Материал: 2402

17

Работа 6

Определение площади листьев и их удельной поверхностной плотности Объекты исследования: листья древесных растений.

Оборудование и реактивы: торзионные весы, пробочные свёрла, ножницы, сушильный шкаф.

Ход выполнения работы. Удельная поверхностная плотность листьев (УПП) рассчитывается путём деления сухого веса листьев (Всух) на их площадь (S)

УПП = ж , мг/см2.

УПП характеризует ряд важных физиологических свойств растений. В

частности светолюбие, теневыносливость, ксероморфность,

галлосуккулентность и некоторые другие. Считается, что подавление

фотосинтеза, снижение продуктивности ассимилирующих органов сопровождается снижением величины УПП.

Для определения сухого веса листьев переложить навеску растительного материала в бюксы, записав предварительно их номера. Бюксы поместить в сушильный шкаф при температуре 105 0С на 5 ч. После этого открытые бюксы с навеской листьев или семян перенести в эксикатор для охлаждения.

Повторное взвешивание высушенного растительного материала следует проводить быстро, сразу после его извлечения из эксикатора.

Существует несколько способов определения площади листьев. В тех случаях, когда форма листовой пластинки имеет сложную конфигурацию или листья сильно рассечены, удобнее пользоваться весовым методом. При этом взвешивают сами листья и высечки определенной площади из них. Разделив вес 10 высечек (Вв) на их площадь ^ в ), получаем удельную плотность (УП) 1 см2 живого листа

УП = ш , мг/см2

Зная величину УП, можно найти площадь листьев делением их сухого веса (Всух) на УП

Sл = — , см2

18

Высечки листьев сушат в шкафу при температуре +105 °С в течение 5

часов.

Таким образом, определив сухой вес листьев и площадь, рассчитывают их удельную поверхностную плотность.

Работу проводят в четырёх повторностях по каждому варианту опыта. Результаты обрабатывают статистически и делают соответствующий вывод.

Работа 7 Определение содержания хлорофилла в листьях

Объекты исследования: свежие листья светолюбивых и теневыносливых древесных растений.

Оборудование и реактивы: 80 % ацетон; СаСО3; кварцевый песок или толчёное стекло; весы; ножницы; ступка малого размера; колба Бунзена с пробкой, в которую вставлен стеклянный фильтр № 2 или № 3; насос Камовского; стеклянная палочка; мерная колба на 50 мл с пробкой; воронка; фотоэлектрический колориметр или спектрофотометр; калька; вазелин; салфетка.

Ход выполнения работы. Измельчить листья ножницами, отбросив черешки и крупные жилки, и отвесить на куске кальки 300-500 мг.

Поместить навеску в ступку, добавить кварцевого песка или толченого стекла, и немного СаСО3 , прилить 4-5 мл 80 % ацетона и тщательно растереть.

Смазать снизу носик ступки вазелином и слить вытяжку по палочке в воронку со стеклянным фильтром, вставленную в колбу Бунзена, не теряя ни одной капли. Отсосать жидкость насосом. Прилить в ступку еще немного ацетона, растереть, снова слить на фильтр и отсосать. Повторить эту операцию 2-3 раза, затем перенести растертую массу на фильтр.

Сполоснуть ступку 3 раза ацетоном, слить на материал в воронку, дать постоять несколько минут и отсосать. Промыть материал ацетоном до полного извлечения пигментов (растворитель, стекающий с фильтра, должен стать бесцветным).

Перелить вытяжку в мерную колбу на 50 мл и довести ацетоном до метки, споласкивая колбу Бунзена не менее трех раз небольшими порциями

20

Вычислить процентное содержание хлорофилла в листьях.

Результаты анализов всех объектов, исследованных группой, записать

втаблицу.

Ввыводах сопоставить содержание хлорофилла в разных объектах. При работе на спектрофотометре (кювета 10 мм) можно определить оптическую плотность ацетоновой вытяжки (D) при длине волны 652 HM и вычислить содержание суммы хлорофиллов а и b по формуле

Са+б = 30D652 (МГ/Л).

Более точно содержание отдельных пигментов можно установить с помощью трехволнового метода, определяя оптическую плотность вытяжки при 665, 649 и 440 HM (максимумы поглощения соответственно хлорофилла а, хлорофилла b и каротиноидов).

13

4