Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

Онтогенез АВО-антигенов

Подобно антителам, антигены системы АВО в момент рождения развиты не полностью, хотя у эмбрионов их обнаруживают уже на 5-й неделе внутриутробного развития. Эритроциты пуповинной крови реагируют с антителами анти-А и анти-В слабее по сравнению с клетками взрослых лиц (Witebsky и Engasser [97, 233], Romano и соавт. [187]). Эритроциты некоторых новорожденных группы А по своей агглютинабельности могут приближаться к эритроцитам А2. У 6–18-месячного ребенка агглютинабельности эритроцитов повышается, серологические характеристики соответствуют группе А1. Эритроциты новорожденных А1 лучше реагируют с лектином Dolichos biflorus, чем с антителами анти-А1 аллогенного происхождения. Эритроциты детей А2 более интенсивно взаимодействуют с антителами анти-А,В, чем с антителами анти-А, и тем самым показывают сходство с подгруппой Ах. Антиген Н на эритроцитах новорожденных выражен почти так же, как и у взрослых.

Эритроциты новорожденных А1 несут существенно меньшее количество А-антигенных участков (табл. 3.5) по сравнению с клетками взрослых лиц А1 (Economidou и соавт. [95]). В то же время более высокая активность А1-трансферазы зарегистрированавсывороткахпуповиннойкрови,чемвсывороткахкровивзрослых.

Слабые реакции эритроцитов новорожденных с антителами анти-А и анти-В можно объяснить тем, что указанные антитела связываются с эритроцитами не двумя, а одним Fc-участком. На эритроцитах детей цепи, несущие антигены А и В, недостаточно разветвлены. По мере разветвления меняется пространственная конфигурация эпитопов, их количество увеличивается и они становятся доступнее для активных участков антител. Повышение агглютинабельных свойств эритроцитов происходит постепенно в течение первых 6–18 мес. жизни. Концентрация β1→6-глюкозаминилтрансферазы, участвующей в формировании разветвления, у новорожденных низкая. Содержание этого фермента достигает уровня его у взрослых в течение первых 6–18 мес. жизни.

Таблица 3.5

Плотность распределения А-антигена на эритроцитах

76

Клиническое значение системы АВО

Более 50 % тяжелых посттрансфузионных осложнений обусловлено АВОнесовместимостью донора и реципиента. Переливание иногруппной крови стоит на первом месте в числе причин посттрансфузионных осложнений. Второе место занимаетнесовместимостьпофакторамрезус,третьеместозанимаетфакторКелл.

Переливание не совместимых по АВО-системе эритроцитов в дозе 60–120 мл взрослому реципиенту может привести к летальному исходу (Lee и соавт. [140]).

Перелитые иногруппные эритроциты разрушаются в кровяном русле реципиента под действием изогемагглютининов. Микроагглютинаты, стромы лизированных эритроцитов, свободный гемоглобин, вышедший из эритроцитов вследствие лизиса, забивают почечные канальцы, артериолы легких и других паренхиматозных органов, приводят к почечной и далее полиорганной недостаточности (В.А. Аграненко и Н.Н. Скачилова [3], Lee и соавт. [140], Linden и со-

авт. [147], Mollison и соавт. [159], Pineda и соавт. [182]).

В.А. Аграненко и Н.Н. Скачилова [3], М.А. Умнова [12], Mollison и соавт. [159] наблюдали тяжелые гемолитические реакции при переливании иногруппной АВО-совместимой цельной консервированной крови. Осложнения возникали за счет изогемагглютининов, содержащихся в плазме перелитой крови. Подобные осложнения описаны после массивных трансфузий плазмы, криопреципитата, концентрата тромбоцитов от доноров группы О(I) реципиентам другой группы.

Целесообразно упомянуть, что некоторые лица О(I) содержат наряду с изогемагглютининами иммунные анти-А- и анти-В-антитела в очень высоком титре (1 : 3000 и более). Таких людей называют опасными универсальными донорами. Именно переливание их крови вызывает упомянутые выше осложнения.

Поданнымзарубежныхспециалистов(IssittиAnstee[122]),АВО-несовместимые гемотрансфузиивстречаютсясчастотой1на10 000переливаний.ВклиникахРоссии рискпосттрансфузионныхосложненийсоставляет1на12 500трансфузийэритроцитов(С.И.Донсковидр.[19]).

Несмотря на предельную простоту методики и высокое качество современных тест-систем, ошибки при определении группы крови все еще происходят (Н.И. Васильев [6], Н.Г. Завгородний и Т.Л. Погодина [28], Е.А. Зотиков [30],

П. Проданов [54], А.Е. Скудицкий [58], Chiaroni и соавт. [82], Heal и соавт. [117], Linden и соавт. [147], Migeot и соавт. [152]). По единому мнению специалистов причиной ошибок является так называемый человеческий фактор (см. Ошибки при определении групп крови).

При трансплантации костного мозга различия по системе АВО не учитывают, поскольку взвесь донорских костномозговых клеток, освобожденная от эритроцитов, не реагирует с изогемагглютининами реципиента.

Как это ни парадоксально, но разногруппные по АВО пересадки костного мозга нередко дают лучшие результаты, чем одногруппные (Л.С. Любимова

[39], Л.П. Порешина [52]).

77

Известны случаи, когда после трансплантации органа (почка, сердце, печень, легкое, поджелудочная железа, селезенка) в сыворотке крови реципиентов появлялись изогемагглютинины донорского происхождения. Антитела вырабатывались на 7–10 день после трансплантации, несмотря на то, что с целью профилактики реакции трансплантат против хозяина реципиенты получали циклоспорин. Появившиеся антитела вызывали внутрисосудистый гемолиз различной степени тяжести вплоть до летального исхода (Е.А. Зотиков и др. [31–33],

Л.П. Порешина и др. [52, 53], Eiz-Vesper и соавт. [96]).

Антигены системы АВО экспрессированы также на тромбоцитах (Curtis и соавт. [86], Stokelberg и соавт. [205]). Трансфузии тромбоцитов, не совместимых по АВО, не дают ожидаемого клинического эффекта (Murphy [167]).

Несовместимость по системе АВО имеет значение не только в трансфузиологии, но и в акушерской практике, поскольку, хотя и редко, вызывает гемолитическую болезньноворожденных(Hariисоавт.[116]).ГБНприразногруппномсочетаниимать– плодрегистрируютрежеумонголоидов,чемуевропеоидов(Wonget.al.[234]).

Аутоантитела системы АВО

Аутоиммунные антитела к антигенам системы АВО встречаются редко. Daniels [87] приводит 6 случаев обнаружения аутоантител, идентифицированных в одном из медицинских центров Англии в течение 32 лет при анализе 4668 больных с антиэритроцитарными антителами.

Описаны аутоантитела, реагировавшие с эритроцитами А и В взрослых лиц, но не реагировавшие с эритроцитами новорожденных. Эти антитела имели специфичность анти-AI и анти-BI (Spalter и соавт. [199]). В некоторых случаях аутоанти-А- и аутоанти-В-антитела вызывали клинически регистрируемый внутрисосудистый гемолиз (Daniels [87], Issitt и Anstee [122]). Низкоаффинные аутоантитела анти-А и анти-В выделены из очищенных фракций IgG и IgM, полученных из сывороток лиц В и А соответственно.

Присутствие аутоантител анти-А и анти-В затрудняет определение группы крови (Spruell и соавт. [200]).

Антитела, не имеющие клинического значения Экстраагглютинины

α1 и α2

Примерно у 1–8 % лиц А2 и 25–36 % лиц А2В в сыворотках крови присутствуют экстраагглютинины α1, способные агглютинировать эритроциты А1 и А1В. У людей А1 и А1В крайне редко, менее чем в 0,01 % случаев, встречаются экстраагглютинины α2, агглютинирующие эритроциты А2. Экстраагглютинины – холодовые антитела, при температуре 37  оС мало активны, гемолитических реакций in vivo не вызывают. Клинического значения экстраагглютинины не имеют, поэтому в дифференциации доноров и реципиентов по подгруппам крови А1 и А2 нет необходимости.

78

Анти-Н

Антитела анти-Н иногда присутствуют в сыворотке крови лиц А1 и А1В. Они представляют собой IgM, имеют низкий температурный оптимум и, как правило, невысокийтитр.Впротивоположностьизогемагглютининамαиβантителаанти-Н неспособнывызватьгемолизэритроцитовin vivo (LePenduисоавт.[137,138]).

Клинически значимые анти-Н-антитела продуцируют лишь лица чрезвычайно редкого фенотипа Oh (Bombay), лишенные групповых антигенов А, В и О. Davey и соавт. [89], Moores и соавт. [161], Whitsett и соавт. [223] описали случаи ГБН у женщин Oh (Bombay) индийского происхождения.

Антитела анти-Н реагируют с эритроцитами А2, поэтому в прежние годы их иногда обозначали как α2 или анти-А2. Такое обозначение неточно, поскольку антитела, специфически взаимодействующие только с клетками подгруппы А2, неизвестны. Символом А2 обозначают фенотип, но не самостоятельный антиген.

Тест-системы анти-А, -В и -АВ

Втечение многих десятилетий для определения группы крови АВО использовали реактивы, содержащие поликлональные антитела: сыворотки и плазму крови, асцитическую жидкость, экссудаты и транссудаты. В учреждениях службы крови отбирали доноров с высокоактивными изогемагглютининами (Р.М. Уринсон [61], К.Н. Климова и др. [34], М.А. Умнова [12]). За рубежом широко применяли искусственную иммунизацию доноров добровольцев группоспецифическими веществами А и В (Доссе [25], Contreras и соавт. [85].

Ряд методических приемов для концентрации антител, повышения их авидности и устранения неспецифических реакций предложили Р.М. Уринсон [61], К.Н. Климова и др. [34], В.А. Мороков [49].

Прокоп и Гёллер [56] получали ксеногенные анти-А- и анти-В-антитела иммунизацией животных, в том числе рыб.

Вначале 1980-х годов Farr [99] с помощью гибридомной технологии созданы моноклональные антитела, которые были воспроизведены и нашли широкое применение в медицинской практиктике многих стран (Sacks и соавт. [191], Voak и соавт. [217]), включая Россию (Е.И. Дерюгина и др. [14, 16, 17],

И.В. Дубинкин и др. [27]). В настоящее время реагенты на основе МКА почти полностью заменили аллогенные сыворотки. Их несомненными достоинствами являются стандартность, высокая активность, отсутствие сопутствующих контаминирующих протеинов.

Тест-системы на основе МКА часто готовят смешением антител, продуцируемых несколькими клеточными линиями, повторяя тем самым поликлональную композицию аллогенных антител, созданных природой. Наряду с очевидными достоинствами МКА АВО имеют существенный недостаток. Некоторые из них проявляют способность перекрестного реагирования, что затрудняет использование их в реакции адсорбции – элюции (Beck и соавт. [71, 72],

Kennedy и соавт. [127], Kikergaard и соавт. [128, 129]).

79

Лектины

Вещества, вызывающие агглютинацию А-, В- или Н-положительных эритроцитов человека, были найдены во многих растениях, водорослях, грибах, а также в тканях некоторых червей, улиток, икре лососевых рыб, сыворотке крови угрей. Они были названы лектинами (табл. 3.6). Установлено, что они взаимодействуют с терминальными моносахаридными группировками. Лектины из Dolichos biflorus и Ulex europaeus используют для дифференцировки подгрупп А в исследовательских целях (П.Н. Косяков [35], Прокоп, Гёллер [56], Daniels [87], Issitt,Anstee [122], Sringarm и соавт. [201]), в рутинной практике определе-

ния групп крови АВО их не применяют.

Таблица 3.6

Лектины с анти-А-, анти-В-, анти-АВ- и анти-Н-активностью

Антиген С

СуществованиеантигенаСвсистемеАВОможносчитатьдоказанным.ОнсодержитсявэритроцитахA(II),B(III)иAB(IV).ВэритроцитахO(I)антигенСотсутствует.

Основанием для такого утверждения служат эксперименты Wiener и соавт. [213, 224, 228–230], показавшие, что сыворотки Оαβ(I), помимо α- и β-агглютининов, реагирующих с эритроцитами А и В, содержат еще одну разновидность естественных групповых антител – С-агглютинины (по Винеру анти-С- антитела), которые реагируют с эритроцитами А и В перекрестно [224, 229, 230].

80