Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

к повышению у реципиентов авидности и титра анти-е-антител в посттрансфузионном периоде.

Анти-е-подобные аутоантитела

Описаны анти-е-антитела, которые при первом исследовании принимают за аллоиммунные, хотя они имеют аутоиммунное происхождение (Rosenfield и соавт. [571]). В редких случаях анти-hr B и / или Hrо-подобные антитела обнаруживали у пациентов в период, когда экспрессия антигенов hr B и Hrо на их эритроцитах была подавлена. Антитела рассматривали как аллоиммунные. Через некоторое, иногда довольно продолжительное время нормальная продукция указанных антигенов восстанавливалась и антитела исчезали, что служило основанием предполагать их аутоиммунную природу.

Значение анти-е-подобных аутоантител в трансфузиологии не выяснено. Однако, когда они присутствуют у больного, ему при необходимости переливают эритроциты, которые не агглютинируются указанными антителами.

Моноклональные анти-е-антитела

Эритроциты людей Е +е − реагируют с некоторыми моноклональными анти-е- и анти-е-подобными антителами, в то время как поликлональные анти- е-антитела дают с этими эритроцитами отрицательные реакции. Пока нет ясности: выявляют ли моноклональные анти-е-антитела какие-то дополнительные эпитопы е, не выявляемые человеческими поликлональными сыворотками, или же различия в реактивности моно- и поликлональных антител обусловлены неодинаковой авидностью?

Как известно, полипептид, несущий антиген е (hr"), имеет в позиции 226 аланин [496]. С такой структурой реагируют как поли-, так и моноклональные анти-е-антитела. Полипептид Rh, несущий антиген E (rh″), имеет в позиции 226 пролин. С такой структурой антитела анти-е не реагируют. Для того чтобы оценить своеобразие этих взаимодействий, целесообразно упомянуть, что большинство полипептидов D также имеет аланин в позиции 226, однако эта структура, вопреки ожиданиям, не реагирует с поликлональными и большинством моноклональных анти-е-антител и их не адсорбирует.

Высказано предположение, что поликлональные анти-е-антитела и некоторые моноклональные распознают аланин 226, кодируемый геном RHCe и геном RHce, но не геном RHD. В то же время другие моноклональные анти-е- антитела, реагирующие с эритроцитами D + E +e −, могут распознавать аланин 226, кодируемый генами RHCe и RHce, а также геном RHD.

Однако это предположение не нашло подтверждения в экспериментах, показавших, что моноклональные анти-е-антитела не реагируют с полипептидами −D −, которые имеют аланин 226, но лишены е-антигена [182, 196, 292, 496].

236

Другие варианты e (hr")

V (ceS) [Rh10]

В 1955 г. De Natale и соавт. [259] обнаружили у реципиента cde / cde, имевшего множественные гемотрансфузии, антитела, которые были названы авторами анти-V. Вскоре Giblett, Chase, Motulsky [301] описали еще двоих людей, в сыворотке которых содержались анти-V-антитела, обусловленные, как и в первом случае, переливаниями крови.

Антитела анти-V проявляли гетерогенность при исследовании крови людей, имевших парциальный е-антиген и одновременно содержащих анти-е-подобные антитела.

Антиген V был определенно связан с системой Rh, поскольку всегда встречался у лиц с гаплотипом cde или cDe, то есть имевших гены се в положении цис. Race и Sanger [544] предположили, что ген V является аллелем f (ce). После открытия антител анти-VS (анти-e S), реагирующих с образцами эритроцитов V + и Сde S +, аллельная связь генов Vи f (ce) стала очевидной, и антигенV, исходя из результатов серологических реакций, получил наименование ce S.

Поскольку антиген V (ce S) формируется, когда антиген е (hr") кодируется аллелем e S, считалось, что антиген V (ce S) соотносится с антигеном e S, как антиген f (се) с антигеном е (hr"). В настоящее время многие результаты проверочных серологических исследований совпадают с этим толкованием, однако отдельные данные ставят его под сомнение.

Антиген V встречается преимущественно у негров (табл. 4.20). Среди американских негров и негров Африки, в том числе банту, этот антиген наблюдали с частотой до 40 %. Причем африканские негры, у которых генный комплекс се и eS регистрируют чаще, чем у американских негров, имеют более высокую частоту антигена V. Антиген V чаще присутствует у людей с фенотипом cDe, чем cde. У европеоидов и монголоидов этот антиген бывает редко (0,19–0,49 % и 0,37–1,15 % соответственно).

Shapiro [605], исследуя большое количество образцов крови народа банту в Южной Африке, сделал вывод, что у банту существуют 2 серологически различающихся антигена. Один из них (hr V) по серологическим свойствам идентичен антигену V, описанному DeNatale и соавт. [259]. Другой антиген (hr H –сокраще- ние от Hermanez), получивший номер Rh28, как впоследствии выяснилось, является новым самостоятельным антигеном системы Rh.

Автор нашел, что hr V и hr H широко распространены у банту. Кроме того, он отметил, что каждый фактор или оба фактора могут продуцироваться различными гаплотипами, но чаще всего cde, Cde и cDe.

237

Экспрессия антигена V обусловлена заменой G → Т в нуклеотиде 1006 гена RHCE, что приводит к замещению глицина на цистеин в позиции 336 [247].

VS (eS) [Rh20]

В 1960 г. Sanger и соавт. [595] обнаружили анти-е-подобные антитела, обозначенные VS по имени женщины-носительницы антител – миссис V. S. Анти- VS-антитела реагировали со всеми эритроцитами V + (cde S) и большей частью эритроцитов Cde S. В табл. 4.21 представлены данные о характере реагирования антител анти-VSианти-V,позволяющие заключить, что указанные антитела выявляют разные антигены.

Таблица 4.21

Реакция антител анти-V (сeS), анти-VS (eS)*

* По Race, Sanger [544].

DeNatale и соавт. [259], Sanger и соавт. [595]) установили, что эритроциты VS + содержат необычную форму е-антигена, которая была названа е S, поскольку анти- VS-антитела реагировали с антигеном e S в фенотипах cde S и Cde S. Эритроциты VS + (e S + ) реагировали с большинством, но не со всеми образцами анти-е-антител,

238

полученных от лиц Е / Е, а также не со всеми анти-е-подобными (парциальными) антителами, полученными от лиц е +. На основании этих данных сделано заключение, что антиген VS (e S) кодируется локусом eS, который является аллелем Е и е. В тожевремяантигенV(ce S)кодируетсягеномceS,являющимсяаллелемce.

АнтигеныVS (e S) иV(ce S), по-видимому, могут формироваться при участии гена RHСe, а именно его разновидности CeS, поскольку некоторые лица (негроиды) с гаплотипом CdeS имеют эритроциты VS + V +, а другие, с гаплотипом Cde, имеют эри-

троцитыVS −V −.ОписаныредкиефенотипыVS −V +иС −V −VS +(Shapiro[605]).

Считается, что экспрессия антигена VS обусловлена заменой C → G в нуклеотиде 733 гена RHCE, и это приводит к замещению Leu 245 → Val в экзоне 5 [278, 356, 626]. У всех обследованных лиц VS + наблюдали гибридный ген

RHD – CE – D, имеющий в экзоне 5 Val 245 [247].

Danielsисоавт.[Transfusion,1997,Suppl.9S,101S]показали,чтоунегровфенотип

VS + V + ассоциирован сVal 245 на се-полипептиде, а фенотипVS + V − ассоциирован

сVal245иCys336.Егопродукцияобусловленаэкзоном3гибридногогенаD-CE.

Всерологии антигенов V и VS, так же как и других е-подобных, в том числе парциальных антигенов е, много неясного. У негроидов (американских негров, негров банту) и европеоидов они выражены сильнее, чем у монголоидов (южноамериканских индейцев). Известны комбинированные и переходные формы антигенов V и VS, а также антител анти-V, анти-VS, анти-hr V, анти-hr H и анти-hr VH, сепарируемых и несепарируемых, что свидетельствует о полиморфизме этих антигенов и антител и затрудняет их идентификацию серологическими методами. Имеется суждение, что антиген VS (e S) соотносится с антигенами V (ce S) и hr H, как антиген G соотносится с антигенами D и C. То же самое можно отнести к соответствующим антителам.

Некоторые исследователи отметили, что аллоиммунные антитела анти-D и анти-DC, обладающие высокой активностью, в ряде случаев содержат компонент анти-V и реагируют с эритроцитами С −D −V + [374]. При детальном исследовании этих случаев почти всегда обнаруживалось, что обладатели антител были иммунизированы (в результате беременности или трансфузии) эритроцитамиV −.

Отмечена также некоторая связь антигенов VS и V с парциальными D-антигенами и слабым антигеном D u.

hrH (Rh28)

ПриисследованиисывороткимиссисV.S.адсорбцией–элюциейбылопоказа- но, что сыворотка этой женщины содержала моноспецифические антитела антиVS (Sanger и соавт. [595]). Сыворотки анти-VS, исследованные Shapiro [605], со-

держали комбинированные антитела анти-hr V(илиV, или ce S) + анти-hr H, которые можно было разделить дифференциальной адсорбцией. Другие сыворотки антиVS, помимо сепарируемых антител анти-hr V и анти-hr H, имели несепарируемые антитела, которые были названы анти-hr VH, поскольку определяли общую часть агглютиногена, присутствующего на эритроцитах hr V + и на эритроцитах hr H +.

239

Антитела анти-VS легче адсорбируются эритроцитамиV −VS +, чем эритроцитами V + VS +, так как последние содержат меньше VS-антигена. Антитела антиhr H отличались от анти-VS. Они полностью адсорбировались эритроцитами hr H +, но не адсорбировались эритроцитами hr H − фенотиповV −VS + илиV + VS +.

Молекулярные исследования VS и eS

Отождествление антигенов VS и e S на основании только лишь серологического сходства некоторые исследователи считают недостаточно аргументированным.

Оригинальную интерпретацию связи VS и e S предложили Steers и соавт. [626], которые установили, что ген RHCE лиц VS + имеет мутацию, приводящую к замене в Rh-полипептиде лейцина на валин в позиции 245. Поскольку валин в позиции 245 располагается внутри мембраны, можно полагать, что он не принимает непосредственного участия в серологической реакции с анти-VS- антителами, но его присутствие, вероятно, влияет на структуру экзофациальной части полипептида Ee. Валин 245 расположен недалеко от позиции 226, в которой замена пролина на аланин определяет соответственно специфичность Е или е. Steers и соавт. предположили, что специфичность антигена VS обусловлена валином 245, присутствие которого одновременно с аланином 226 способствует трансформации е в e S. Таким образом, VS и e S, по-видимому, вместе присутствуют на эритроцитахVS +, и далеко не факт, что они являются одним и тем же антигеном.

Faas и соавт. [278] подтвердили данные Steers и соавт. [626], показав, что присутствие антигена VS на эритроцитах связано с заменой лейцина 245 на валин. Авторы предположили, что эта замена может также влиять на экспрессию антигена С, то есть воздействовать на серин в позиции 103, в силу чего образуется фенотип Cde S со слабым антигеном С, ассоциированным с VS +e S +. Эти взгляды нашли подтверждение в экспериментах Reid и соавт. [Transfusion, 1995, v. 35 (sappl. 10s), 51s], показавших, что эритроциты Cde, не содержащие антигена hr B (парциального е), часто являются е S +. Так, из 48 выявленных образцов эритроцитов hr B − 45 были VS +. Авторы предположили антитетичную взаимосвязь между антигенами VS и hr B. Если VS и hr B кодируются двумя аллелями, то должен существовать третий аллель, который их не образует. Действительно, Reid и соавт. обнаружили образцы эритроцитов VS +hr B −, VS −hr B +, а также редкие образцы VS −hr B −.

Не исключено также, что антиген VS обнаруживают на эритроцитах, когда недостающие эпитопы hr B имитируют антиген e S, в то время как в действительности e S отсутствует.

Возможно генетическая структура, обусловливающая синтез антигена VS, часто, но не всегда, ингибирует продукцию антигена hr B.

240