Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

––у француза, имевшего фенотип Jk(a −b −), генная конверсия G > T на участке сплайсинга в интроне 7 аллеля Jk a способствовала исчезновению иРНК-транскрипта экзона 7 (Lucien и соавт. [48]);

––у 2 сестер англичанок и 1 тунисца, имевших фенотип Jk(a −b −), обнаружена делеция размером 1,6 кб в экзонах 4 и 5 аллеля Jk a (Irshaid и соавт. [35], Lucien и соавт. [47]);

––у 3 сестер из швейцарской семьи выявлена нонсенс-мутация в экзоне 7 аллеля Jk a, трансформирующая кодон для тирозина в позиции 194 в стоп-кодон. Данная мутация приводила к синтезу укороченного поли-

пептида, состоящего из 193 аминокислот (Irshaid и соавт. [35]).

Все перечисленные выше мутации выявлены с помощью ПЦР с соответствующими праймерами.

Ранее для выявления эритроцитов Jk(a −b −) использовали пробу Heaton и McLoughlin [28], предложенную ими в 1982 г. Метод основан на определении устойчивости эритроцитов к лизису в растворе мочевины.

Интересна история создания этого метода. У жителя Самоа, больного апластической анемией, автоматический счетчик клеток зарегистрировал повышенное содержание тромбоцитов. В счетчике с целью удаления эритроцитов, мешающих подсчету, использовали 2М раствор мочевины, в котором эритроциты обычно лизируются. Ошибочное завышение количества тромбоцитов произошло из-за высокой осмоустойчивости эритроцитов больного, оказавшегося Jk(a −b −), к мочевине. Не подвергшиеся лизису эритроциты и были приняты автоматическим счетчиком за тромбоциты. Эритроциты лиц, имеющих другие фенотипы Kidd, подвергаются лизису в 2М растворе мочевины в течение 1 мин, в то время как для лизиса эритроцитов Jk(a −b −) требуется не менее 30 мин. Проба на лизис с мочевиной оказалась весьма полезной для поиска эритроцитов редкого феноти-

па Jk(a −b −) (Woodfield и соавт. [108], Henry, Woodfield [29], Okubo и соавт. [67], Smart и соавт. [97], Sareneva и соавт. [91], McDougall, McGregor [56]).

Эритроциты лиц, гетерозиготных по молчащему аллелю Jk, показали промежуточное время лизиса в растворе мочевины – между временем лизиса эритроцитов обычных фенотипов Kidd и временем лизиса эритроцитов Jk(a −b −) (Edwards-Moulds, Kasschau [16]).

641

Антитела анти-Jk3

Антитела анти-Jk3 вырабатываются у лиц Jk(a −b −) и представляют собой несепарируемые анти-Jk ab-антитела. Они полностью адсорбируются эритроци-

тами как Jk(a +b −), так и Jk(a −b + ) (Pinkerton и соавт. [77]). Описано много об-

разцов антител указанной специфичности (Yokoyama и соавт. [111],Arcara и со-

авт. [4], Woodfield и соавт. [108], Kuczmarski и соавт. [43], Marshall и соавт. [52], Pierse и соавт. [74], Day и соавт. [11], Smart и соавт. [97], Oliver и соавт. [68]),

тем не менее их относят к редко встречающимся.

Сыворотки анти-Jk3 наряду с анти-Jk ab-антителами иногда содержат чистую анти-Jk a- или анти-Jk b-фракцию (Pinkerton и соавт. [77], Pierse и соавт. [74]).

Анти-Jk3-антитела образуются иногда у лиц Jk(a −b + ) (Woodfield и соавт. [108], Okubo и соавт. [67]). В литературе имеется единственное описание антител анти-Jk3 естественного происхождения, которые были найдены у мужчины Jk(a −b −), не получавшего гемотрансфузий, и относились к IgM. Его сестра, также Jk(a −b −), имела 7 беременностей, однако антител не выработала (Arcara и соавт. [4]).

Анти-Jk3-антитела относятся к IgG (Woodfield и соавт. [108], Kuczmarski и

соавт. [43], Heaton, McLoughlin [28]) и вызывают гемолиз эритроцитов in vitro, если в пробы добавлена свежая сыворотка крови (Yokoyama и соавт. [111]). Они обусловливают тяжелые гемолитические посттрансфузионные реакции немедленного (Issitt и соавт. [39]) и замедленного типа (Woodfield и соавт. [108], Marshall и соавт. [52], Day и соавт. [11]). Однако у большинства новорожденных, родившихся от матерей, имевших анти-Jk3-антитела, ГБН не развивалась, хотя эритроциты детей давали положительный результат в прямой антиглобулиновой пробе. В отдельных случаях состояние новорожденных корригировали фо-

тотерапией (Woodfield и соавт. [108], Kuczmarski и соавт. [43], Pierse и соавт. [74], Smartисоавт.[97]).

Ellisor и соавт. [18], O’Day [66] описали у 2 беременных аутоантитела со специфичностью анти-Jk3. В одном случае (Ellisor и соавт. [18]) наблюдали клинические проявления гемолитической анемии. Сыворотка женщины содержала фракцию антител, напоминавших анти-Jk b.

Issitt и соавт. [39] выявили аутоантитела анти-Jk3 у 85-летней русской женщины, страдавшей миелофиброзом и вторичной карциномой толстой кишки, осложнившейся кровотечениями. У больной имело место преходящее изменение фенотипаJk(a +b −)наJk(a −b −)вмомент,когдабылиобнаруженыантитела.Последние вызвали тяжелую гемолитическую посттрансфузионную реакцию. Элюаты с эритроцитов больной не содержали антител против антигенов Jk a и Jk b. Через 5 недель после трансфузионной реакции на эритроцитах больной выявили слабовыраженный антиген Jk a, ее сыворотка содержала антитела анти-Jk b и слабые антиJk3. Через год эритроциты больной снова стали Jk(a −b −), но антитела анти-Jk3 в сыворотке крови отсутствовали. Спустя еще год больная имела нормальный фенотип Jk(a +b −), антител против антигенов Jk b и Jk3 в сыворотке крови не было.

642

Наследование фенотипа Jk(a −b −)

Фенотип Jk(a −b −) имеет разное генетическое происхождение. По аналогии с системой Lutheran выделяют рецессивный и доминантный типы.

Рецессивный тип

Исследованиями Arcara и соавт. [4] показано, что в некоторых случаях фенотип Jk(a −b −) является результатом гомозиготности родителей по молчащему гену Jk. Авторы описали семью, в которой родители Jk(a +b −) × Jk(a −b + ) име-

ли 3 детей Jk(a −b −), 2 детей Jk(a −b + ) и Jk(a +b −), что противоречило законо-

мерности наследования групповых факторов крови. Шестой ребенок имел фенотип Jk(a +b + ). Очевидно, что при таком необычном распределении фенотипов у детей родители должны были быть гетерозиготными (Jk a / Jk × Jk b / Jk) по молчащему рецессивно наследуемому гену Jk. Полученные Arcara и соавт. данные были подтверждены многими исследователями (Habibi и соавт. [24], Irshaid

и соавт. [36], Woodfield и соавт. [108],Yokoyama и соавт. [111] и др.).

Доминантный тип

В 1989 г., через 17 лет после обнаружения рецессивного типа наследования фенотипа Jk(a −b −), Okubo и соавт. [67] выявили японку Jk(a +b + ), которая имела 2 дочерей Jk(a −b −). Возможность передачи по наследству молчащего аллеля Jk в данном случае исключалась. Доминантный ген, вызывающий подавление синтеза антигенов Kidd, был обозначен символом In(Jk) по аналогии с In(Lu) в системе Lutheran. Далее выяснилось, что ген In(Jk) независим от локуса JK.

С помощью адсорбции – элюции антител показано, что эритроциты Jk(a −b −) при доминантном типе наследования могут связывать некоторое количество антител анти-Jk a,анти-Jk b и анти-Jk3 в отличие от эритроцитов Jk(a −b −), сформировавшихся при рецессивном типе наследования. Эти эритроциты антител не связывают.

Эритроциты Jk(a −b −) при доминантном типе наследования лизируются растворами мочевины менее интенсивно по сравнению с клетками обычных фенотипов Kidd, однако их лизис выражен сильнее, чем лизис эритроцитов лиц, получивших фенотип Jk(a −b −) в результате рецессивного типа наследования

(Okubo и соавт. [67]).

Лица с фенотипом Jk(a −b −), сформировавшимся под действием доминантного гена In(Jk), не способны выработать антитела анти-Jk3 (Reid, LomasFrancis [83]), что отличает их от лиц, имеющих фенотип Jk(a −b −), сформировавшийся под действием рецессивного гена Jk.

По данным Okubo и соавт. [67]), среди японцев встречается в 6 раз чаще рецессивный тип наследования группы Jk(a −b −), чем доминантный.

643

Онтогенез, распределение в тканях

Антигены Jk a и Jk b появляются на эритроцитах на 8–11нед внутриутробного развития, к моменту рождения они хорошо выражены. Распределение их у новорожденных не отличалось от такового среди взрослых (Toivanen, Hirvonen [103], Race, Sanger [82]).

Антиген Jk3 появляется в эритробластах на более поздних этапах эритропоэ-

за (Bony и соавт. [6]).

Гликопротеин Jk, помимо эритроцитов, представлен на эндотелии кровеносных сосудов прямой кишки и эндотелии мозгового слоя почек, за исключением почечных канальцев (Xu и соавт. [109]).

Для изучения строения гликопротеина Jk использовали кроличьи антитела против N- и C-терминальных участков указанной структуры. Сходный характер распределения гликопротеина Jk в организме подтвержден при исследовании транскриптов гена JK методом гибридизации in situ в тканях почек человека (Xu и соавт. [109]). Транскрипты гена JK присутствовали в клеточных линиях остеобластов, их количествоснижалосьпомереразвитияжировойткани(Prichettисоавт.[81]).

Антигены Kidd не обнаружены на лимфоцитах, моноцитах, гранулоцитах и тромбоцитах (Marsh и соавт. [51], Dunstan и соавт. [14, 15], Gaidulis и соавт. [20]).

Связь с транспортом мочевины

Быстрый гемолиз эритроцитов Jk(a +b −), Jk(a −b + ) и Jk(a +b + ) в растворе мочевины и высокая устойчивость эритроцитов Jk(a −b −) к лизису в этом растворе косвенно указывали на то, что гликопротеин Kidd может иметь отношение к транспорту мочевины в тканях.

В эритроцитах лиц с обычным фенотипом Kidd мочевина быстро проходит сквозь клеточную мембрану, поэтому в 2М растворе мочевины эритроциты быстро насыщаются этим веществом, осмотическое давление в них многократно возрастает, вследствие чего они лопаются (Moulds [61]). Отсутствие гликопротеина Kidd в мембране эритроцитов Jk(a −b −) существенно замедляет проникновение мочевины внутрь клетки, обеспечивая тем самым их осморезистентность.

По данным Frohloch и соавт. [19], наполнение мочевиной эритроцитов, лишенных антигенов Kidd, происходит в 1000 раз медленнее, чем клеток, содержащих эти антигены.

Обработка обычных эритроцитов хлормеркурибензилсульфоновой кислотой (р-ХМБС), являющейся ингибитором транспорта воды и мочевины, приводила к замедлению лизиса клеток в 2М водном растворе мочевины (Edwards-Moulds, Kasschau [17]). Транспорт мочевины и воды блокировал также флоретин – ингибитор диффузии ионов Na + и K + (Olives и соавт. [72]).

Как установили Olives и соавт. [69, 72], гликопротеин Jk имеет высокую степень гомологии с транспортером мочевины – HUT-2, содержащимся в клетках почек человека, а также с транспортером мочевины кролика.

644

Физиологический уровень концентрации кДНК JK в клеточных линиях способствовал проникновению мочевины через мембрану клетки, но не влиял на ее проницаемость для воды. По мере увеличения количества транспортеров мочевины возрастала проницаемость мембраны для воды и некоторых растворите-

лей (Sidoux-Walter и соавт. [93]).

Известно, что почечные транспортеры мочевины способны проводить это вещество в одном направлении, к мозговому слою почек, где мочевина концентрируется в процессе образования мочи (Sands и соавт. [89]). Транспортер мочевины в эритроцитах проводит ее в двух направлениях (Macey,Yousef [49]):

––быстрый транспорт мочевины внутрь эритроцитов предотвращает их сморщивание при прохождении через ткани с высокой концентрацией мочевины – через почки;

––быстрый транспорт мочевины из эритроцитов предотвращает их набу-

хание и лизис. Мочевина не выносится из почек и тем самым не снижается их концентрационная способность.

Нулевой фенотип Kidd не приводит к какой-либо патологии, хотя описаны 2 индивида Jk(a −b −) со сниженной концентрационной способностью почек

(Sands и соавт. [88]).

Функцию транспортера мочевины, отсутствующего в эритроцитах Jk(a −b −), по-видимому, компенсируют плазменные факторы.

Список литературы

1.Умнова М.А., Пискунова Т.М. Сенсибилизация к групповому фактору крови Кидд (Ik a) // Пробл. гематол. – 1973. – № 5. – С. 52–54.

2.Чинь Суан Киэм, Бак Куок Туен, Чинь Ким Ань и др. Применение стандартных эритроцитов и соответствующих антисывороток и реагентов для быстрого подбора доноров гематологическим больным, сенсибилизированным к различным системам антигенов эритроцитов // Гематол. и трансфузиол. – 1989. – № 5. – С. 55–60.

3.Allen F.H., Diamond L.K., Niedziela B. A new blood group antigen // Nature. – 1951. –

V.167. – P. 482.

4.Arcara P.C., O’Connor M.A., Dimmette R.M. A family with three Jk(a −b −) members [Abstract] // Transfusion. – 1969. – V. 9. – P. 282.

5.Behzad O., Wong C., Gaucys G., Lee C.L.Apossible Kidd antigen variant // Transfusion. – 1980. – V. 20. – P. 119–120.

6.Bony V., Gane P., Bailly P., Cartron J.-P. Time-course expression of polypeptides carrying blood group antigens during human erythroid differentiation // Brit. J. Haemat. – 1999. –

V.107. – P. 263–274.

7.ChownB.,Lewis M.,KaitaH.TheKiddblood groupsysteminCaucasians//Transfusion.– 1965. – V. 5. – P. 506–507.

8.Crawford M.N., Greenwalt T.J., Sasaki T. et al. The phenotype Lu(a −b −) together with unconventional Kidd groups in one family // Transfusion. – 1961. – V. 1. – P. 228–232.

9.CutbushM.,MollisonP.L.Relationbetweencharacteristicsofblood-groupantibodiesinvitro and associated patterns of red-cell destruction in vivo // Brit. J. Haemat. – 1958. – V. 4. –

P.115–137.

10.DanielsG.L.HumanBloodGroups.–2-nded.–Oxford:BlackwellScience,2002.–560 p.

11.Day D., Perkins H.A., Sams B. The minus-minus phenotype in the Kidd system // Transfusion. – 1965. – V. 5. – P. 313–319.

645