Руководство по клинической микробиологии
16.Вынос из лаборатории оборудования, лабораторной или хозяйственной посуды, реактивов, инструментов и другого производится только после их дезинфекции и с разрешения руководителя лаборатории.
17.В «заразной» зоне лаборатории не допускается:
–оставлять после окончания работы на рабочих местах нефиксированные мазки или посуду с ПБА;
–пипетировать ртом, переливать жидкий инфекционный материал через край сосуда (пробирки, колбы, флакона и др.);
–хранить верхнюю одежду, головные уборы, обувь, зонты, хозяйственные сумки, косметику и прочее, а также продукты питания;
–курить, пить воду;
–оставлять рабочее место во время выполнения любого вида работ с ПБА;
–сливать жидкие отходы (инфицированные жидкости, исследуемый материал и т.д.) в канализацию без предварительного обеззараживания;
–удалять необеззараженные сгустки крови из пробирок, флаконов вытряхиванием.
18. Перенос материала для обеззараживания внутри подразделения проводится в специальных емкостях (баках, биксах, ведрах с крышками).
19. Текущая уборка помещений проводится ежедневно влажным способом после окончания рабочего дня: в «чистой» зоне лаборатории
сприменением моющих средств, в «заразной» зоне с применением дезинфектантов.
20. В боксированных помещениях проводится еженедельная генеральная уборка с применением дезинфицирующих средств. Поверхности в помещениях, аппараты, приборы протирают дезинфицирующим раствором, стены обрабатывают на высоту до 2 м. После влажной уборки включают бактерицидные лампы. Эксплуатация бактерицидных облучателей должна осуществляться в соответствии с действующими нормативно-методическими документами по использованию ультрафиолетового облучения для воздуха помещений, утвержденными в установленном порядке. Стеклянные поверхности бактерицидных ламп следует протирать через час после ее отключения ветошью, смоченной спиртом, не реже – одного раза в неделю.
16
Глава 1. Организация работ с возбудителями инфекционных и инвазивных заболеваний человека
21.Уборочный инвентарь должен быть промаркирован отдельно для «чистой» и «заразной» зон. Перенос его из одной зоны в другую не допускается.
22.По окончании работ медицинский персонал должен обработать руки дезинфицирующим раствором или 70%-м спиртом с последующим мытьем с мылом. Допускается использование кожных антисептиков в соответствии с инструкциями по применению.
Санитарно-эпидемиологический надзор за выполнением требований санитарных правил в лабораториях, работающих с ПБА, осуществляют территориальные органы Федеральной службы по надзору
всфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Текущий контроль выполнения требований санитарных правил
осуществляется руководителем лаборатории или лицом, назначенным приказом по организации.
ГЛАВА 2. НОРМАЛЬНАЯ МИКРОФЛОРА ОРГАНИЗМА ЧЕЛОВЕКА И ДИСБАКТЕРИОЗ
2.1. Нормальная микрофлора организма человека
Организм человека – сложнейший «надорганизм». «Метагеном» этого суперорганизма состоит из генов собственно Homo sapiens и генов присутствующих микроорганизмов, колонизирующих его тело.
Нормальная микрофлора здорового человека выступает как единое целое (своеобразный экстракорпоральный орган), согласованно работающий в интересах всей системы организма хозяина, в котором она локализована.
Ворганизме человека присутствуют более квадриллиона микроорганизмов, что в 100 раз превышает число соматических клеток человека.
Человек по количеству соответствующих клеток больше прокариотический (более 90%), чем эукариотический организм (менее 10%) организм.
Вдезоксирибонуклеиновой кислоте (ДНК) человека идентифицировано 23 тыс., в микробиоте – 3,5−10 млн генов. Количество видов бактерий, обнаруживаемых у этого суперорганизма, колеблется от 2,5 до 10 тыс. В фекалиях человека выявлено также порядка 1200 вирусных генотипов. Многие хромосомные гены человека (более 80%) имеют микробное происхождение.
Нормальная микрофлора присутствует в организме человека в виде фиксированных к определенным рецепторам микроколоний бактерий, заключенных в биопленку, представляющую собой, помимо микроколоний микроорганизмов, экзополисахариды различного состава микробногопроисхожденияимуцин,образуемыйбокаловиднымиклеткамислизистых.Благодаряналичиювбиопленкесложнойиразветвлен-
18
Глава 2. Нормальная микрофлора организма человека и дисбактериоз
ной системы кооперации между многочисленными и разнообразными микробными популяциями, любой попадающий естественным путем в организм субстрат в результате микробной трансформации превращается через каскад реакций в конечный или промежуточный продукт с той или иной биологической или фармакологической активностью.
Нормальную микробиоту рассматривают как совокупность множества микроорганизмов, характеризующихся определенным составом
изанимающих тот или иной биотоп в организме человека.
Влюбом микробиоцинозе различают постоянно встречающиеся виды (автохтонная флора) и добавочные виды (аллохтонная флора). Количество постоянных видов относительно невелико, зато численно они всегда представлены наиболее обильно.
Уже с первых мгновений появления ребенка на свет кожа и слизистые оболочки человека обсеменяются микроорганизмами, число и разнообразие которых определяются генетической предрасположенностью, составом микрофлоры матери, механизмами родов, санитарным состоянием среды, в которых они проходили и типом вскармливания.
К настоящему времени выявлены некоторые общие закономерности заселения желудочно-кишечного тракта человека микроорганизмами. Установлено, что в первые часы и дни в кишечнике новорожденных встречаются преимущественно микрококки, стафилококки, энтерококки и клостридии. Впоследствии появляются энтеробактерии (кишечные палочки), лактобациллы и бифидобактерии. Первые микроорганизмы, обнаруживаемые у новорожденных, не обязательно те, которые доминируют в фекальной и вагинальной флоре матери. Со временем в кишечнике появляются, а затем начинают преобладать неспороносные облигатно-анаэробные бактерии (бифидобактерии, эубактерии, бактероиды, стрептококки, клостридии, спириллы и др.). Для того чтобы микробная экология пищеварительного тракта новорожденных по своему составу приблизилась к таковой у взрослых, требуется несколько лет. Основу нормальной микрофлоры кожи и поверхности мукозных мембран составляют анаэробные микроорганизмы. В полости рта встречаются более 300 видов микроорганизмов. Их количество в слюне достигает 109 колониеобразующих единиц (КОЕ) на 1 мл, а соотношение анаэробов и аэробов составляет 1 : 10. В соско-
бах с гингивы концентрация бактерий может составлять 1012 КОЕ на 1 г, при этом указанное соотношение сдвигается и становится 1000 : 1. Микроорганизмы в верхнем отделе кишечника отличаются по составу
19
Руководство по клинической микробиологии
от таковых нижнего отдела. В желудке и тонкой кишке микрофлора отражает таковую полости рта, и их концентрация не превышает в норме 105 КОЕ на 1 г кишечного содержимого. Особенно обильна микрофлора толстого кишечника, где содержание бактерий достигает 1012–13 КОЕ на 1 г содержимого (суммарно в кишечнике взрослого человека находится более 1,5 кг микроорганизмов). Число анаэробных микроорганизмов в 100–1000 раз превышает таковое аэробных бактерий. Количество анаэробных микроорганизмов, присутствующих в женских гениталиях, достигает 108 КОЕ на 1 г, что более чем в 10 раз превышает число обнаруживаемых в этой области аэробных бактерий. В глубоких слоях кожи анаэробные бактерии также присутствуют в преобладающем количестве.
Состав микробиоты различается в зависимости от исследуемого биотопа, даже в одном биотопе он может меняться в различных условиях жизни или состоянии организма.
Общее количество видов бактерий, обнаруживаемых в пищеварительном тракте человека, колеблется от 10 до 30 тыс., штаммов – до 70 тыс. Среди доминирующих видов бактерий (160–300) лишь 18 обнаруживается у всех лиц, 75 – у 50%, 57 видов обнаруживается у 90% лиц; видовой состав относительно стабилен у конкретного человека и имеет выраженный индивидуальный характер как на видовом, так и в особенности на штаммовом уровне (различия среди штаммов могут достигать 25% и более их генома). Содержание бактерий (КОЕ/г) и количество видов между отдельными индивидуумами может различаться в 12–2200 раз. Только представители 700–1000 видов кишечных бактерий могут быть культивированы. Преобладают представители групп
Cytophaga-Flavobacterium-Bacteroides (род Bacteroides) и Firmicutes
(прежде всего роды Clostridium и Eubacterium); каждая из перечисленных групп составляет до 30–40% всех обнаруживаемых в фекалиях и на слизистых толстого кишечника микроорганизмов. За ними следуют
Actinobacteria, Proteobacteria, Fusobacteria, Cyanobacteria. У многих взрослых людей в толстой кишке присутствуют значительные количества метанообразующих или окисляющих метан Archaea.
Большие популяции резидентных микроорганизмов вовлечены в рост и развитие организма хозяина, влияют практически на все его физиологические функции, иммунные, метаболические, поведенческие и регуляторные реакции и ответы, продуцируют разнообразные сигналы, которые определяют его здоровье, начиная от антенатального периода до глубокой старости.
20