Реакция нейтрализации токсина антитоксином (флоккуляция) относится к типу серологических реакций, протекающих с нейтрализацией антигена. Реакции нейтрализации основаны на способности антител нейтрализовать in vitro биологически-активные антигенсодержащие субстраты: токсины, вирусы, яды змей и т.п. Реакция состоит в смешивании биологически-активного вещества с сывороткой, содержащей антитела, и выявлении нейтрализации его активности в биологическом тесте на животном или в культуре ткани.
Реакция флоккуляции применяется для титрования антитоксических сывороток, токсинов и анатоксинов, а также для определения типа токсина. Реакция флоккуляции основана на способности токсина или анатоксина при смешивании в эквивалентных соотношениях с антитоксической сывороткой образовывать помутнение, а затем рыхлый осадок (флоккулят).
Механизм реакции флоккуляции аналогичен таковому реакции преципитации. Одним из вариантов реакции нейтрализации токсина антитоксином является реакция нейтрализации гемолитических свойств токсина специфической антисывороткой.
5. Какие химические соединения необходимо использовать для дизинфекции медицинских инструментов, контаминированных ВИЧ?
ВИЧ характеризуется сравнительно низкой устойчивостью к действию химических и физических факторов. Вирус является лабильным под действием кислых и щелочных рН (его максимальная биологическая активность проявляется при рН 7-8). Чувствителен он к действию эфира, ацетона, 70% этилового спирта, легко иннактивируется под действием широкого круга дезинфектантов, поверхносно-активных веществ.
Полное разрущение вируса регистрируется при действии 0,3% перекиси водорода, 0,5%-ного раствора формальдегида, 0,5%-ного раствора лизола, 0,2%-ного раствора гипохлогита натрия, 0,0125%-ного раствора глутаральдегида и 40 мМ раствора едкого натра. В целом ВИЧ полностью иннактивируется методами и препаратами, действующими на вирус гепатита В, что является известной гарантией обеззараживания крови.
6. Назовите основные причины лекарственной устойчивости (резистентности) микроорганизмов к антибиотикам. Предупреждение ее развития
Механизмы резистентности микроорганизмов к антибиотикам и другим химиотерапевтическим препаратам сложны и разнообразны. Главным образом они связаны со следующими причинами:
1) превращением активной формы антибиотика в неактивную форму путем ферментативной инактивации и модификации;
2) утратой проницаемости клеточной стенки для определенного химиотерапевтического препарата;
3) нарушениями в системе специфического транспорта данного препарата в бактериальную клетку;
4) возникновением у микроорганизмов альтернативного пути образования жизненно важного метаболита, заменяющего основной путь, блокированный препаратом.
Механизмы резистентности могут быть подразделены на первичные и преобретенные.
К первичным механизмам относятся те, которые связаны с отсутствием "мишени" для действия данного препарата; к приобретенным - изменением "мишени" в результате модификаций, мутаций, рекомбинаций. В первом случае речь идет о естественной (видовой) резистентности, например у микоплазм к пенициллину из-за отсутствия у них клеточной стенки. Однако чаще всего резистентность к химиотерапевтическим препаратам, в том числе антибиотикам, приобретается микробными клетками с генами резистентности (г-гены), которые они получают в процессе свой жизнедеятельности от других клеток данной или соседней популяции. При этом наиболее эффективно и с высокой частотой r-гены передаются плазмидами и транспозонам. Плазмиды могут нести несколько транспозонов, контролирующих резистентность к разным химиотерапевтическим препаратам, в результате чего формируется множественная резистентность бактерий к различным препаратам.
Устойчивость к антибиотикам бактерий, грибов и простейших также возникает в результате мутаций в хромосомных генах, контролирующих образование структурных и химических компонентов клетки, являющихся "мишенью" для действия препарата.
Биохимические механизмы резистентности бактерий к бета-лактамным антибиотикам разнообразны. Они могут быть связаны с иннуцибельным синтезом бета-лактамазы, изменениями в пенициллинсвязывающих белках и других "мишенях". Описано около 10 пенициллинсвязывающих белков- ферментов, участвующих в синтезе бактериальной клеточной стенки. Кроме того, резистентность к ампициллину и карбенициллину можно объяснить снижением проницаемости наружной мембраны грамотрицательных бактерий. Развитие их или другого типа резистентности определяется химической структурой антибиотика и свойствами бактерий. У одного и того же вида бактерий могут существовать несколько механизмов резистентности.
Механизм быстрого развития резистентности к новым цефалоспоринам, устойчивым к действию цефалоспориназ, зависит от образования комплекса антибиотика с индуцибельными латамазами. При этом гидролиза антибиотика не происходит. Такой механизм обнаружен у протеев.
Биохимические механизмы приобретенной резистентности к аминогликозидным антибиотикам и левомицетину связаны со способностью бактерий образовывать ферменты (ацетилтрансферазу, фосфотрансферазу), которые вызывают соответственно метилирование, аденилирование или фосфорилирование данных антибиотиков. Устойчивость к тетрациклину обусловлена главным образом специфическим подавлением транспорта данного антибиотика бактериальные клетки и т.д.
Таким образом, происходит образование отдельных резистентных особей в бактериальной популяции. Их количество крайне незначительно. Так, одна мутировавшая клетка (спонтанная мутация), устойчивая к какому-либо химиотерапевтическому препарату, приходится на 105-109 интактных (чувствительных) клеток. Передача г-генов с плазмидами и транспозонами повышает число резистентных особей в популяции на несколько порядков.
Формирование лекарственно-устойчивых бактериальных популяций происходит путем селекции. При этом в качестве селективного фактора выступает только соответствующий химиотерапевтический препарат, селективное действие которого состоит в подавлении размножения огромного большинства чувствительных к нему бактерий.
Массовой селекции и распространению антибиотикорезистентных бактериальных популяций способствуют многие факторы, например бесконтрольное и нерациональное применение антибиотиков для лечения и особенно для профилактики различных инфекционных заболеваний без достаточных к тому оснований, а также использование пищевых продуктов (мясо домашних птиц и др.), содержащих антибиотики (тетрациклин).
Борьба с лекарственно-устойчивыми бактериями проводится разными путями. К ним относятся систематическое получение новых химиотерапевтических препаратов, которые отличаются от существующих механизмом антибактериального действия. Перспективным направлением является химическая модификация известных антибиотиков с защищенными активными группами, устойчивыми к бактериальным ферментам. Кроме того, проводятся исследования по изысканию ингибиторов, подавляющих активность бактериальных ферментов, а также препаратов, препятствующих адгезии бактерий на клетках макроорганизмов.
Особое значение приобретают мероприятия для ограничения распространения лекарственно-устойчивых форм бактерий. Это прежде всего систематическое изучение типов лекарственной устойчивости патогенных и условно-патогенных бактерий, циркулирующих в пределах отдельных регионов.
Своевременная информация лечащих врачей о циркулирующих в данном регионе лекарственно-устойчивых бактериях помогает в выборе наиболее подходящего по спектру действия препарата без предварительного определения чувствительности выделенных бактерий Это позволяет избежать "слепого" использования большого числа антибиотических средств. Рекомендуется также по мере возможности определять чувствительность выделенных бактерий к антибиотикам, а также ограничивать их применение без достаточных показаний. Запрещается использовать применяемые в медицине антибиотики в качестве консервантов пищевых продуктов и кормовых добавок, для ускорения роста, профилактики и лечения различных заболеваний животных (сальмонеллезов и др.). В животноводстве рекомендуется применять такие антибиотики, которые не используются в медицинской практике. Большое значение имеет проведение эпидемиологического надзора за заражением окружающей среды лекарственно-устойчивыми бактериями, которые передаются с пищевыми продуктами, сточными водами, больничными отходами. С этой целью необходимо систематически выявлять носительство антибиотико-устойчивых бактерий и проводить другие профилактические мероприятия.
7. По каким показателям судят о микробной загрязненности лекарственных средств и о чем они свидетельствуют?
Готовые лекарственные средства могут загрязняться микроорганизмами в процессе приготовления (первичная контаминация), хранения и использования (вторичная контаминация). Источниками микробного загрязнения являются сырье, вода, воздух, упаковка и упаковочный материал, аптечное и заводское оборудование, руки и одежда персонала. Обладая широким набором ферментов, микроорганизмы способны разлагать и использовать в качестве питательного субстрата фармакологически активные субстанции и вспомогательные вещества. Как бактерии, так и грибы, обнаруживаемые в готовых лекарственных средствах, содержат ряд ферментов, которые могут привести к изменению химического состава препарата и образованию токсических продуктов. Микробной порче особенно подвержены лекарственные средства, богатые органическими веществами, жидкие и мягкие лекарственныеформы. Кроме сапрофитных, лекарственные препараты могут быть контаминированы микроорганизмами, опасными в инфекционном отношении.
В твердых лекарственных формах существует небольшой риск порчи препарата, поскольку остаточная влажность ниже минимального уровня, необходимого для размножения микроорганизмов. В жидких и мягких декарственных средствах имеются более подходящие условия для роста и размножения микроорганизмов. Большое количество микроорганизмов содержится в водных настоях, а в настойках и концентрированных растворах-значительно меньше или вообще отсутствуют.
Признаки микробной порчи жидких лекарственных форм (инфузов, отваров) - изменение цвета, помутнение, пленка, несвойственный запах; мягких лекарственных форм- расслоение, плесневение; твердых-изменение консистенции.
С учетом опасности микробного загрязнения разработаны и введены соответствующие фармакопейные требования к лекарственным препаратам, а также к субстанциям и вспомогательным веществам, использующимся при их изготовлении.
8. Какую вакцину и в каком возрасте применяют для профилактики кори?
С целью профилактики кори применяют живую коревую вакцину (ЖКВ). Живая коревая вакцина готовится из вакцинного штамма Л--16, выращенного на клеточных культурах эмбрионов японских перепелов. Вакцина выпускается в сухом виде в ампулах или флаконах с содержанием 1-5 прививочных доз.
Живой коревой вакциной прививают не болевших корью детей в возрасте от 12 мес до 14 лет. Ревакцинацию проводят перед поступлением в школу серонегативным детям.
Дети старше 12 мес и взрослые, не болевшие корью и не привитые ранее, бывшие в контакте с больным корью, подлежат прививкам коревой вакциной при отсутствии противопоказаний не позднее 72 ч с момента контакта с больным.
У большинства детей коревая вакцинация не сопровождается никакими клиническими проявлениями. У некоторых детей в период с 5-6-го по 18-й день могут повыситься температура тела, появиться катаральные явления в виде кашля, незначительного конъюнктивита, ринита; иногда наблюдается необильная бледно-розовая кореподобная сыпь. Вакцинальная реакция держится более 2-3 дней; в этот период ребенок незаразен для окружающих.
Коревая вакцина малореактогенна, осложнения у привитых очень редки. У детей с аллергической реактивностью как в первые дни вакцинации, так и в период разгара вакцинальной реакции могут возникнуть аллергическая сыпь полиморфного, иногда уртикарного характера, отек Квинке, лимфоаденопатии, артралгии, редко - синдром сывороточной болезни, астамический синдром или синдром крупа, геморрагический синдром по типу геморрагического васкулита.
При ярко выраженных общих реакциях на прививку температура тела ребенка повышается, появляются симптомы интоксикации, а иногда неврологическая симптоматика. При гипертермии может развиться энцефалическая реакция, которая характеризуется судорожным синдромом продолжительностью 1- 2 мин (однократный или повторные). Прогноз благоприятный, остаточные явления крайне редки.
Нередко на вакцинальный процесс может наслоиться ОРВИ, которая может осложниться пневмонией, ангинами.