Руководство по клинической микробиологии
ганизмами и развивающийся, как правило, на фоне иммунодефицитного состояния макроорганизма.
Возбудители оппортунистических инфекций – это микроорганизмы авирулентные или со слабо выраженными факторами вирулентности; при нарушении механизмов защиты у хозяина они вызывают инфекционную болезнь. Возбудители оппортунистических инфекций не имеют строго выраженного органного тропизма: один и тот же возбудитель может быть причиной развития многих нозологических форм болезни, и одна и та же нозологическая форма может быть вызвана несколькими условно-патогенными микроорганизмами.
Особенности оппортунистических инфекций:
−клиническаякартинаоппортунистическихинфекцийв большей мере зависит от пораженной системы органов, чем от возбудителя;
−оппортунистические инфекции часто вызываются ассоциацией микроорганизмов и протекают как микст-инфекция;
−при оппортунистической инфекции выражена тенденция к генерализации инфекционного процесса;
−группа риска возникновения оппортунистических инфекций – иммунокомпрометированные хозяева; больные, которым назначены инвазивные методы диагностики и лечения;
−трудности в лечении оппортунистических инфекций связаны с широким распространением лекарственной устойчивости к химиотерапевтическим препаратам.
Факторы, сопутствующие развитию оппортунистических инфек-
ций:
−врожденные или приобретенные нарушения иммунитета;
−оперативные вмешательства, инвазивные методы лечения и диагностики;
−пластичность генома у бактерий;
−нерациональная антибиотикотерапия, приводящая к формированию антибиотикорезистентности микроорганизмов и полирезистентности у госпитальных штаммов возбудителей.
Методы исследования авторы не сочили необходимым повторять после каждой нозологической формы, а дают в обобщенном виде:
– бактериологический посев материала на плотные и жидкие питательный среды с дальнейшей биохимической идентификацией;
– иммуносерологические методы – реакция пассивной гемагглютинации, реакция связывания комплемента, реакция непрямой гемаг-
6
Введение
глютинации, реакция торможения пассивной гемагглютинации, иммуноферментный анализ, иммунохроматографический анализ;
–молекулярно-генетические методы – полимеразная цепная реакция и другие;
–паразитологические методы исследования;
–микологические методы исследования;
–вирусологические методы исследования.
Следует указать, что одни и те же возбудители инфекции и инвазии способны поражать ряд органов и систем органов человека, поэтому повторение излагаемого материала присутствует в определенной степени в различных главах. Авторы считают целесообразным такое преподнесение материала для удобства читателей.
Авторы с благодарностью воспримут замечания для исправлений в последующих переизданиях руководства.
ГЛАВА 1. ОРГАНИЗАЦИЯ РАБОТ
СВОЗБУДИТЕЛЯМИ ИНФЕКЦИОННЫХ
ИИНВАЗИВНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЧЕЛОВЕКА
1.1. Общие требования к работе микробиологической лаборатории
Работу с патогенными биологическими агентами (ПБА) проводят в микробиологических лабораториях различного уровня, направленности и ведомственной принадлежности. В число ПБА входят патогенные и условно-патогенные для человека микроорганизмы (бактерии, вирусы, риккетсии, простейшие, грибы, микоплазмы,хламидии, гельминты) включая генно-инженерно-модифицированные, яды биологического происхождения (токсины), а также любые объекты и материалы, зараженные или подозрительные на заражение перечисленными агентами.
Исследования различного материала от людей на наличие ПБА бактериальной природы, риккетсий, хламидий, некоторых грибов и простейших осуществляют в диагностических бактериологических лабораториях. В вирусологических лабораториях проводят исследования по обнаружению ПБА вирусной природы. В задачи паразитологических лабораторий входят выявление и идентификация гельминтов и простейших. В микологических лабораториях проводят работу с материалом, подозрительным на зараженность грибами.
В Российской Федерации принята классификация патогенных для человека микроорганизмов, согласно которой ПБА по степени биологической опасности разделены на четыре группы:
–I группа – возбудители особо опасных инфекционных болезней;
–II группа – возбудители высоко контагиозных эпидемических заболеваний человека;
–III группа – возбудители инфекционных болезней;
8
Глава 1. Организация работ с возбудителями инфекционных и инвазивных заболеваний человека
–IV группа – патогенные микроорганизмы возбудители оппортунистических инфекций.
Главной составляющей в повседневной работе микробиологических лабораторий независимо от направленности и ведомственной принадлежности является соблюдение правил биологической безопасности. В Российской Федерации для обеспечения биологической безопасности разработана и внедрена нормативная правовая база. Требования биологической безопасности при работе с ПБА регламентированы санитарно-эпидемиологическими правилами, которые введены в
действие постановлением Главного государственного санитарного врача Российской Федерации и другими нормативно-методическими документами по организации и проведению лабораторной диагностики инфекционных болезней:
–СП «Безопасность работы с микроорганизмами I–II групп патогенности (опасности)»;
–санитарно-эпидемиологические правила «Безопасность работы
смикроорганизмами III–IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней»;
–санитарно-эпидемиологические правила «Порядок выдачи са- нитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека I–IV групп патогенности (опасности), генно-инженерно-модифицированными микроорганизмами,ядамибиологическогопроисхожденияигельминтами»;
–санитарно-эпидемиологические правила «Порядок учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I–IV групп патогенности»;
–методические указания «Организация работы при исследованиях методом ПЦР материала, инфицированного патогенными биологическими агентами I–IV групп патогенности».
–методические указания по лабораторной диагностике соответствующих нозологий.
В соответствии с этими документами микробиологические лаборатории должны иметь разрешительные документы на проведение исследований с возбудителями инфекционных заболеваний:
–санитарно-эпидемиологическое заключение о возможности проведения работ с микроорганизмами I–IV групп патогенности;
–лицензию на деятельность, связанную с использованием ПБА
I–IV групп.
9
Руководство по клинической микробиологии
Санитарно-эпидемиологическое заключение о возможности проведения в лабораториях работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека I–II групп патогенности выдает Главный государственный санитарный врач Российской Федерации. Санитарно-эпидемиоло- гическое заключение о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека III–IV групп патогенности выдает главный санитарный врач субъекта Российской Федерации.
Лицензиюнадеятельность,связаннуюсиспользованиемвозбудителей инфекционных заболеваний человека, выдают органы Росздравнадзора при наличии санитарно-эпидемиологического заключения.
Ворганизациях, на базе которых проводятся любые виды работ с ПБА, создаются комиссии по контролю соблюдения требований биологической безопасности. Каждый сотрудник лаборатории несет личную ответственность за соблюдение требований биологической безопасности. Ответственным за обеспечение биологической безопасности в лаборатории является заведующий лабораторией.
Вмикробиологических лабораториях должна быть разработана, внедрена и поддерживаться система менеджмента качества исследований, которая устанавливает организационные и административные процедуры, распределение ответственности и полномочий, кадровый состав, ресурсы, рабочие методы проведения исследований и их контроль.
1.2.Требования к помещениям микробиологических лабораторий, осуществляющим работы
с микроорганизмами III–IV групп патогенности
1.Лаборатории, работающие с ПБА, должны располагаться в отдельно стоящем здании или изолированной его части. Размещение микробиологических лабораторий в жилых зданиях запрещается.
2.Диагностические лаборатории должны иметь два входа: один для сотрудников, другой для доставки материала на исследование (возможно получение материала через передаточное окно).
3.Лаборатория должна быть обеспечена искусственным и естественным освещением, водопроводом, канализацией, электричеством, отоплением и вентиляцией.
10