Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

Stringarm и соавт. [102]). Указанная детерминанта наиболее выражена на эритроцитах Sd(a ++ ). Реакция ингибируется N-ацетилгалактозамином. В определенных разведениях или после частичной адсорбции обычными эритроцитами экстракты из Dolichos biflorus пригодны для поиска эритроцитов Sd(a ++ ). Повторные адсорбции лектинов Dolichos biflorus эритроцитами А1, Tn + и Sd(a ++ ) приводили к полному истощению их специфической активности.

Агглютинацию эритроцитов Sd(a ++ ) вызывают также лектины из семян шал-

фея Salvia horminum, Salvia farinacea и пустырника обыкновенного Leonurus cardiaca (Bird,Wingham[4,6],Moore,Marsh[63]),атакжеэкстрактыизпеченивино-

градных улиток Helix pomatia и Helix aspersa (Cazal и соавт. [19], Myllida и соавт. [68], Bird, Wingham [7], Uhlenbruck и соавт. [109], Bizot [8]). Агглютинация, как и

вслучае c лектином Dolichos biflorus, ингибировалась N-ацетилгалактозамином

(Bird,Wingham [4‒7], Uhlenbruck и соавт. [109]). Специфическую активность лек-

тинов из семян шалфея по отношению к эритроцитам Sd(a ++ ) и Tn + удавалось разделить путем дифференциальной адсорбции эритроцитами соответственно Tn

иSd(a ++ )(Bird,Wingham[6]).Лектиныизпустырникареагировалисэритроцитами Tn + слабо, поэтому путем небольшого разведения их можно было превратить

вреагент для идентификации группы Sd(a ++ ) (Bird, Wingham [4]). Интересно отметить, что лектины из бобов Phaseolus lunatis и Phaseolus limensis, специфичные

по отношению к антигену А1, не агглютинировали эритроциты Sd(a ++ ), несущие высокоагглютинабельный антиген Sd a (Myllida и соавт. [68], Bird, Wingham [7], Uhlenbruck и соавт. [109]).

Сыворотки крови цыплят содержат естественные антитела, реагирующие с эритроцитамSd(a ++ )(Bizot,Cayla[9]).ПослеиммунизациикурэритроцитамиSd(a ++ ) сыворотки их крови приобретали способность агглютинировать все образцы эритроцитовSd(a + )человекавнепрямойантиглобулиновойпробе(Bizot,Cayla[9]).

Отделяемую фракцию анти-Tn-антител обнаружили Lockyer и соавт. [54] в сыворотке крови африканского иероглифового питона Python sebae. Змеи этого вида неядовитые. Осталось неизвестным, содержатся ли антитела (агглютинирующие или гемолизирующие) в сыворотке крови ядовитых змей, яд которых при попадании в кровь человека вызывает гемолиз эритроцитов.

Исследования с различными образцами лектинов показали, что степень экспрессии антигена Sd a зависит от того, посредством какой связи, α или β, N-ацетилгалактозамин соединяется с галактозой (Bird, Wingham [7], Uhlenbruck

исоавт. [109], Donald и соавт. [30]).

В1970 г. Morton и Terry [67] выделили Sd a-активный субстрат из мочи человека посредством преципитации этиловым спиртом. Десятью годами позднее было показано, что Sd a-активность мочи обусловлена белком Тамма – Хорсфалла, который содержится в моче в больших количествах (Soh и соавт. [98], Kokot, Dulawa [50]). Этот гликопротеин имеет мол. массу 78 кДа. Он состоит из 70 % белков и 30 % углеводов и выделяется почками в виде N-гликана (Fletcher [36]), в котором 7 из 8 участков гликозилированы (Van Rooijen и соавт.

916

[111]). Одна из форм этого гликопротеина, получившая название уромодулин, присутствует в моче беременных женщин и относится к ингибиторам пролиферации Т-лимфоцитов (Easton и соавт. [35]).

Аминокислотная последовательность протеина Тамма – Хорсфалла у лиц

Sd(а + ) и Sd(а −) оказалась идентичной (Morgan и соавт. [64], Soh и соавт. [98]).

Протеин, обладающий Sd а-серологической активностью, выделен посредством иммунопреципитации лектином Dolichos biflorus и Helix pomatia, а также иммунопреципитацией аллогенными анти-Sd а-антителами (Morgan и соавт. [64], Serafini-Cessi, Conte [90]). У лиц Sd(а + ) белок Тамма – Хорсфалла содержал до

2 % N-ацетилгалактозамина, у лиц Sd(а −) он отсутствовал.

Donald и соавт. [29, 31, 32] изучили углеводные остатки протеина Тамма – Хорсфалла, выделенного из мочи лиц Sd(а + ) и Sd(а −). Они представлены тетра- и пентасахаридами. Пентасахариды из мочи лиц Sd(а −) не обладали специфической серологической активностью, тогда как пентасахариды из мочи Sd(а + ) ингибировали аллогенные анти-Sd а-антитела и лектин Dolichos biflorus. Исследователи пришли к выводу, что экспрессия антигена Sd а обусловлена N-ацетилгалактозаминовыми остатками. Их отщепление приводило к исчезновению Sd а-серологической активности (Cartron и соавт. [15], Donald и соавт. [33]).

Cartron и Blanchard [15] установили, что гликофорины А и В, присутствующие на эритроцитах Sd(а ++ ), имеют более высокую мол. массу по сравнению с гликофоринами эритроцитов Sd(а + ) и Sd(а −). Это обусловлено дополнительным N-ацетилгалактозаминовым остатком, присоединенным к гликофоринам через β-связь (Blanchard и соавт. [11]). Авторы полагают, что именно увеличение мол. массы за счет N-ацетилгалактозамина обусловливает способность пентасахаридов из эритроцитов Sd(а ++ ) ингибировать лектин Dolichos biflorus. Это свойство было также у гликофоринов А и В с измененной структурой на эритроцитах Sd(а ++ ) (Blanchard и соавт. [10, 11, 14], Herkt и соавт. [46]). На эритроцитах Cad + выявлена более высокая мол. масса фактора деградации комплемента (decay acceleration factor, CD55). Spring и соавт. [100] связывают это также с присутствием дополнительных N-ацетилгалактозаминовых групп. Кроме того, на эритроцитах Cad + выявлен необычный ганглиозид, обладающий способностью ингибировать активность лектинов. По своей природе он является сиалопараглобозидом. Структура его терминального участка идентична структуре аналогичного участка Sd а-актвного пентасахарида, входящего в состав протеина Тамма – Хорсфалла (Blanchard и соавт. [12], Gillard и соавт. [42]). Этот ганглиозид не найден на эритроцитах Sd(а −), в связи с чем Blanchard и соавт. [12] пришли к заключению, что указанный ганглиозид играет определяющую роль в экспрессии антигена Sd а.

Полагают, что ген Sd а кодирует β1,4-N-ацетилгалактозаминтрансферазу, которая присоединяет соответствующие остатки к трисахаридной структурепредшественнику. Фермент, проявляющий подобную активность, обнаружен в

917

моче лиц Sd(а + ). В моче лиц Sd(а −) этот фермент отсутствовал (Donald и соавт. [31], Serafini-Cessi и соавт. [92]).

Ацетилгалактозаминтрансфераза обнаружена в почках (Piller и соавт. [79]) и толстой кишке человека (Malagolini и соавт. [59], Piller и соавт. [80]), почках морских свинок (Serafini-Cessi и соавт. [91], Soh и соавт. [97]). Препараты из почек человека ускоряли присоединение N-ацетилгалактозамина к сиалозилпараглобозиду. По отношению к нативному гликофорину А ацетилгалактозаминтрансфераза активности на проявляла, хотя указанный гликофорин считается хорошим акцептором подобных терминальных углеводных групп (Blanchard и

соавт. [12], Piller и соавт. [79], Watkins [117]).

Субстрат, кодирующий Sd а-трансферазу, удалось получить из РНК слизистой оболочки желудка человека с помощью обратной ПЦР. При этом были использованы праймеры, имитирующие аминокислотную последовательность предполагаемого гена мышиной β1,4-N-ацетилгалактозаминтрансферазы (Dohi и соавт. [28]). Исследователи не исключают, что антиген Sd а может получить статус самостоятельной групповой системы как только будет установлена хромосомная локализация гена, кодирующего Sd а-трансферазу.

Вещество Sd а играет определенную роль в биологии человека. Cartron и соавт. [16] отметили, что эритроциты Sd(а ++ ) членов семьи Cad обладали повышенной устойчивостью к инвазии малярийным паразитом Plasmodium falciparum. Для проникновения плазмодия через мембрану эритроцитов требуется присутствие гликофоринов,содержащихдоступныедлясвязываниясиаловыекислоты.Однакоучастки выхода сиаловых кислот, расположенные на О-гликанах эритроцитов Cad +, экранированы дополнительными N–ацетилгалактозаминовыми группами, поэтому недоступныдляхимическихрецепторовплазмодиямалярии(Cartronисоавт.[16]).

По данным Pak и соавт. [76], белок Тамма – Хорсфалла, несущий Sd а-специфичность, препятствует адгезии кишечной палочки Escherihia coli к эпителию мочевыводящих путей и тем самым играет важную роль в защите организма от урогенитальной инфекции из кишечного тракта. Этот белок специфически связывается с чувствительными ворсинками эшерихий, блокирует их и лишает эти бактерии способности прилипать к эпителию.

Duclos

Антиген Duclos описан Habibi и соавт. [44] в 1978 г. Антитела в сыворотке миссис Duclos реагировали со всеми образцами эритроцитов, за исключе-

нием собственных и эритроцитов RhnullU − и RhmodU −. Женщина имела фенотип DCceeU weak. Сначала антиген Duclos включили в систему Rh под номером

Rh38. Позднее были получены анти-Duclos-подобные мышиные МКА (Von dem Borne и соавт. [116]), специфичность которых отличалась от специфичности анти-Duclos (LePennec и соавт. [51]). С помощью иммуноблоттинга с мышиными МКА было показано, что антигенные детерминанты Duclos расположены на Rh-ассоциированном гликопротеине (RhAG) (Mallinson и соавт. [60]).

918

Полученные данные послужили основанием для исключения антигена Duclos из системы резус. По этой причине обозначение Rh38 упразднено, а антиген Duclos включен в серию 901 под номером 901013.

PEL

Первые 2 образца анти-PEL-антител обнаружили Daniels и соавт. [26] у канадских женщин французского происхождения. Обе женщины имели фенотип PEL −, у одной из них 3 сибса также были PEL −. Сравнение 2 других вскоре найденных образцов анти-PEL-антител показало, что они отличаются по специфичности. В частности они не реагировали с эритроцитами первой пропозиты, однако давали слабоположительные реакции с эритроцитами PEL − членов других семей, также франко-канадского происхождения. Второй тип анти-PEL- антител был обозначен как анти-МТР.

Все 4 носителя анти-PEL- и анти-МТР-антител получали гемотрансфузии, 3 имели также беременности. Эритроциты всех новорожденных PEL +, родившихся у упомянутых женщин, показывали отрицательную прямую антиглобулиновую пробу, признаков ГБН не отмечено. Выживаемость радиоактивно меченных эритроцитовPEL +ворганизмесенсибилизированныхсоответствоваланормальной.

MAM

Montgomeryисоавт.[62]наблюдали2женщин,какзатемвыяснилось, MAM −, в сыворотке которых имелись антитела с высокой частотой реагирования, получившие обозначение анти-МАМ. Одна женщина была ирландского происхождения, другая – арабского. Вторая женщина имела сестру MAM −, у которой вслед- ствиевсегооднойбеременноститакжеобразовалисьанти-MAM-антитела.Третья выявленная женщина с наличием анти-MAM-антител имела 3 беременности. Ни у одной из сенсибилизированных женщин гемотрансфузий не было.

Антитела анти-MAM относят к клинически значимым. У третьего ребенка одной из пропозит развилась тяжелая ГБН, для лечения которой потребовалось внутриутробное переливание крови. У новорожденного другой пропозиты наблюдали тромбоцитопению, обусловленную анти-НРА-1а-тромбоцитарными антителами и, воз- можно,присутствовавшимивсывороткекровиродильницыанти-МАМ-антителами.

Два образца анти-МАМ-антител представляли собой смесь IgG1 и IgG3, в третьей сыворотке присутствовали еще и IgG2 (Montgomery и соавт. [62]).

Посредством иммуноблоттинга показано, что антигенные детерминанты МАМ расположены в области диффузных полос, соответствующих протеину с мол. массой 23‒80 кДа, в сочетании с независимой от них полосой, соответствующей протеину с мол. массой 18 кДа. Помимо эритроцитов, антиген МАМ присутствует на лимфоцитах, гранулоцитах, моноцитах и тромбоцитах периферической крови. Он найден в большинстве лейкемических клеточных линий, а также линий фибробластов и эндотелиальных клеток, в эмбриональных клетках почек. В эпителиальных клеткахантигенМАМнеобнаружен(Montgomeryисоавт.[62]).

919

Список литературы

1.Applewhaite F., Ginsberg V., Gerena J. et al. A very frequent red cell antigen, At a // Vox Sang. – 1967. – V. 13. – P. 444‒445.

2.BaconJ.,SherrinD.,WrightR.G.Casereport:anti-Jr a //Transfusion.–1986.–V.26.–P.543– 544.

3.Bird G.W.G. Lectins in immunohematology // Transfus. Med. Rev. – 1989. – V. 3. –

P.55–62.

4.Bird G.W.G., Wingham J.Anti-Cad lectin from the seeds of Leonurus cardiaka // Clin. Lab. Haematol. - 1979. – V. 1. – P. 57–59.

5.Bird G.W.G., Wingham J. Cad (super Sd a) in British family with Eastern connections: a note on the specificity of the Dolichos biflorus lectin // J. Immunogenet. – 1976. – V. 3. –

P.297–302.

6.Bird G.W.G., Wingham J. Haemagglutinins from Salvia // Vox Sang. – 1974. – V. 26. –

P.163–166.

7.Bird G.W.G., Wingham J. Some serological properties of the Cad receptor // Vox Sang. – 1971. – V. 20. – P. 55–61.

8.Bizot M. Comportement de quelques extraits de gasteropodes terrestres vis-a-vis des substances de specificite Sd a // Rev. Franc. Transfus. – 1972. – V. 15. – P. 371–375.

9.Bizot M., Cayla J.P. Hetero-anticorps anti-Cad du poulet // Rev. Franc. Transfus. – 1972. –

V.15. – P. 195–202.

10.Blanchard D., Capon C., Leroy Y. et al. Comparative study of glycophorin A derived O-glycans from human Cad, Sd(a + ) and Sd(a−) erythrocytes // Biochem. J. – 1985. –

V.232. – P. 813–818.

11.Blanchard D., Cartron J.-P., Fourner B. et al. primary structure if the oligosaccharide determinantofbloodgroupCadspecificity//J.Biol.Chem.–1983.–V.258.–P.7691–7695.

12.BlanchardD.,PillerF.,GillardB.etal.Identificationofanovelgangliosideonerythrocytes with blood group Cad specificity // J. Biol. Chem. –1985. – V. 260. – P. 7813–7816.

13.Brown A., Harris P., Daniels G.L. et al. At a (August) and El (Eldr) are synonymous // Transfusion. – 1983. – V. 23. – P. 123–125.

14.Cartron J.-P., Blanchard D. Association of human erythrocyte membrane glycoproteins with blood group Cad specificity // Biochem. J. – 1982. – V. 202. – P. 497–504.

15.Cartron J.-P., Kornprobst M., Lemmonier M. et al. Isolation from human urines of a mucin with blood group Sd a activity // Biochem. Biophys. Res. Commun. – 1982. – V. 102. –

P.331–336.

16.Cartron J.-P., Prou O., Luilier M., Soulier J.P. Susceptibility to invasion by Plasmodium

falciparum of some human erythrocytes carrying rare blood group antigens // Brit.

J.Haemat. – 1986. – V. 55. – P. 639–647.

17.Cash K., Brown T., Sausalis L. et al. Severe delayed hemolytic transfusion reaction secondary to anti-At a // Transfusion. – 1999. – V. 39. – P. 834–837.

18.Cazal P., Monis M., Bizot M. Les antigenes Cad en 1976 // Rev. Franc. Transfus. Immunohemat. – 1977. – V. 20. – P. 165–173.

19.Cazal P., Monis M., Bizot M. Les antigenes Cad et leurs rapports aves: les antigenes A. // Rev. Franc. Transfus. – 1971. – V.14. – P.321-324.

20.Cazal P., Monis M., Caubel J., Beives J. Polyagglutinabilite hereditare dominante: antigene prive (Cad) correspondant a un anticorps public e a une lectine de Dolichos biflorus // Rev. Franc. Transfus. – 1968. – V. 11. – P. 209–221.

21.Clancey M., Bonds S., Van Eys J. A new example of anti-Lan and two families with Lannegative members // Transfusion. – 1972. – V. 12. – P. 106–108.

22.Colledge K.I., Kaplan H.S., Marsh W.L. Massive transfusion of Sd(a + ) blood to a recipient with anti-Sd a, without clinical complication [Abstract] // Transfusion. – 1973. –

V.13. – P. 340.

920