Диагноз бешенство считается установленным, если в нескольких полях зрения микроскопа в исследуемом препарате обнаруживают типичные желтовато-зеленые гранулы. При этом в контрольных препаратах подобных образований быть не должно ГОСТ 26075-2013. Методы лабораторной диагностики бешенства.[Электронный ресурс]. Режим доступа- https://allgosts.ru/11/220/gost_26075-2013. Дата обращения (11.05.19).
Метод иммуноферментного анализа (ИФА)
В основе ИФА лежит специфическое взаимодействие антигена вируса бешенства с антителом, иммобилизованным на твердом носителе. Связанный антиген выявляется с помощью второго антирабического антитела, меченного пероксидазой, продукт реакции которой окрашивается при добавлении хромогена. Интенсивность окрашивания продукта реакции прямо пропорциональна количеству антигена. Учет реакции проводят визуально или на сканирующем спектрофотометре в соответствии с инструкцией по применению набора.
Серологический метод
Реакция диффузионной преципитации (РДП).
Метод, основанный на способности антител и вирусного антигена бешенства диффундировать в агаровом геле и при специфическом взаимодействии образовывать комплекс «антиген-антитело», наблюдаемый в виде линии преципитации. Реакция применяется для обнаружения специфического рабического антигена в неконсервированном головном мозге животных, павших от уличного бешенства, а также у животных, на которых ставилась биопроба. Для реакции можно использовать несвежий (до 1 мес.) головной мозг.
Готовые разведения антирабической сыворотки вносят в приготовленные лунки в агаровом геле. Чашки Петри помещают в термостат при 37±1°С на 48 часов. Реакцию считают положительной при появлении одной или 2-3 линий преципитации любой интенсивности между лунками, содержащими суспензию мозга и антирабический гамма-глобулин. Отрицательный результат подтверждается другими методами.
При отрицательных показаниях реакции преципитации ставят биопробу.
Реакция иммунофлуоресценции:
Сущность данного метода заключается в соединении меченых антител со специфическим антигеном с образованием светящихся комплексов антиген-антитело. При положительных результатах исследования в препаратах обнаруживают разной величины и формы светящиеся желто-зеленым цветом гранулы в нейронах и вне клеток. Размер их колеблется от едва заметных в виде песчинок образований до 15 - 20 мм. Непораженная вирусом бешенства мозговая ткань светится серовато-желтым цветом. Чувствительность метода по различным данным составляет 98-100%. РИФ часто ставят параллельно с биопробой на мышах.
4. Биопрепараты
К настоящему времени в предупреждении бешенства наиболее эффективными и безопасными признаны культуральные антирабические вакцины (КАВ), полученные на основе клеточных культур или куриных эмбрионов. Вакцины, для производства которых используют нервные ткани животных, обладают меньшей иммуногенностью, чем КАВ, и вызывают сильные побочные эффекты. В связи с этим Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) не рекомендует их производство и применение Вакцины против бешенства: современное состояние и перспективы развития. молекулярная биология, 2015, том 49, № 4, с. 578.
Рекомендованы к применению и зарегистрированы в Государственном Реестре следующие отечественные и зарубежные вакцины:
1) Вакцина антирабическая, инактивированная, сухая, культуральная из штамма Щелково-51. КРС, МРС, лошадям, собакам, кошкам вакцину вводят подкожно, свиньям - внутримышечно. Для профилактической иммунизации животных, прививаемых против бешенства впервые, вакцину вводят двукратно. Животным, ранее привитым против бешенства, вакцину вводят однократно. Ревакцинацию проводят однократно через два года. Иммунитет сохраняется не менее двух лет. Лошадей, свиней, крупный и мелкий рогатый скот, кошек прививают с трехмесячного возраста, собак с двухмесячного возраста. Вынужденную вакцинацию проводят не позднее 48 часов после возможного инфицирования животного. Вакцину вводят животным трехкратно в дозах, указанных в наставлении, с интервалом 7 и 14 дней. Животным, подозрительным по заболеванию бешенством, вакцину вводить запрещается.
2) Вакцина антирабическая, из штамма Щелково-51, инактивированная, жидкая, культуральная (Рабиков). Профилактическую иммунизацию животных проводят подкожно, однократно, с последующей ревакцинацией через год и в дальнейшем через каждые два года. Вакцина предназначена для крупного и мелкого рогатого скота, лошадей. Вакцину вводят животным, начиная с трехмесячного возраста, в дозах, рекомендованных в наставлении по применению. Вынужденную вакцинацию проводят не позже 48 часов после возможного инфицирования животных. Вакцину вводят двукратно с интервалом в 14 дней согласно наставлению по применению. Животным, подозрительным по заболеванию бешенством, вакцину вводить запрещается.
3) Вакцина антирабическая, инактивированная, жидкая, культуральная (ВНИИЗЖ) предназначена для проведения профилактической и вынужденной вакцинации сельскохозяйственных животных, собак и кошек. Профилактическую иммунизацию животных против бешенства проводят однократно с последующей ревакцинацией через год. Животным, ранее прививавшимся против бешенства, вакцинацию проводят один раз в год. Вынужденную вакцинацию проводят не позже 48 часов после возможного инфицирования животного. Вакцину вводят двукратно с интервалом 7 суток.
4) Вакцина антирабическая, инактивированная, культуральная, сорбированная (ВНИИВВиМ) безвредна для всех видов домашних и сельскохозяйственных животных при внутримышечном введении. Иммунизации подлежат только клинически здоровые животные с двухмесячного возраста. Противопоказаний к применению вакцины нет.
5) Вакцина «Рабизин (Rabisin-R)» предназначена для иммунизации сельскохозяйственных, диких и домашних животных против бешенства. Собаки, кошки, хищные: первая вакцинация в возрасте 3 месяца. Ревакцинация ежегодно. Лошадей прививают в 6 месяцев, далее ежегодно. Если младше 6 месяцев родившиеся от вакцинированных кобыл прививают в 4 месяца, ревакцинация через месяц поле первой прививки, далее ежегодно; родившиеся от не вакцинированных кобыл прививают в 2 месяца, далее ежегодно. КРС, МРС, северные олени вакцинируют в 9 месяцев, ревакцинация ежегодно, ели младше 9 месяцев, родившиеся от вакцинированных животных прививают в 4 месяца, ревакцинация между 9- ю и 12-ю месяцами, далее ежегодно. Родившиеся от не вакцинированных животных прививают в 2 месяца, далее ежегодно.
5. Ветеринарно-санитарная экспертиза
При установлении у животных бешенства убой на мясо запрещен. Если бешенство установлено во время убоя и разделки туш, то все продукты убоя подлежат уничтожению сжиганием Правила ветеринарного осмотра убойных животных и ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясных продуктов. [Электронный ресурс]. Режим доступа- https://www.fsvps.ru/fsvps/laws/1107.html#3. Дата обращения (11.05.19).
Убойных животных, покусанных бешенными животными, но не имеющих клинических признаков заболевания, разрешается убивать непосредственно в хозяйстве. Места укуса зачищают и уничтожают, а ВСЭ продуктов убоя проводят на общих основаниях.
Животных, привитых против бешенства антирабической вакциной, разрешается убивать на мясо спустя 3 месяца после вакцинации. Дезинфекцию помещения, где находились больные животные, а также оборудования проводят горячим 10% раствором едкого натра или 4% раствором формальдегида. Деревянные предметы ухода и остатки корма сжигают. Загрязненную выделениями больных животных почву перекапывают на глубину 30 см с сухой известью и заливают дезинфицирующим раствором. Работники лаборатории, проводя исследования, должны соблюдать установленные меры предосторожности.
Заключение
Несмотря на то, что в настоящее время хорошо известны основные механизмы распространения бешенства, имеются весьма надежные средства профилактики болезни и разработана стратегия борьбы с инфекцией, впереди еще много работы в интересах повышения эффективности защиты животных и человека от смертельно опасного заболевания.
Важно своевременное выявление больных животных, изоляция подозреваемых в заболевании и заражении. Охрана сельскохозяйственных животных от нападения больных, утилизация трупов.
С целью профилактики "дикого бешенства" - отлов, отстрел, дегазация нор, пероральная иммунизация, аэрозольная иммунизация летучих мышей в пещерах, иммунизация крупного рогатого скота.
Вследствие этого основными направлениями защиты людей и животных являются контроль и регулирование эпизоотической ситуации, иммунизация животных и людей препаратами и использована методов все более надежных и безопасных.
Список литературы
1. Бешенство: (этиология, патогенез, и профилактика) / Академия медицинских наук СССР, Институт вирусологии им. Д. И. Ивановского; ред.: П. Н. Косякова, Р. М. Шен, Л. П. Горшуновой. -- М.: Государственное издательство медицинской литературы, 1958. -- 218 с.
2. О ситуации по заболеванию бешенством на территории России [Электронный ресурс]. Режим доступа-https://www.rospotrebnadzor.ru/about/info/news/news_details.php?ELEMENT_ID=9963&sphrase_id=1678349. Дата обращения (13. 04. 19)
3. ГОСТ 26075-2013. Методы лабораторной диагностики бешенства.[Электронный ресурс]. Режим доступа- https://allgosts.ru/11/220/gost_26075-2013. Дата обращения (11.05.19)
4. Ведерников В.А., Седов В.А., Ивановский Э.В. Бешенство животных. -М.: Колос, 1974.-12 с
5. Virus Pathogen Database and Analysis Resource (ViPR) - Rhabdoviridae - Genome database with visualization and analysis tools: http://www.viprbrc.org/brc/home.spg?decorator=rhabdo. Дата обращения (19.04.19)
6. Дудников С.А. Количественная эпизоотология: основы прикладной эпидемиологии и биостатистики. - Владимир: Демиург, 2004. - 460 с.
7. Груздев К.Н., Недосеков В.В. Бешенство животных: практическое руководство - М.: Аквариум ЛТД, 2001. - 313 с
8. Инфекционные болезни животных: учеб. пособие / Б.Ф. Бессарабов, А.А. Вашутин, Е.С. Воронин [и др.]. - М.: Колос, 2007.-671 с
9. МУ 3.1.3114/1--13 Организация работы в очагах инфекционных и паразитарных болезней. [Электронный ресурс]. Режим доступа- https://rospotrebnadzor.ru/documents/details.php?ELEMENT_ID=4872. Дата обращения (19.04.19)
10. Белоусова Р.В., Троценко Н.И., Преображенская Э.А. Практикум по ветеринарной вирусологии: учеб. пособие. - 3-е изд., перераб. доп. - М.: КолосС, 2005. - 248 с
11. Вакцины против бешенства: современное состояние и перспективы развития. молекулярная биология, 2015, том 49, № 4, с. 578
12. Правила ветеринарного осмотра убойных животных и ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясных продуктов. [Электронный ресурс]. Режим доступа- https://www.fsvps.ru/fsvps/laws/1107.html#3. Дата обращения (11.05.19)
13. Бешенство. Краткая характеристика заболевания//Ветеринария сельскохозяйственных животных. - 2012. - №3. - 17-25 с.
14. Сюрин В. Н. Вирусные болезни животных - М.: ВНИТИБП, 1998
15. Краткий справочник ветеринарного врача/ Н.М. Алтухов, В.И. Афанасьев, Б.А. Башкиров и др.; М.: Агропромиздат, 1990.
16. Мовсеянц А.А. Современные проблемы бешенства. Ветеринарные и медицинские аспекты зооантропонозов. 2003.
17. Шевелев А. С., Николаева Р. Ф. Последний подвиг Пастера. -- М.: Медицина, 1988. -- 112 с.
Приложение
Направление
В____________________________________________ветеринарную лабораторию
Адрес:_______________________________________________________________
При этом направляется для _____________________________________________
патологический материал (перечислить какой)_____________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
от ________________________, принадлежащего___________________________
(вид и возраст животного)
_____________________________________________________________________
(название хозяйства, фермы, отделения, фамилия владельца животного)
_____________________________________________________________________
Дата заболевания животного____________________________________________
Дата падежа __________________________________________________________
Клиническая картина___________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
Данные патологического вскрытия_______________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
_____________________________________________________________________
Предположительный диагноз____________________________________________ _____________________________________________________________________
Дата отправки материала_______________________________________________
Материал направил____________________________________________________
____________________________ ____________________________
(Должность) (Ф.И.О.)
Приложение 2
Отметка лаборатории
Дата поступления материала__________
Доставлено проб____________________
Забраковано проб___________________
В _________________________________________ветеринарную лабораторию
Адрес_____________________________________________________________
При этом направляется_____________________проб крови (сыворотки крови)
от_________________________________________________________________
___________________________________________________________________
(вид животного)
___________________________________________________________________
(название, адрес хозяйства, № тел., Ф.И.О. владельца животного)
для_________________________ исследования на ________________________
(вид исследования) (название болезни)
Хозяйство (отделение, бригада, табун, отара, питомник) ___________________
___________________________________________________________________
(благополучное, неблагополучное)
___________________________________________________________________
(вакцинировано, указать вакцину, дату вакцинации)