Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

В-специфического донорского субстрата (Romano и соавт., цит. по Issitt иAnstee [122]). Н-дефицитные клетки Oh (Бомбей) такой конверсии не поддавались.

Реципрокные количественные соотношения вещества Н с А и В наблюдают при исследовании секретов лиц выделителей. Исключение составляли выделители с фенотипом пара-Бомбей, секретирующие А или В, но не Н, а также индивидыAint (см.Aint), у которых реципрокность А, В и Н нарушена.

Ослабление антигена А у лиц АВ

У лиц, имеющих генотип А1 / В, А- и В-специфические трансферазы обладают одинаковой активностью в отношении присоединения соответствующих иммунодоминантных группировок.

При генотипе А2В, А3 / В и Ах / В активность А-трансфераз снижена, и они менее успешно конкурируют с В-трансферазой в освоении Н-участков. Таким образом, гликозилирование Н-цепей у лиц А2В осуществляется в основном галактозой (В-специфичность), а для присоединения глюкозамина (А-специфичность) свободных Н-участков остается мало.

При генотипе А2 / О к доступным для гликозилирования Н-цепям присоединяется большее число иммунодоминантных группировок, экспрессия антигена А выше. Таким образом, эритроциты А2 несут больше антигенных эпитопов А по сравнению с эритроцитами А2В и соответственно сильнее реагируют с анти-А-антителами.

Известны случаи, когда мужчины А2В имели детей А1. Казалось бы – отцовство следовало исключить. Однако при изучении активности трансфераз установлено, что мужчины имели генотип А1В, несмотря на фенотипическую принадлежность к подгруппе А2В.

Другие варианты слабого антигена А

Существенно реже по сравнению с подгруппой А2 встречаются другие варианты антигена А, которые отличаются друг от друга убыванием вещества А и уменьшением соотношения последнего с веществом Н (табл. 3.9).

У одного и того же индивида со слабым вариантом антигена А часть эритроцитов может содержать бóльшее количество А-эпитопов, а другая часть эритроцитов – существенно меньшее. В связи с этим одни эритроциты агглютинируются сильнее, другие слабее или вовсе не агглютинируются. В наличии двух популяций эритроцитов (несущей и не несущей А-антигены) легко убедиться при использовании метода иммунофлюоресценции. Эритроциты, адсорбировавшие бóльшее количество анти-А-сыворотки, меченной флюоресцеином, дают сильное свечение, а эритроциты, слабо реагирующие с сывороткой, дают слабое свечение. При этом наблюдают мелкие интенсивно светящиеся агглютинаты на фоне свободно лежащих слегка флюоресцеирующих эритроцитов.

91

Таблица 3.9

Серологическая характеристика подгрупп А

Возникновение 2 или более популяций эритроцитов, несущих различное количество А-эпитопов, обусловлено А-трансферазами, модифицироваными вирусами или сформировавшимися под влиянием атипичных АВО-аллелей.

Агглютинационные свойства эритроцитов различных подгрупп А, а также число А-эпитопов весьма вариабельны (табл. 3.10).

Таблица 3.10

Агглютинабельность эритроцитов подгрупп А и число антигенных сайтов на 1 эритроцит

Варианты антигена А получили индивидуальные названия, однако это не означает, что каждый их них представляет независимую генетически детерминированную подгруппу. Они скорее являются исключением из правил нормального формирования группового вещества.

92

Aint

Вариант Aint (intermediate) занимает промежуточное положение между А1 и А2. Эритроциты Aint реагируют с антителами анти-Н сильнее, чем эритроциты А2, но существенно слабее, чем эритроциты А1. ВариантAint распространенсреди негроидов.

А3

Friedenreich в 1936 г. описал слабый вариант антигена А – А3. Посемейное исследование позволило установить, что аллель А3 передается по наследству. Особенностью эритроцитов А3 является то, что они неодинаково реагируют с антителами анти-А и анти-А,В (Young и соавт. [247]). С помощью метода иммунофлюоресценции удалось показать, что эритроциты А3 представлены двумя субпопуляциями. Одна из них содержит относительно большое количество антигена А, в то время как на другой он представлен в следовых количествах (Reed [185]). Агглютинация таких эритроцитов напоминает кровяную химеру (мелкие агглютинаты на фоне неагглютинированных эритроцитов). Антитела анти-АВ агглютинируют обе популяции эритроцитов, и химера не прослеживается.

Marsh и соавт. [151] считают, что эритроциты А3 в отличие от варианта Amos не являются смесью эритроцитов А2 и О. Антитела анти-А практически не агглютинируют эритроциты А3, но адсорбируются на них и могут быть элюированы (Reed [185]). При изучении различных образцов крови указанной подгруппы установлены вариации в активности А- и Н-трансфераз. Как уже отмечено выше, моноклональные антитела анти-А дают с эритроцитами подгруппы А3 отчетливо положительные реакции. Таким образом, нет оснований полагать, что антиген А3, экспрессированный на эритроцитах А3, качественно отличается от А1 и А2. В слюне выделителей, имеющих подгруппу А3, присутствуют субстанции А и Н.

Лица, имеющие подгруппу А3, встречаются с частотой менее 0,01 %. Сыворотки некоторых из них содержат экстраагглютинины α1.

Ах

Вариант Ах включает в себя подгруппы, которые ранее обозначали как А4, А5, А6, Az, Ao по мере убывания антигена. Различия указанных фенотипов имеют в основном количественный характер и улавливаются лишь при тонком количественном измерении адсорбции – элюции антител эритроцитами и оценке нейтрализации антител слюной (Н.В. Минеева и др. [44], П. Проданов [54, 55], Mohn и соавт. [158], Stamps и соавт. [203], Vos [219], Wylie и соавт. [235]).

Серологические особенности подгруппы Ах сводятся к следующему: ––эритроциты Ах не агглютинируются большинством сывороток лиц группы В, однако реагируют с антителами анти-А,В лиц группы О, агглютинация не носит смешанного характера; ––эритроциты Ах специфически адсорбируют анти-А-антитела, и последние могут быть элюированы;

93

––сывороткикровилицАх обычносодержатэкстраагглютининыα1 ииногдаα2; ––помимо субстанции Н в слюне выделителей, имеющих подгруппу Ах, содержатся следы группового вещества А.

Как уже отмечалось, большинство антител анти-А лиц группы В не агглютинирует эритроциты Ах. Сыворотки крови лиц В, иммунизированных групповым веществом А, напротив, обладают такой способностью. Моноклональные реагенты анти-А выявляют подгруппу Ах, однако в некоторых случаях эти тестсистемы взаимодействуют также и с антигеном В.

Эритроциты Ах очень редки – 1 : 40 000–77 000 (Reid, Lomas-Francis [186]).

Специфическая А-трансфераза обычно отсутствует в сыворотках крови и на эритроцитах лиц подгруппы Ах, активность Н-трансферазы снижена.

Результаты посемейных исследований противоречивы. В некоторых семьях удавалось проследить наследование подгруппы Ах как фенотипического проявления редкого аллеля Ах. В других семьях пробанды Ах имели ро-

дителей О (Beckers и соавт. [73], Valdes и соавт. [214], Van Loghem и соавт. [215]). Ducos и соавт. [93] наблюдали детей Ах в семьях, где один из родителей имел группу А2В.

Дифференцировать подгруппы А2 / В и Ах / В можно по отсутствию в сыворотке крови лиц Ах / В А-специфической трансферазы.

Как отмечают Issitt и Anstee [122], некоторые производители моноклональных антител предъявляют повышенные требования к своим реактивам и используют для оценки их качества эритроцитыAx.

Amos

Выявлены лица группы А, эритроциты которых проявляли мозаичный (mosaic – отсюда и обозначение) характер агглютинации со специфическими антителами. Эритроциты Amos, будучи смешанными с реагентами анти-А, отличались от А3 и Ах тем, что процент неагглютинированных клеток был постоянным и не зависел от активности анти-А-антител в тест-системе. Эритроциты, не вовлеченные в агглютинацию, не обладали способностью адсорбировать анти- А-антитела. Активность сывороточных А-трансфераз у лицAmos снижена.

Возникновение варианта Amos связывают с соматическими мутациями в отдельных клонах гемопоэтических клеток (Marsh и соавт. [151]), в результате чего наряду с эритроцитами, содержащими антиген А, продуцируются эритроциты, лишенные этого антигена.

Am

Фенотип Am, описаный Gammerlgaard в 1942 г., сначала был обозначен им как Ах, но, поскольку найденный вариант отличался от Ах, вновь открытую подгруппу переименовали вAm. ЭритроцитыAm реагируют очень слабо и не со всеми образцами антител анти-А и анти-А,В. Присутствие антигена А в эритроцитах устанавливают с помощью адсорбции – элюции. У лиц Am выделителей

94

количество вещества А и Н в секретах приближается к норме. Сыворотки их крови, как правило, не содержат антител анти-А1. При посемейных исследованиях установлено, что ген Am передается по наследству как редкий аллель АВО. Среди французов данный фенотип встречался с частотой 1 на 150 тыс. (Darnborough и соавт. [88]), среди китайцев Тайваня – 1 на 400 тыс. (Daniels [87], Darnborough и соавт. [88]). Несмотря на редкость фенотипа Am, удалось идентифицировать 2 его разновидности с помощью детального анализа свойств сывороточных α-1,3-N-галактозаминилтрансфераз. Активность этих ферментов отличалась по кинетическим характеристикам при определенных значениях рН. В целом активность А-трансфераз у лиц подгруппы Am ниже, чем у лиц А2. Найдены лица группы AmB. Посемейные исследования не позволили установить наследственную передачуAm-фенотипа.

Ау

Подгруппа Ау напоминаетAm, однако имеет отличия:

––элюаты анти-А-антител, снятые с эритроцитов Ау, менее активны по сравнению с элюатами, снятыми с эритроцитов Аm;

––слюна лиц Ау выделителей содержит существенно меньше вещества А по сравнению с лицами Аm;

––сывороткакровилюдейАусодержитследовоеколичествоА-трансферазы, а у индивидов Аm этот фермент отчетливо выявляют (Drozda и соавт. [92], Issitt,Anstee [122], Reid, Lomas-Francis [186]).

Полагают, что фенотип Ау не передается по наследству, а возникает в результате мутации зародышевых клеточных линий в пределах одной и той же семьи.

Ael

Подгруппа Ael (elution) названа так по методу, с помощью которого удается обнаружить присутствие антигена А на эритроцитах. Антитела анти-А и анти- А,В не агглютигнируют эритроциты Ael, однако адсорбируются на их поверхности, что подтверждают методом адсорбции – элюции. В сыворотках крови лицAel А-трансфераза не выявляется, содержание Н-трансферазы снижено.

ФенотипAel встречается редко: 1 на 100 тыс обследованных, преимущественно среди монголоидов (Solomon и соавт. [197], Sturgeon и соавт. [208]). Посемейными исследованиямипоказанапередачагенаAel какредкогоаллелялокусаАВО.

Aend (Afinn,Abantu)

Эти варианты антигена А отличаются крайне слабой экспрессией (Mohn и

соавт. [157], Nevanlinna и соавт. [168], Sturgeon и соавт. [208]), поэтому и обо-

значены как «end».

Антиген Aend практически не реагирует с антителами анти-А,В лиц группы О, не взаимодействует с антителами анти-А лиц группы В. Некоторое количество группового вещества А выявляют в слюне.

95