ну с последующими ревакцинациями. Вакцинации подлежат также некоторые профессиональные категории лиц (военнослужащие, строители, мелиораторы, работники сельскохозяйственного и других производств с повышенным уровнем травматизма), особенно в зонах, почвы которых содержат споры C. tetani. При экстренной профилактике в случае травм используют антитоксическую противостолбнячную сыворотку в сочетании со столбнячным анатоксином (ак- тивно-пассивная иммунизация). В случае гиперчувствительности у вакцинируемого к белку сыворотки лошади используют противостолбнячный иммуноглобулин человека. В некоторых случаях проводится ревакцинация столбнячным анатоксином. Выбор препарата для создания иммунитета во всех случаях зависит от давности срока последней прививки. Вакцинация столбнячным анатоксином обеспечивает создание стойкого, продолжительного антитоксического иммунитета до 10 лет.
5.3. ВОЗБУДИТЕЛЬ БОТУЛИЗМА
Характеристика возбудителя
Clostridium botulinum – возбудитель ботулизма относится к роду Clostridium, семейству Bacillaceae. Морфологические признаки: грамположительные полиморфные палочки, перетрихи, не имеющие капсул, но образующие терминально расположенные споры, придающие микроорганизму вид ракетки для игры в настольный теннис.
C. botulinum – облигатный анаэроб, культивируемый на казеиновых или мясных питательных средах, сахарном и кровяном агаре. Температура роста 25–40˚С, рН 7,2–7,4. На кровяном агаре растет в виде небольших колоний с зоной ге-
91
молиза вокруг, а в столбике сахарного агара образует колонии, похожие на пушинки или зернышки чечевицы. Клостридии ботулизма обладают сахаролитической и протеолитической активностью, но она непостоянна и поэтому не может служить дифференциальным признаком.
Клостридии ботулизма продуцируют экзотоксины, отличающиеся по антигенным свойствам (A, B, C1, С2, D, E, F, G), но имеющие одинаковую биологическую активность. Они представляют собой варианты одного нейротоксина белковой природы. Этот токсин продуцируется в виде прототоксина и нуждается в дальнейшей активации, чтобы стать полноценным токсином. Активации прототоксина способствуют протеолитические ферменты протеазы. У штаммов, обладающих протеолитическими свойствами, активация токсина проходит в клетке под действием собственных эндогенных протеаз. Непротеолитическим штаммам в этом процессе помогают протеазы желудочно-кишечного тракта человека или животных. Возбудителями ботулизма у человека являются штаммы, относящиеся к серотипам А, В, С, Е и F. На территории нашей страны встречаются обычно серотипы А, В и Е. Представители других серотипов вызывают заболевания у животных. Ботулинический токсин один из самых сильных биологических ядов. В 1 мг содержится 100 смертельных доз для белых мышей; 0,001 мг нейротоксина вызывает гибель человека. Клостридии ботулизма продуцируют также гемолизин, лецитиназу, лейкотоксин. Последний подавляет фагоцитоз без разрушения лейкоцитов.
Вегетативные клетки возбудителя быстро погибают под воздействием факторов внешней среды, в то время как споры длительно сохраняются в почве и воде, устойчивы к нагреванию и выдерживают кипячение продолжительностью от 1 до 5 ч; 20% формалин убивает их через 1 сут., 10% HCl – через 1 ч, а спирт – только через 2 мес. Достаточно устойчивы и экзотоксины. Они долго сохраняются в консервирован-
92
ных продуктах и выдерживают высокую концентрацию поваренной соли. Для экзотоксинов более благоприятны среды с кислыми показателями рН. Экзотоксины разрушаются при нагревании при 100˚С через несколько минут. Резистентность токсинов различных типов клостридий несколько отличается. Самые устойчивые токсины у типа С, а самые лабильные – у типов D и Е.
Эпидемиология, патогенез, клинические проявления, иммунитет
Клостридии ботулизма обитают в кишечнике человека, животных, рыб, моллюсков, ракообразных. С фекалиями они выделяются в почву и воду, где способны не только сохраняться долгие годы в виде спор, но и размножаться. Попадая из этих биотопов в пищевые продукты, возбудитель ботулизма размножается в них и выделяет нейротоксин. Путь передачи – алиментарный. Наибольшую опасность представляют мясные, рыбные, овощные и грибные консервы, колбаса, ветчина и др. Само название заболевания произошло от слова «botulus» – колбаса. Токсин ботулизма нередко называют «колбасным ядом». От человека к человеку ботулизм не передается.
Инкубационный период длится от 2 ч до 10 дней (чаще
18–24 ч). Ботулизм – тяжелая пищевая токсикоинфекция, обусловленная действием некротоксина. Она проявляется в виде комплекса синдромов, связанных с поражением центральной нервной системы. У больных отмечаются нарушения со стороны органов зрения (двоится изображение, нет четкости), поражение мышц языка приводит к афонии (осиплость, позднее голос пропадает), затруднено глотание, нарушается координация движений (появляется шаткость походки), нарушаются дыхательные функции. Больные могут погибнуть от паралича дыхательного центра или сердца. В не-
93
которых случаях при ботулизме преобладают обычные для пищевых отравлений симптомы (тошнота, рвота, диарея). Иммунитет изучен недостаточно, носит характер типоспецифического антитоксического, кратковременного. Перекрестного иммунитета нет.
Микробиологическая диагностика
Материал для исследования – рвотные массы, про-
мывные воды желудка, испражнения, кровь, моча. Исследуются и подозрительные пищевые продукты.
Методы диагностики – бактериологический и биологический. С целью выделения чистой культуры возбудителя и его идентификации проводят посев исследуемого материала на питательные среды, применяемые для культивирования анаэробных микроорганизмов (Китта–Тароцци, кровяной агар, мясные и казеиновые среды). Для того чтобы освободиться от посторонней микрофлоры, исследуемый материал предваритетельно прогревают при 80˚С в течение 20 мин. Выделенные культуры клостридий идентифицируют по морфологическим, культуральным, биохимическим и токсигенным свойствам.
Самым важным в диагностике ботулизма является определение типа токсина, поскольку от этого зависит выбор сыворотки для лечения и профилактики заболевания. С этой целью ставят реакцию нейтрализации токсина антитоксической сывороткой. Проводят биологическую пробу на мышах. Контрольному животному вводят только исследуемый материал, а каждому из опытных – исследуемый материал, смешанный с антитоксической сывороткой соответствующего типа (А, В и Е). Все животные погибают, кроме одного, которому был введен материал, в котором токсин был нейтрализован антитоксической сывороткой. Тип сыворотки указывает на типовую принадлежность токсина.
94
Для определения токсина используют также реакцию непрямой гемагглютинации (РНГА) и иммуноферментный анализ (ИФА).
Лечение и профилактика
Больных ботулизмом лечат антитоксическими сыворотками. До установления типа токсина, вызвавшего заболевание, используют поливалентные сыворотки, а после получения ответа из лаборатории о типе токсина продолжают введение только гомологичной сыворотки. В комплексное лечение включают антибиотикотерапию – и общеукрепляющие препараты.
Основой профилактики ботулизма является контроль за производством и консервированием пищевых продуктов. Особую опасность представляют продукты домашнего консервирования (грибы, овощи, мясо, рыба и др.).
95