D.ROX
E.SYBR Green.
4.Укажите, какие из перечисленных праймеров используются для проведения обратной транскрипции:
A. Рэндом-праймер B. Праймер-проба C. Поли-А-праймер D. Поли-Т-праймер E. Поли-С-праймер
5.Укажите, от чего зависит специфичность ПЦР:
A.От температуры денатурации
B.От времени элонгации
C.От концентрации праймеров в реакционной смеси
D.От нуклеотидной последовательности праймера
E.От количества циклов ПЦР.
6.Укажите, какие ферменты могут использоваться в ПЦР: A. РНК-зависимая ДНК-полимераза
B. ДНК-зависимая ДНК-полимераза C. РНК-зависимая РНК-полимераза D. ревертаза
E. хеликаза
7.Укажите, что представляет собой параметр Ct, используемый при количественной ПЦР:
A. точка перегиба кривой флуоресценции
B. точка пересечения кривой флуоресценции пороговой линии
C. угол наклона кривой флуоресценции в области экспоненциального роста D. величина флуоресценции по завершении ПЦР
E. точка выхода кривой флуоресценции на верхнее плато.
Вопросы для самоконтроля усвоения материала
1)Объясните, почему при проведении ПЦР используют ДНК-полимеразу термофильных бактерий.
2)Изобразите схему амплификации ДНК в ПЦР.
3)В каких случаях необходимо проведение ПЦР с обратной транскрипцией?
4)Чем обусловлен выбор типа затравочного праймера (поли-Т-праймер или рэндом-праймер) при проведении ОТ-ПЦР?
5)Укажите преимущества и недостатки различных типов ПЦР: ПЦР с ЭФ детекцией, ПЦР с флуоресцентной детекцией по конечной точке, ПЦР «в реальном времени».
6)Для оценки количества копий ДНК в образце обычно используют ПЦР «в реальном времени». Предложите, как можно решить данную задачу с использованием ПЦР с ЭФ детекцией.
Ключ к тестовым заданиям:
1.D; 2.D; 3.E; 4.A,D; 5.C; 6.A,B,D; 7.B