Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

эритроцитами отчасти зависит от сиаловых кислот. В эритроцитах лиц, имеющих редкие группы крови En(a −) и M k по системе MN, содержание сиаловой кислоты низкое,иантигеныCh / Rgнанихтакжеслабовыражены(Tippettисоавт.[93]).

Отмечена низкая экспрессия указанных детерминант на эритроцитах пуповинной крови, однако сыворотки крови новорожденных ингибировали антитела анти-Ch и анти-Rg так же активно, как и плазма взрослых людей (Atkins [1], Middleton, Crookston [54], Nordhagen и соавт. [61].

Существуют 4 основных серологических метода для определения фенотипа

Ch / Rg (Daniels [15]).

––прямая агглютинация исследуемых эритроцитов реагентами анти-Ch и анти-Rg;

––нейтрализация активности стандартных реагентов анти-Ch и анти-Rg плазмой обследуемого лица с последующим учетом результатов по пассивной агглютинации стандартных эритроцитов;

––агглютинация эритроцитов, сенсибилизированных собственным комплементом;

––агглютинация аллогенных эритроцитов, сенсибилизированных комплементом обследуемого индивида.

Антигены Ch1, Ch2 и Ch3 выявляют используя нативные эритроциты, без предварительной сенсибилизации комплементом (Atkins [1]).

Предложено несколько методов определения аллотипов С4: иммунофиксация десиалилированной плазмы, электрофорез в полиакриламидном геле (SDS-PAGE), иммуноблоттинг с антителами анти-С4, анти-Ch и анти-Rg (Giles, Robson [35], Roos и соавт. [78, 79]).

Антитела анти-Ch и анти-Rg

Антителаанти-ChобнаружилиHarris,Tegoli,Swansonисоавт.в1967 г.[40].Все образцы сывороток анти-Ch, имевшихся в распоряжении авторов, были получены от реципиентов, которым производили гемотрансфузии. Шесть из 7 сывороток содержали моноспецифические анти-Ch-антитела. Авторы квалифицировали их как нечеткие из-за низкой авидности положительных реакций. Выраженность антигена, открываемого антителами анти-Ch, сильно варьировала. В некоторых случаях слабоположительные пробы трудно было отличить от отрицательных. Пробы с адсорбциейантителнаэритроцитахтакженедавалистабильныхрезультатов.

Позднее Middleton и Crookston [54] обнаружили, что активность анти-Ch- антител ингибируется плазмой крови, полученной от лиц Ch +. Плазма лиц Ch− анти-Ch-антитела не ингибировала.

Atkins [1] отметил, что выраженной ингибирующей способностью обладает плазма лиц и со слабоэкспрессированным на эритроцитах антигеном Ch. Таким образом было показано, что реакция нейтрализации специфических анти-Ch- антител плазмой исследуемого лица более приемлема для определения антигенов Chido, чем прямая реакция гемагглютинации.

771

Molthan [56] и Swanson [87] установили, что эритроциты Ch − можно преобразовать в Ch + путем инкубации в плазме лиц Ch +, что еще раз подчеркивает происхождение этого антигена из плазмы.

В 1976 г. Longster и Giles [47] описали анти-Rg-антитела, напоминавшие антиCh. Они выявляли антиген, имевший частоту приблизительно 97 %, ингибировались плазмой от лиц Rg +. Экспрессия антигена, подобно Ch, также варьировала в широких пределах. Около 3 % обследованных имели фенотип Ch −Rg −. Оказалось, что этот фенотип ассоциирован с наличием у таких лиц антигена HLA-B8 системы HLA(Gilesисоавт.[32],Jamesисоавт.[43]).ГенRg наследовалсякодоминантно.

Образцы плазмы лиц Rg + проявляли неодинаковую активность в реакции ингибиции специфических антител. Как было установлено Giles и соавт. [22, 23, 24], Nordhagen и соавт. [62, 63, 64], неполная ингибиция антител обусловлена присутствием в сыворотках нескольких разновидностей антител анти-Ch и анти-Rg. Использование стандартизированных реагентов давало более удовлетворительные результаты (Lomas и соавт. [46], Rittner и соавт. [76]).

Особенностью антител системы Chido / Rodgers является их низкая авидность в реакции с нативными эритроцитами, даже если антитела имеют высокий титр. Эритроциты, предварительно сенсибилизированные комплементом в растворе сахарозы, приобретают способность непосредственно агглютинироваться указанными антителами. Этот методический прием часто используют при фенотипировании по Chido / Rodgers и скрининге антител этой системы.

При установлении специфичности антител большое значение придают тестам на ингибицию активности антител смесями сывороток от нескольких лиц. Для ее проведения достаточно 30-минутной экспозиции тестовой сыворотки с исследуемой смесью при комнатной температуре (Issitt, Anstee [42]). Далее активность антител исследуется повторно с эритроцитами, сенсибилизированными комплементом. Исчезновение активности указывает на присутствие антиге-

нов системы Chido / Rodgers.

Практически все сыворотки анти-Rg содержат антитела анти-Rg1 и антиRg2. Все сыворотки анти-Ch содержат анти-Ch1-антитела, которые часто оказываются моноспецифическими (Giles и соавт. [22, 23, 33]).

Частота антител в анти-Ch-сыворотках составила: анти-Ch4 – 75 %, антиCh2 – 25 %, анти-Ch5 – 16 %, анти Ch3 – 10 %.

Обнаружено всего по два образца сывороток с антителами анти-Ch6 и анти-WH.

Антитела анти-Ch обычно находили у лиц с нулевым фенотипом –

Ch: −1, −2, −3, −4, −5, −6. Антитела анти-Rg присутствовали у индивидов Rg: −1, −2.

Описаны анти-Ch2 + Ch5-антитела у человека, имевшего фенотип

Ch:1, −2,3,4, −5,6 (Giles и соавт. [33]). Анти-Ch2 + Ch4-антитела найдены у индивида Ch:1, −2, 3, −4, 5, 6 (Fisher и соавт. [21]), анти-Ch1-антитела – у лица группы Ch: −1, −2, −3, −4, 5, 6 (Poole и соавт. [71]). Комбинированные анти-Ch1 + Ch3 + Ch4-

антитела присутствовали у индивида Ch: −1, −2, −3, −4,5 (Poole и соавт. [71]).

772

Всыворотках крови лиц Ch −Rg − (С4-дефицитных) найдены антитела, которые отличались от всех других антител системы Ch / Rg (Giles, Swanson [36]).

Вдвух сыворотках анти-Rg, содержавших антитела анти-Rg1 и анти-Rg2, были найдены сопутствующие антитела, открывающие антигенные детерминанты на β-цепях компонента С4 (Robson и соавт. [77]). Антитела не удалось отделить путем адсорбции от анти-Rg2, что указывает на определенную связь между антигеном Rg2 и антигенами β-цепи С4.

К настоящему времени получено большое количество мышиных моноклональных антител к С4-компоненту комплемента человека. Некоторые из них обладают специфичностью анти-Ch1, анти-Rg1 и анти-Ch3 (Chrispeels и соавт. [13], Giles и соавт. [30, 31]).

Клиническое значение

Антитела системы Chido / Rodgers чаще представлены иммуноглобулинами субклассов IgG2 и IgG4 (Szymanski и соавт. [88]), в связи с чем их не относят к трансфузионно опасным. Указанные антитела ни разу не описаны в качестве причины посттрансфузионных осложнений и ГБН.

Тесты с радиоактивной меткой показали, что сроки циркуляции эритроцитов Ch +, введенных реципиентам, имеющим анти-Ch-антитела, не отличаются от контрольных (Harris и соавт. [40], Middleton [53], Moore и соавт. [57], Nordhagen, Aas [60], Silvergleid и соавт. [84], Strohm, Molthan [86],Tilley и соавт. [91]).

Антитела указанной системы описаны как причина анафилактических реакций, которые развились после переливания свежезамороженной плазмы

(Lambin и соавт. [44], Westhoff и соавт. [94], Wibaut и соавт. [96]).

Биологическая роль

Компонент С4, как и другие факторы комплемента, участвует в системе иммунологического надзора, обеспечивая постоянство внутренней среды организма, элиминацию стареющих и перерождающихся клеток.

Каскадная активация факторов 1–9 комплемента во взаимодействии с антителами приводит к разрыву мембраны клеток-мишеней и их гибели.

Связь с заболеваниями

Дефицит С4-компонента комплемента и сопровождающий его нулевой фенотип Ch−Rg− наблюдают при системной красной волчанке (СКВ). Одной из причин этого заболевания является неэффективная элиминация аутоиммунных комплексов из-за отсутствия компонента С4 (Moulds [58], Porter [72]).

У больных СКВ наблюдалась делеция гена, контролирующего синтез С4А (Dunckley и соавт. [17], Fan и соавт. [19], Fielder и соавт. [20], O’Neill и соавт. [65], Reveille и соавт. [74]).

Симптомы СКВ существенно чаще проявлялись у лиц Rg−, гомозиготных по гаплотипу C4A*Q0, чем у индивидов Rg + (Edwards-Moulds и соавт. [18]).

773

Выявлена также корреляция между гаплотипом C4A*Q0 и другими видами аутоиммунной патологии: ревматоидным артритом, подострым склерозирующим панэнцефалитом, хроническим активным гепатитом и инсулин-зависимым диабетом (Schenkel-Brunner [83]).

Список литературы

1.Atkins C.J. Chido and Rodgers: a serological study of their variations on the red cells and plasma // MSc thesis. – Brunel University, 1985.

2.Atkinson J.P., Chan A.C., Karp D.R. et al. Origin of the fourth component of complement related Chido and Rodgers blood group antigens // Complement. – 1988. –V. 5. – P. 65–76.

3.AwdehZ.I.,AlperC.A.Inheritedstructuralpolymorphismofthefourthcomponentofhuman complement // Proc. Natl.Acad. Sci. USA. – 1980. – V. 77. – P. 3576–3580.

4.Barba G., Rittner C., Schneider P.M. Genetic basis of human complement C4Adeficiency: detection of a point mutation leading to nonexpression // J. Clin. Invest. – 1993. – V. 91. –

P.1681–1686.

5.BarbaG.M.R.,Braun-HeimerL.,RittnerC.,SchneiderP.M.AnewPCR-basedtypingofthe Rodgers and Chido antigenic determinants of the fourth component of human complement // Eur. J. Immunogenet. – 1994. – V. 21. – P. 325–339.

6.Belr K.T., Carroll M.C., Porter R.R. The structural basis of the multiple forms of human complement component C4 // Cell. – 1984. – V. 36. – P. 907–914.

7.Belr K.T., Yu C.Y., Carroll M.C., Porter R.R. Polymorphism of human component complement C4 // Immunogenetics. – 1985. – V. 21. – P. 173–180.

8.Braun L., Schneider P.M., Giles C.M. et al. Null alleles of human complement C4: evidence forpseudogenesattheC4AlocusandforgeneconversionattheC4Blocus//J.Exp.Med.– 1990. – V. 171. – P. 129–140.

9.Bruun-Petersen G., Lamm L.U., Jakobsen B.K., Kristensen T. Genetics of complement C4: two homoduplication haplotype C4S C4S and C4F C4F in a family // Hum. Genet. – 1982. – V. 61. – P. 36–38.

10.Carroll M.C., Alper C.A. Polymorphism and molecular genetics of human C4 // Brit. Med. Bull. – 1987. – V. 43. – P. 50–65.

11.Carroll M.C., Belt T., Palsdottir A., Porter R.R. Structure and organization of C4 genes // Phil. Trans. R. Soc. London B. – 1984. – V. 306. – P. 379 –388.

12.Carroll M.C., Palsdottir A., Belt K.T., Porter R.R. Deletion of complement C4 and steroid 21-hydroxylasegenesintheHLAclassIIIregion//EMBOJ.–1985.–V.4.–P.2547–2552.

13.Chrispeels J., Grabbe J., Stradmann B. et al. Rapid purification of the fourth component of human complement and production of C4-specific monoclonal antibodies including isotype-specific ones [Abstract] // Complement. – 1987. – V. 4. – P. 142.

14.Crookston M.C., Tilley C.A. Antigens acquired from plasma by red blood cells and lymphocytes: ABH, Lewis, and C4 (Chido and Rodgers) // Blood Groups and Other Red Cell Surface Markers in Health and Disease / C. Salmon, ed. – N.Y: Masson, 1982. –

P.111–123.

15.DanielsG.L.HumanBloodGroups.–2-nded.–Oxford:BlackwellScience,2002.–560 p.

16.Dodds A.W., Law S.-K.A. Porter R.R. The purification and properties of some less common allotypesofthefourthcomponentofhumancomplement//Immunogenetics.–1986.–V.24.–

P.279–285.

17.Dunckley H., Gatenby P.A., Hawkins B. et al. Deficiency of CAis a genetic determinant of systemic lupus erythematosus // J. Immunogenet. – 1987. – V. 14. – P. 209–218.

18.Edwards-Moulds J., Arnett F.C., Moulds J.J. Increased incidence of Rodgers negative individuals observed in systemic lupus erythematosus patients [Abstract] // Transfusion. – 1989. – V. 29. – 16S.

774

19.Fan Q., Uring-Lambert B., Weill B. et al. Complement component C4 deficiencies and gene alterations in patient with systemic lupus erythematosus // Eur. J. Immunogenet. – 1993. – V. 20. – P. 11–21.

20.FielderA.H.L.,WalportM.J.,BatchelorJ.R.etal.Familystudyofthemajorhistocompatibility complex in patients with systemic lupus erythematosus: importance of null alleles of C4A andC4Bindeterminingdiseasesusceptibility//Brit.Med.J.–1983.–V.286.–P.425–428.

21.Fisher B., Laycock C., Poole J., Powell H. A new allo anti-Ch specificity in a patient with a rare Ch positive phenotype [Abstract] // Transfus. Med. – 1993. – V. 3 (Suppl.). – P. 84.

22.Giles C.M. «Partial inhibition» of anti-Rg and anti-Ch reagents. I. Assessment for Rg / Ch typing by inhibition // Vox Sang. – 1985. – V. 48. – P. 160–166.

23.Giles C.M. «Partial inhibition» of anti-Rg and anti-Ch reagents. II. Demonstration of separable antibodies for different determinants // Vox Sang. – 1985. – V. 48. – P. 167–173.

24.Giles C.M.Anew genetic variant for Chido // Vox Sang. – 1984. – V. 46. – P. 149–156.

25.Giles C.M. Antigenic determinants of human C4, Rodgers and Chido // Exp. Clin. Immunogenet. – 1988. – V. 5. – P. 99–114.

26.Giles C.M.Antigens in plasma //AABB:ASeminar onAntigens on Blood Cells and Body Fluids. –Arlington, 1980. – P. 33–49.

27.Giles C.M. Three Chido determinants detected on the B5Rg + allotype of human C4: their expressioninCh-typeddonorsandfamilies//Hum.Immunol.–1987.–V.18.–P.111–122.

28.Giles C.M., Batchelor J.R., Dodi I.A. et al. C4 and HLA haplotypes associated with partial inhibition of anti-Rg and anti-Ch // J. Immunogenet. – 1984. – V. 11. – P. 305–317.

29.Giles C.M., Davies K.A., Walport M.J. In vivo and in vitro binding of C4 molecules and agglutination // Transfusion. – 1991. – V. 31. – P. 222–228.

30.Giles C.M., Fielder A.H.L., Lord D.K. et al. Two monoclonal anti-C4d reagents reacts with epitopes closely related to Rg:1 and Ch:1 // Immunogenetics. – 1987. –V. 26. – P. 309–312.

31.GilesC.M.,FordD.S.Amonoclonalanti-C4dthatdemonstratesaspecificityrelatedtoanti- Ch // Transfusion. – 1986. – V. 26. – P. 370–374.

32.Giles C.M., Gedde-Dahl T., Robson E.B. et al. Rg a (Rodgers) and HLAregion: linkage and associations // TissueAntigens. – 1976. – V. 8. – P. 143–149.

33.Giles C.M., Hoffman M., Moulds M. et al. Allo-anti-Chido in a Ch-positive patient // Vox Sang. – 1987. – V. 52. – P. 129–133.

34.Giles C.M., Jones J.W. A new antigenic determinant for C4 of relatively low frequency // Immunogenetics. – 1987. – V. 26. – P. 392–394.

35.Giles C.M., Robson T. Immunoblotting humanC4 bound to human erythrocytes in vivo and in vitro // Clin. Exp. Immunol. – 1991. – V. 84. – P. 263–269.

36.Giles C.M., Swanson J.L. Anti-C4 in the serum of transfused C4-deficient patient with systemic lupus erythematosus // Vox Sang. – 1984. – V. 46. – P. 291–299.

37.GilesC.M.,TokunagaK.,ZhangW.J.etal.TheantigenicdeterminantsRg / Ch / H,expressed by Japanese C4 allotypes // J. Immunogenetics. – 1988. – V. 15. – P. 267–275.

38.Giles C.M., Uring-Lambert B., Boksch W. et al. The study of a French family with two duplicated C4Ahaplotypes // Hum. Genet. – 1987. – V. 77. – P. 359–365.

39.Giles C.M., Uring-Lambert B., Goetz J. et al. Antigenic determinants expressed by human C4 allotypes: a study of 325 families provides evidence for structural antigenic model // Immunogenetics. – 1988. – V. 27. – P. 442–448.

40.Harris J.P., Tegoli j., Swanson J. et al.Anebulous antibody responsible for cross-matching difficulties (Chido) // Vox Sang. – 1967. – V. 12. – P. 140–142.

41.Hellman U., Eggersten G., Lundwall A. et al. Primary sequence differences between Chido and Rodgers variants of tryptic C4d on the human complement system // FEBS. Lett. – 1984. – V. 170. – P. 254–258.

42.Issitt P.D., Anstee D.J. Applied Blood Group Serology. – 4-th ed. – Durham, NC, USA: Montgomery Sc. Publ., 1998. – 1208 p.

775