Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

Последовательность аминокислотных остатков гликофорина А в положениях

35–41 (Ala-Ala-Thr-Pro-Arg-Ala-His) заменена на Pro-Ala-His-Thr-Ala-Asn гликофорина В (Daniels [56], Reid, Lomas-Francis [202]). Последовательность, про-

исходящая из псевдоэкзона ΨВ3 GYPB, кодирует антиген Mur (MNS10). Во фрагменте, происходящим из GYPA, выявлена точковая мутация: Ile46 GYPA на Asn45 из GYPB. Этим и объясняется появление антигена DANE, а также реагирование анти-DANE-антител с эритроцитами M g +.

Известен лишь 1 образец аллогенных антител анти-DANE, полученных от мужчины, не подвергавшегося гемотрансфузиям.

В 2005 г. появилось сообщение Velliquette и соавт. [253] об обнаружении антител к часто встречающемуся антигену ENDA, получившему обозначение MNS44. Носитель антител анти-ENDA имел редкий фенотип ENDA −DANE +. Один из унаследованных им генов оказался редким аллелем M k, другой имел гибридную природу GYP(A-B-A) и был почти полностью идентичен GP.Dane, за исключением кодона одной аминокислоты. Гибридный гликофорин содержал изолейцин в положении 65, гликофорин GP.Dane – аспарагин в положении 64 (Daniels и соавт. [58], Huang и соавт. [106]).

Vw и ENEH

Антитела анти-Vw, позволяющие идентифицировать редкий антиген Vw (Mi.I, MNS9), найдены в 1954 г. Van der Hart и соавт. [251]. Антиген назван по фамилии аллоиммунизированной родильницы (Gr. Verweyst). Антитела обусловили положительную прямую реакцию Кумбса у новорожденного, однако клинических проявлений ГБН не вызывали. Антиген Vw выявляли с частотой 0,5– 0,6 % в большинстве европейских популяций, на Юго-Западе Швейцарии он встречался несколько чаще (1,43 %) (Darnborough [62]). Наличие антигена Vw на гликофорине А связывают с метионином в положении 28. Фактор Vw экспрессирован на гликофорине GPA(1–27)-GPB(28)-GPA(29–131), который контролируется гибридным геном GYP(A-ΨB-A) (см. табл. 6.7). Выявлена точковая мутация, приводящая к замене Thr 28 Met.

Посемейные исследования выявили ассоциацию антигена Vw с гаплотипами Ns, NS, Ms и MS в порядке убывания. Описана женщина, гомозиготная по гену Vw, с фенотипом Vw + M −N + S −s +. В результате повторных беременностей у нее образовались антитела к часто встречающемуся антигену ENEH (MNS40), который находится в антитетичных отношениях с Vw и Hu (MNS19). Упомянутый образец анти-ENEH-антител является единственным.

Аллоиммунные антитела анти-Vw относятся к IgM и IgG. Они активны при комнатной температуре как агглютинины, а также реагируют в непрямой антиглобулиновой пробе, комплементсвязывающей активностью не обладают. Описаны случаи посттрансфузионных реакций и ГБН иногда с тяжелыми клиническими проявлениями, причиной которых были анти-Vw-антитела (Gorlin

и соавт. [85], Molthan [167], Rearden и соавт. [195], Taylor и соавт. [245]).

471

Антитела анти-Vw встречаются примерно у 1 % здоровых лиц (Giles [82]). Их часто находят у больных аутоиммунной гемолитической анемией.

Hut (Mi.II)

Специфические антитела, впервые описанные Giles в 1982 г., выявляли редкий антиген Hut (Hutchinson, MNS19), свойственный фенотипу GP.Hut. (Giles [82]). Эритроциты этой редкой группы (частота 0,06 % в рандомизированной выборке) реагируют с антителами анти-MUT (MNS35) (Reid, LomasFrancis [202]). Посемейные исследования выявили ассоциацию антигена Hut с гаплотипами MS, Ns и Ms в порядке убывания, он ни разу не сочетался с гаплотипом NS.

Как и GP.Vw, GP.Hut является фенотипическим проявлением замены небольшого фрагмента GYPA на гомологичный сегмент GYPB.

Антитела анти-Hut, так же как и анти-Vw, нередко присутствуют в виде отделяемой фракции в сыворотках анти-Mi a (Giles и соавт. [84]). Они описывались в качестве причины ГБН. Детальное изучение специфичности разных образцов анти-Hut-антител показало, что часть из них в действительности открывает антиген MUT (MNS35). Антигены Hut и MUT отличаются друг от друга: найдены фенотипы Hut + MUT − (GP.Dane) и Hut − MUT +(GP.HF).

Nob (Mi.VII) и Jon (Mi.VIII)

Редко встречающийся антиген Nob, идентифицируемый анти-Nob- антителами, присутствует на эритроцитах, несущих гликофорины GP.Nob и GP.Jon. Последние различают по реакции с анти-Hop-антителами. Эритроциты, несущие GP.Jon, агглютинируются сывороткой анти-Hop, тогда как эритроциты, несущие GP.Nob, не агглютинируются этой сывороткой. Анти-Нор-антитела слабо реагируют также с эритроцитами, содержащими

GP.Bun (Mi.VI).

Антиген Nob выявляли с частотой 0,06 % среди доноров англичан (Giles и

соавт. [84]).

Посемейными исследованиями показано, что ген, обусловливающий синтез GP.Nob, наследуется с гаплотипом MS, в одной семье он передавался с гаплотипом Ms. Ген, обусловливающий синтез GP.Jon, передавался с гаплотипом Ns.

Антигенная специфичность гликофоринов GP.Nob и GP.Jon обусловлена заменой Arg 49 Thr внутри цепи гликофорина А, этот участок подвергается О-гликозилированию.

Кодоны, обусловливающие размещение аминокислот в определенных позициях (Thr49 и Ser52) на гликофорине GP-A.Nob, происходят из псевдоэкзона нормального гена GYPB. Во многом сходные перемещения (включение небольшого по длине фрагмента GYPB в GYPА) приводят к формированию фенотипа

GP.Jon (Reid, Lomas-Francis [202]).

Большинство найденных образцв антител анти-Nob и анти-Hop имело

472

естественное происхождение: получены от лиц, не имевших гемотрансфузий или беременностей. Данных об их клиническом значении нет.

Антигены GP(A-B-A)KI и GP(A-B-A)Sat

Эритроциты, несущие гликофорин GP(A-B-A)KI, впервые найдены у донора-чеха и его сестры. Они содержали редкий антиген Hil (MNS20), при этом отсутствовал редкий фактор MINY (MNS34). Большинство других Hilположительных образцов несет также и антиген MINY. Секвенирование геномной ДНК первого пробанда выявило 2 нуклеотидные замены внутри GYPA. Результатом оказались замены аминокислот (Arg 61 Thr, Val1 62 Gly) с образо-

ванием последовательности Pro-Glu-Glu-Glu-Thr-Gly-Glu-Thr-Gly-Gln-Leu, рас-

познаваемой антителами анти-Hil (Daniels [56]).

Антиген Sat (MNS36), идентифицируемый антителами анти-Sat, возникает в результате вставки в пептидную цепь гликофорина А небольшого сегмента гли-

кофорина B (Daniels [56]).

Hil, TSEN, MINYи Mur

Некоторые редкие антигены системы MNS являются общими для гибридных (рекомбинантных) вариантов гликофоринов GP(A-B) и GP(B-A-B). К таким общим антигенам, присутствующим на GP(A-B) и GP(B-A-B), относят

Hil (MNS20), TSEN (MNS33) и MINY (MNS34) (Reid и соавт. [204, 205]).

Контролирующие их гены картированы в области слияния GYP(A-B) внутри интрона 3. Фактор Hil экспрессируется совместно с антигеном s, TSEN – совместно с антигеном S. Антиген MINYс антигенами S и s не связан.

Образование гликофоринов, экспрессирующих перечисленные выше редкие антигены, обусловлено слиянием экзона 3 GYPA и экзона 4 GYPB.

Гликофорины GP(A-B)Hil, GP(B-A-B)Mur, GP(B-A-B)Bun и GP(B-A-B)HF

содержат треонин в позиции 29, что свойственно нормальному гликофорину B. Эритроциты, несущие эти гликофорины, имеют фенотип Hil + TSEN −MINY + и содержат необычный антиген s (Poole и соавт. [188]).

Гликофорины GP(A-B)JL и GP(B-A-B)Hop содержат метионин в позиции 29. Эритроциты, несущие эти гликофорины, имеют фенотип Hil −TSEN + MINY + и необычный антиген S.

ГликофориныGP(B-A-B)Mur,GP(B-A-B)HopиGP(B-A-B)Bunнесутпродукт псевдоэкзона ΨВ3 GYPB, активированного фрагментом слившегося с ним GYPA. Все эти структуры экспрессируют антиген Mur. Установлено, что анти-Mur- антитела распознают фрагмент полипептидной цепи с последовательностью ами-

нокислотAsp-Thr-Tyr-Pro-Ala-His-Thr-Ala-Asn-Glu-Val-Ser-Glu в позиции 32–44. GP(A-B-A)Dane содержит последовательность аминокислот Pro-Ala-His-Thr-Ala- Asn,аконтролирующийген–кодоны,происходящиеизGYPB-псевдоэкзонаΨВ3. Выявлено несколько образцов сывороток, содержащих анти-Hil-антитела. В одном случае они явились причиной ГБН (Ellisor и соавт. [67]). Антитела к другим антигенам, свойственным указанным гликофоринам, вырабатываются

473

очень редко. Известно 5 образцов антител анти-TSEN и 1 – анти-MINY. Данные об их клиническом значении отсутствуют.

Mia

Впервые антитела анти-Mi a были описаны Chown и соавт. [44] в 1951 г. Авторы полагали, что антитела распознают определенный фенотип в подсистеме Мильтенбергер. Позднее было установлено, что они являются смесью антител к нескольким антигенам: Vw, Mur, Hut, и MUT (Blackall и соавт. [25], Chandanyingyong и соавт. [36, 37], Metaxas-Buhler и соавт. [159, 163], Mohn и со-

авт. [165], Webb и соавт. [258]). Высказывались сомнения относительно существования собственно антигена Mi a. Однако в последние годы получены 2 образца мышиных моноклональных анти-Mi a-антител, позволивших идентифицировать антигенMi a каксамостоятельный.АнтигенMi a встречаетсяоченьредко(менее0,01 %)у европейцев,однакосредикитайцевипредставителейдругихмонголоидныхпопуля- цийвЮго-ВосточнойАзииегочастотадостигает15 %.Антителаанти-Mi a описаны вкачествепричиныГБНипосттрансфузионныхгемолитическихреакций[41,167].

Антигены GP(B-A) (группа анти-Lepore)

Dantu

После того как был установлен генный механизм образования гибридных гликофоринов, стало ясно, что гены GYP(A-B) и GYP(B-A) могут кодировать синтез гликофоринов GP(A-B) и GP(B-A), содержащих антитетичные антигены. Группы таких антигенов вскоре были обнаружены и обозначены как Lepore [см. Антигены GP(A-B)] и анти-Lepore.

Одним из первых антигенов группы анти-Lepore был открыт редко встречающийся антиген Dantu (MNS25), который выявляли преимущественно у негроидов (Contreras и соавт. [49], Moores и соавт. [169]). Позднее установлена гетерогенность фенотипа Dantu + и выделены его типы: Ph, NE и MD (Moores и

соавт. [169], Ridgwell и соавт. [210]). Фенотип Dantu + NE + обусловлен слия-

нием экзонов 1–4 GYPB c экзонами 5–7 GYPA и их дупликацией. При фенотипе Dantu + Ph + дупликация отсутствует. Фенотип Dantu + MD + возникает при слиянии экзонов 1–4 GYPB с 5–7 GYPA, рекомбинантный фрагмент гена встроен между нормальными GYPА и GYPВ (см. табл. 6.7).

Известнонесколькообразцовантителанти-Dantu.Ониприсутствоваливсыво- ротках, содержащих антитела к другим редким антигенам MNS. Фракцию анти- Dantuиногдаобнаруживаливсывороткаханти-Sианти-s.Вбольшинствеслучаев анти-Dantu-антитела были естественного происхождения. Посттрансфузионные реакции и ГБН, вызванные этими антителами, не описаны.

474

Sta (Stones) и ERIK

Антиген St a (Stones), названный по имени человека, у которого впервые выявлены идентифицирующие этот антиген антитела, описан в 1962 г. Cleghorn [46]. Антитела анти-St a присутствовали в полиспецифических сыворотках, а также в сыворотках анти-S.

Частота этого антигена у европеоидов менее 0,1 %, у монголоидов – 2–6 % (Broadberry и соавт. [32], Madden и соавт. [154]). Описан гомозиготный

(Sta/ Sta) индивид.

Антиген St a экспрессирован на нескольких вариантах гликофоринов

(см. табл. 6.7): GP.Sch, GP.Zan, GP.He, GP.Mar, кодируемых гибридными гена-

ми GYP(B-A), GYP(A-ΨB-A) и GYP(A-ΨE-A) (Blumenfeld и соавт. [28], Anstee

и соавт. [14, 16], Blanchard и соавт. [27], Cartron и соавт. [35], Huang и соавт. [98, 100], Rearden и соавт. [194, 196, 197]).

При секвенировании фрагментов GYPA выявлены замены, сказывающиеся на последовательности аминокислот в гликофорине. Псевдогены ΨB и ΨE, активированные сплайсингом, нарушают считывание некоторых участков экзона 3. Показано, что транскрипты полной длины кодируют антиген ERIK (MNS37), неполной длины – антиген St a.

Aнтиген ERIK, открытый в 1993 г., синтезируется при замене Gly 59 Arg в гликофорине А (Daniels и соавт. [61]).

Клинического значения антитела анти-St a и анти-ERIK не имеют.

Другие антигены системы MN

HAG и ENEP

Редко встречающийся антиген HAG (MNS41) антитетичен часто встречающемуся антигену ENEP (MNS39). Оба антигена открыты в 1995 г. Poole и соавт. [186] и названы по именам пробандов. Специфичность этих антигенов обусловлена заменой Ala 65 Pro в результате точковой мутации G 250 C в экзоне 4 GYPA.

Анти-HAG-антитела обнаружены в нескольких сыворотках, содержащих антитела к другим редко встречающимся антигенам. Указанные антитела относились к классу IgG (Poole и соавт. [186]).

Анти-ENEP-антитела выявлены у мужчины, получавшего гемотрансфузии

(Reid и соавт. [207]).

Анти-ENEP- и анти-HAG-антитела не описаны как причина посттрансфузионных реакций и ГБН.

475