls a и гликофорина GPD.Ls a.

Предполагается, что возникновение фенотипов Ge: −2,3,4 и Ge: −2, −3,4 является результатом кроссинговера участков с делециями в экзонах 2 и 3 (Colin и соавт. [18], High и соавт. [39]). Неравновесный кроссинговер ведет к образованию гена GYPC с удвоением и выпадением отдельных участков экзонов 2 и 3. Удвоение экзона 3 приводит к синтезу необычной аминокислотной последовательности, которую, очевидно, и распознают анти-Ls a-антитела. Синтетический пептид (TPTIMDIVVIA-EPDRG), представляющий собой 11 аминокислот, кодируемых областью 3ʹ экзона 3, и 5 аминокислот, кодируемых областью 5ʹ, ингибировал активность анти-Ls a-антител (Storry и соавт. [119]).

Удвоение экзона 2 не приводило к какой-либо необычной аминокислотной последовательности в гликофорине и не сопровождалось появлением новой антигенной специфичности Gerbich.

Моноклональные антитела к одному из эпитопов гликофорина С (СВС-96) реагировали с эритроцитами Ls(a + ) сильнее и в существенно большем разведении, чем с эритроцитами Ls(a −).

Onodera и соавт. [82], Uchikawa и соавт. [125, 126] исследовали эритроци-

ты 200 000 доноров японцев с помощью МКА анти-СВС-96 и нашли 60 образцов эритроцитов, дававших сильные положительные реакции; 8 из них были Ls(a + ). Среди указанных 8 образцов в 1 образце эритроцитов экспрессия антигена Ls a была особенно высока. Эритроциты содержали необычные гликофорины С и D (GPC.KS и GPD.KS), отличавшиеся от гликофоринов GPС.Ls a и GPD. Ls a большей (на 6 кДа) мол. массой. Молекулярно-генетическое исследование показало утроение экзона 3 гена GYPC. У 40 (0,02 %) лиц выявлено удвоение экзона 2 GYPC вследствие неравновесного кроссинговера. В отдельных случаях кроссинговер сопровождался делецией части экзона 2, что обусловливало возникновение фенотипа Ge: −2, 3, 4. У 6 (0,003 %) лиц указанные выше авторы выявили учетверение экзона 2, которое, как и ожидали авторы, не сопровождалось появлением качественно новых антигенов Gerbich (High и соавт. [39]).

Ana

Редкий антиген An a (Ahonen) описан Furuhjelm и соавт. [34]. Его частота составляет 0,06 % среди финнов и шведов. Антитела анти-An a имели естественное происхождение и встречались с частотой 1 : 1000 среди здоровых лиц

(Furuhjelm и соавт. [34]).

АнтигенAn a разрушался под воздействием трипсина, папаина и сиалидазы. Daniels и соавт. [28] посредством иммуноблоттинга с выделенными из эритроцитов An(a + ) гликофоринами показали, что антиген An a располагается в гликофорине D, а в гликофорине С он отсутствует. При анализе кДНК 2 лиц An(a + ) выявлена нуклеотидная замена G 67 T в экзоне 2. Данная мутация приводила к замене аланина на серин в позиции 23 гликофорина С и позиции 2 гликофорина D. Результаты титрования анти-Ge2-антител с использованием

792

эритроцитов An(a + ) и An(a −) указывали на то, что гликофорин GPD.An a вариабелен. Некоторые образцы анти-Ge2-антител с ним не реагировали.

Dha

Антитела анти-Dh a обнаружили Jorgensen и соавт. [45] у датчанина при проведении пробы на индивидуальную совместимость перед гемотрансфузией. Антитела относились к IgM и, судя по анамнезу реципиента, имели естественное происхождение. Вскоре найдены еще 2 донора, имевших анти- Dh a-антитела, что позволило Spring и соавт. [117] обследовать три поколения одной английской семьи и выявить 8 человек Dh(a + ).

Антиген Dh a оказался устойчив к действию химотрипсина. Обработка эритроцитов трипсином, фицином, папаином, проназой и сиалидазой его разруша-

ла (Jorgensen и соавт. [45], Spring и соавт. [117]).

Посредством иммуноблоттинга с использованием специфических антител и гликофорина, выделенного из эритроцитов, показано, что антигенные детерминанты Dh a расположены на гликофорине С. На гликофорине D антиген Dh a отсутствует, поскольку контролирующий его кодон расположен вне участка, обеспечивающего синтез гликофорина D (Spring [118]).

При обследовании 2 сибсов Dh(a + ) с использованием молекулярногенетических методов выявлена нуклеотидная замена С 40 Т в экзоне 1 гена GYPC и соответственно замещение лейцина на фенилаланин в позиции 14 (King

и соавт. [46]).

Антиген Dh a не разрушался эндогликозидазой F и не был N-гликозилирован в позиции 8, которую занимает аспарагиновая кислота (Spring [118]). Тот факт, что антиген Dh a чувствителен к сиалидазе, дал основание полагать, что для формирования эпитопов Dh a необходимо О-гликозилирование гликофорина С. Искусственно сконструированный пептид NSTAWPFSLEPNPG, повторяющий последовательность 8–21 гликофорина GPC.Dh a, специфически ингибировал анти-Dh a-антитела (Storry и соавт. [119]).

GEIS

В 2004 г. появилось краткое сообщение Yabe и соавт. [130] о выявлении у японской женщины антител к редко встречающемуся антигену – IS. Авторы установили, что антитела открывают эпитопы, расположенные на гликофоринах С и D. Экспрессия антигена была обусловлена заменой треонина на аспарагин в положении 32 гликофорина С и позиции 11 глифокорина D. Указанная мутация явилась результатом замещения С 95 А. Антиген обнаружен только у японцев. Его частота менее 0,1 %. В 2004 г. указанный антиген включен в систему

Gerbich с обозначением GEIS (GE9).

793

Антитела Gerbich

Чаще антитела к антигенов системы Gerbich выявляли у лиц, имевших беременности и гемотрансфузии (Race, Sanger [90]), описаны также антитела естественного происхождения (Booth, McLouglin [11], Loirat и соавт. [58], McLouglin, Rogers [66], Okubo и соавт. [81]) и аутоиммунного (Gottsche и соавт. [35], Poole и соавт. [89], Reynolds и соавт. [105], Sererat и соавт. [109], Shulman и соавт. [111]).

Чаще встречаются анти-Ge2-антитела. Они образуются у лиц Ge: −2, 3, 4, Ge: −2, −3, 4 и Ge: −2, −3, −4.

Из 17 образцов антител, выявленных у лиц Ge: −2, −3,4, 13 имели специфич-

ность анти-Ge2, 4 – анти-Ge3 (Daniels [25]).

Из 6 обладателей фенотипа Leach (Ge: −2, −3, −4) анти-Ge2-антитела имели 4

человека, анти-Ge3 – 1, анти-Ge4 – 1 (Anstee и соавт. [5], Daniels и соавт. [30], McShane, Chung [67], Reid и соавт. [98], Rountree и соавт. [107]).

Среди 664 обследованных меланезийцев Ge − 38 (13 %) имели анти-Ge- антитела, причем число мужчин и женщин среди них было примерно одинаковым (Booth, McLouglin [11]). Некоторые образцы антител были IgM, большин-

ство относилось к IgG, главным образом к IgG1 (Vengelen-Tyler, Morel [127]).

В некоторых публикациях анти-Ge-антитела идентифицировали как антиGe1, 2 и как анти-Ge:1, 2, 3, однако адсорбция эритроцитами Ge:–2, 3, 4 полностью истощала эти антитела, в том числе сущеественно убывала анти-Ge2- активность (Booth и соавт. [10, 11]).

McShane и Chung [67] нашли аллоиммунные анти-Ge4-антитела у сенсибилизированной женщины с фенотипом Ge: −2, −3, −4, Leach.

Daniels и соавт. [29] выявили анти-Ge4-антитела в сыворотке крови больного с транзиторным дефицитом гликофорина С.

Получен ряд серий МКА, специфичность которых в серологических реакци-

ях соответствовала анти-Ge4 (Anderson и соавт. [3],Anstee и соавт. [4, 5], Dahr и соавт. [21], Daniels и соавт. [26], Smythe и соавт. [115], Telen и соавт. [123]).

Антитела Gerbich регистрировали на эритроцитах новорожденных, у которых прямая антиглобулиновая проба была положительной. Их удавалось элюировать. Вместе с тем они не вызывали клинически выраженной ГБН, хотя в ряде случаев относились к субклассу IgG3 и положительно реагировали в тестах с монослоем моноцитов (Peddle и соавт. [87], Reid и соавт. [91], Miller и со-

авт. [68], Rosenfield и соавт. [106], Sacks и соавт. [108]).

У больного Ge: −2, −3, 4, имевшего анти-Ge-антитела, после переливания трех доз серологически несовместимых эритроцитов наблюдалась желтуха, продолжительность циркуляции перелитых эритроцитов была уменьшена (Smart и соавт. [114]). Другому больному, имевшему анти-Ge2-антитела, перелили 16 доз несовместимых эритроцитов. Через 3 недели после гемотрансфузий признаков гемолиза in vivo не наблюдали (Mochizuki и соавт. [69]).

Проверка приживаемости несовместимых эритроцитов in vivo в большинстве

794

случаев показала, что антитела Gerbich не относятся к трансфузионно опасным

(DiNapoliисоавт.[31],Nanceисоавт.[76],Pearsonисоавт.[86],Tilleyисоавт.[124]).

Один образец анти-Ge-антител реагировал с эритроцитами Rhnull,  −D − и некоторыми из других вариантов Rh-Hr (Issitt и соавт. [41]).

Описаны аутоантитела Gerbich. В 4 случаях они вызвали тяжелую форму аутоиммунной гемолитической анемии. В 3 из них аутоантитела имели анти-Ge2-

специфичность(Gottscheисоавт.[35],Reynoldsисоавт.[105],Sereratисоавт.[109]),в

одном–анти-Ge3(Shulmanисоавт.[111]).Водномслучаеаутоантителаотносилиськ

IgA(Gottscheисоавт.[35]),вдругом–кIgM(Sereratисоавт.[109]).Уодногобольно-

го Ge + с наличием аутоантител анти-Ge2 прямой антиглобулиновый тест был отрицательным, аутоантитела выявлялись только после их элюции с эритроцитов (Poole и соавт. [89]). Методом иммуноблоттинга с двумя образцами аутоантител анти-Ge2 было показано, что они взаимодействуют только с гликофорином С. Это отличает их отбольшинствааллоиммунныхантителтойжеспецифичности,которыереагируютс эпитопамиGe2нагликофоринеD(Pooleисоавт.[89],Reidисоавт.[104]).Убольных, имевшихаутоантителаанти-Ge2,экспрессияантигенаGe2быласнижена.

Аутоантитела анти-Ge3 в иммуноблоттинге взаимодействовали с гликофоринами обоих типов и по этому свойству имели сходство с аллоиммунными анти- Ge3-антителами (Reid и соавт. [104]).

Обнаружены аутоантитела с анти-Ge4-подобной специфичностью у пациентки Ge:2, 3, 4, страдавшей апластической анемией. Эритроциты больной имели эллипсоидную форму. Аутоантитела не вызывали гемолиза in vivo (Beattie, Sigmund [7],Danielsисоавт.[29]).ОниреагировалисгликофоринамиGPC,GPC.GeиGPC. Yus, с гликофорином D не реагировали (Daniels и соавт. [29]). Количество гликофорина С в эритроцитах было снижено, гликофорина D – нормальное. Через 2 года аутоантитела исчезли, содержание глифорина С в эритроцитах нормализовалось, эллиптоцитоз не наблюдался. Тем не менее сыворотки из ранее полученных проб продолжали реагировать с эритроцитами женщины (Daniels и соавт. [29]).

Описан необычный случай, когда у больной женщины были найдены анти- Ge2-антитела, при этом ее эритроциты агглютинировались двадцатью образцами аллоиммунных сывороток анти-Ge2, двумя сыворотками, содержавшими аутоантитела анти-Ge2, четырьмя сыворотками анти-Ge3 и одной сывороткой анти-Ge4. Эритроциты больной не реагировали с собственной сывороткой, одной сывороткой анти-Ge2, одной сывороткой анти-Ge3 и одной сывороткой, содержавшей аутоантитела анти-Ge4. Эритроциты больной содержали гликофорины С, D и GPC. Ge. С помощью молекулярно-генетических методов было показано, что больная имела два очень редких гена GYPC. Один из них (GPC.Ge-подобный) кодировал гликофоринGPC.Ge,другойимелмутациюА173Твэкзоне3.Мутацияприводила к замене аспарагина на валин в позиции 58 гликофорина С и в позиции 37 гликофорина D. Антитела, выявленные у больной, реагировали с гликофорином С, имеющим аспарагиновую кислоту в положении 58. С гликофорином, имеющим в этой позиции валин, антитела больной не реагировали (King и соавт. [49]).

795