Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

мутации в различных участках экзона 2 (табл. 7.3) приводят к образованию Gb3синтазы, лишенной трансферазной активности. Отмечена гетерогенность мутаций генаα4Gal-Tуяпонцев(Furukawaисоавт.[50])ишведов(Steffensonисоавт.[155]).

В сыворотках крови всех без исключения людей с фенотипом р присутствуют антитела, вызывающие агглютинацию и / или гемолиз всех образцов эритроцитов, за исключением группы р. Как показала Sanger [142], двумя основными компонентами таких сывороток являются антитела анти-Р1 и анти-Р. Их можно разделить адсорбцией эритроцитами Р2, при этом удаляется фракция анти-Р- антител. Позднее был идентифицирован еще один компонент (анти-Р k), вследствие чего специфичность антител обозначена анти-РР1Р k.

1устраняла активность анти-Р1

ианти-Р k, при этом фракция анти-Р в сыворотке оставалась в чистом виде (Matson

исоавт. [108]). Фракцию анти-Р k удавалось выделить не из всех сывороток. Tippett

[156] проводила адсорбцию 47 таких сывороток, используя эритроциты Р1. Фракции анти-Р k,какправилоснизкойактивностью,выделеныменеечемвполовинеслучаев.

Naiki и Kato [123] ингибировали антитела, полученные от лиц р, добавляя в сыворотки различные гликосфинголипиды. Тестирование проводили с помощью реакций агглютинации и связывания комплемента. После нейтрализации анти-Р-антител глобозидом оставшиеся в сыворотке антитела имели специфичность анти-Р1Р k. Антитела анти-Р1Р k были представлены преимущественно классом IgG (Naiki, Kato

[123]),аанти-Р1-антитела,выявляемыеулицР2,вбольшинствеслучаевклассомIgM. Используя аналогичные методы, Kato и соавт. [76] подтвердили, что одна фрак- цияанти-Р-антителулицрпредставленаIgM,которыеперекрестнореагируютсан- тигеном Форссмана; другая фракция – IgG, реагирующими с глобозидом. Фракция анти-Р k-антителвтакихсывороткахпредставляласобойIgG(Katoисоавт.[76]). Rydberg и соавт. [140] с помощью радиоиммунного анализа установили, что антителакфакторамР,Р1иР k являютсяIgGиIgА.Анти-Р1-ианти-Р k-антителабыли представленытакжеIgМ.ПочтивсеIgG-антителаотносилиськсубклассуIgG3,ино- гда присутствовали фракции IgG1 или IgG2, фракция IgG4 не обнаружена ни разу. АнтителасубклассаIgG1перекрестнореагировалисА-иН-группоспецифическими веществами, как полагают Rydberg и соавт. [140], за счет способности распознавать

углеводородныегруппировкивнутриолигосахаридныхцепей.

Антитела анти-РР1Р k способны вызывать внутрисосудистый гемолиз и могут иметь клиническое значение (Т.М. Пискунова, Т.А. Ичаловская [1], Daniels [37]). Острые гемолитические реакции наблюдали Chandeysson и соавт. [27] после внутривенного введения 25 мл несовместимых эритроцитов. Указанные антитела являются одной из возможных причин привычных выкидышей на ранних сроках беременности.

Как отмечено выше, фенотип р был впервые выявлен у женщины с карциномой желудка. Ей была проведена субтотальная резекция желудка и после этого в течение 22 лет не наблюдали признаков рецидива или метастазирования (Levine [93]). В отличие от эритроцитов больной клетки ее опухоли экспрессировали

506

антигены Р и Р1 (Kannagi и соавт. [74]), что послужило основанием концепции «запретных антигенов», появляющихся в опухолях вопреки генотипу индивида, сфорсулированной Levine. По появлению этих антигенов можно судить о глубине трансформации нормальных клеток в процессе малигнизации. Levine высказал предположение, что антитела анти-РР1Р k, имевшиеся у больной, предотвращали дальнейший рост опухоли.

Необычные фенотипы

Race и Sanger [133] описали пациента, у которого присутствовали антитела антиРР1Р k. Эритроциты больного, Р1 −Р k −LKE −, реагировали с 9 сыворотками анти-Р1, полученнымиотлицР k,атакжес1из12сыворотоканти-РР1Р k инеагглютинирова- лисьсывороткойанти-Рбольногоэхинококкозом.Сывороткабольногореагировалас эритроцитамиР1,Р2 иР k,нобылаинертнавотношении16образцовэритроцитовр.

Allenисоавт.[3]обследовалибольногосослабымантигеномР(Р1 −Р k −),всыворотке которого присутствовали антитела анти-IP1 и анти-IP. Антиген I в эритроцитах этого человека также был необычным: компонент I D был ослаблен, I F – выражен нормально, экспрессия антигена i была повышена (см.Система Ii).

Issitt и соавт. [68] описали антитела анти-IP1, которые в серологических реакциях вели себя как анти-Р1 с той лишь разницей, что не реагировали с эритроцитами новорожденных Р1.

Booth [16], Ramos и соавт. [135] нашли двухфазные гемолизины со специфичностью анти-I ТP1.

Kundu и соавт. [88] нашли мужчину китайца с фенотипом Р2, эритроциты которого слабо реагировали с сыворотками анти-РР1Р k. В сыворотке крови антител не выявлено. Содержание глобозида, в том числе Gb3, в его эритроцитах составляло 30–40 % от нормального. Авторы высказали предположение, что возникновение подобного фенотипа обусловлено гомозиготностью индивида по дефектному аллелю Р k или эффектом другого гена, ингибирующего ген Р k.

В сыворотке крови 1 женщины были найдены агглютинины, которые давали выраженные реакции с эритроцитами Р1, Р2 и слабоположительные реакции с эритроцитами р (Shirey и соавт. [150]). Специфичность антител более напоминала анти-Р, чем анти-LKE, поскольку они в отличие от анти-LKE-антител ингибировались глобозидом.

Обследуемая имела фенотип Р1 + Р k + Р −. В то же время содержание глобозида в эритроцитах было снижено в 2, а Gb3 – в 4–6 раз по сравнению с нормой.

Не исключено, что антигены рассматриваемой системы, как и другие групповые антигены, могут быть парциальными.

Анти-р-антитела

До настоящего времени специфические анти-р-антитела не найдены и, возможно, не существуют в природе. Вместе с тем нечто близкое к анти-р- специфичности было обнаружено.

507

Engelfriet и соавт. [41], Issitt и соавт. [67, 68], Metaxas и соавт. [111] описали

3 сыворотки, которые реагировали с эритроцитами р, а реакция с эритроцитами Р1, Р2 и Р k была слабой или отсутствовала.

Одна из сывороток (Fol) содержала агглютинины и двухфазные гемолизины. Антиген, с которым реагировала сыворотка Fol, разрушался после обработки эритроцитов сиалидазой и был идентифицирован Schwarting и соавт. [145] как сиалопараглобозид.

Антитела анти-Gd, реагирующие с сиалозависимыми антигенами подобно сыворотке Fol, имели другую специфичность (Roelcke и соавт. [138]), хотя одна из них реагировала с эритроцитами р.

Получены мышиные моноклональные антитела со специфичностью, подобной антителам сыворотки Fol, однако антиген, открываемый этими антителами, не разрушался сиалидазой (McDonald и соавт. [109]).

Биохимия

Антигенные детерминанты Р на эритроцитах представлены углеводными остатками гликосфинголипидов (табл. 7.2), олигопептидные цепи связаны с церамидом (Schenkel-Brunner [144]). Изучение биохимической структуры антигенов Р1, Р и P k показало, что субстанции Р и P k не являются предшественниками антигена Р1. Синтез указанных антигенов происходит посредством двух различных механизмов: P k и Р образуется из параглобозидов, причем P k является предшественником Р, а Р1 – из глобозидов.

Таблица 7.2

Структура гликосфинголипидов, ассоциированных с системой Р и GLOB

508

Антигены Р, относящиеся к параглобозидам

Параглобозид (лакто-N-неотетразилцерамид) является предшественником АВН-субстанций типа 2, некоторых ганглиозидов, а также антигена Р1. Первые сведения о природе Р-антигенов были получены в тестах с ингибицией специфических антител. Изучая ингибирующее действие моно-, ди- и трисахаридов на активность антител анти-Р1, Morgan и Watkins [116, 168] показали, что специфическая активность всех сахаров обусловлена α-D-галактозой. Авторы получили из жидкости эхинококка овец гликопротеин, специфически ингибировавший анти-Р1-антитела. При кислотном гидролизе указанного гликопротеина было установлено, что детерминанта Р1, распознаваемая антителами анти-Р1, является трисахаридом: Galα1 → 4Galβ1 → 4GlcNAc (Cory и соавт. [33], Schenkel-Brunner [144].

Антиген Р1 на эритроцитах представлен гликосфинголипидом ‒ пентамерным церамидом (см. табл. 7.2) с трисахаридным терминальным участком, распознаваемым специфическими антителами (Naiki и соавт. [122, 124]). Пространственная структура представляет собой параглобозид с дополнительным остатком α-галактозы. Трисахаридная структура, определяющая специфичность, обладала выраженным ингибирующим эффектом по отношению к моноклональным анти-Р1-антителам (Bailly и соавт. [10, 11], Rouger и соавт. [139]).

Brodin и соавт. [18]) получили Р1-специфический трисахарид синтетическим путем и с успехом использовали для иммунизации мышей с целью получения моноклональных антител. Синтетический трисахарид, коньюгированный с иммуносорбентом, извлекал антитела анти-Р1 из аллоиммунных сывороток

(Cowles и соавт. [34]).

Описаны антитела, реагирующие с эритроцитами нулевого фенотипа р. Эти антитела специфически ингибировались сиалозилпараглобозидом (Metaxas и соавт. [111], Schwarting и соавт. [145]), терминальная часть которого содержала остатки сиаловых кислот. Упомянутый сиалозилпараглобозид найден в высокой концентрации на эритроцитах лиц, имеющих нулевой фенотип р. При этом синтез вещества P k (Gb3) блокирован.

Антигены Р, относящиеся к глобозидам

Антигены Р, P k и Р1 между собой тесно связаны, однако имеют разную природу: Р и P k относятся к глобозидам, а Р1 ‒ к параглобозидам. На эритроцитах они представлены гликолипидами, в жидкости эхинококковых кист они присутствуют в составе гликопротеинов.

Используя очищенные гликолипиды для ингибиции антител анти-PP1P k, Naiki и Matson [125], Yang и соавт. [175] установили, что глобозид и тригексозид церамида (Gb3) свойственны эритроцитам, несущим антигены Р и P k. Субстанция P k трансформируется в антиген Р, а антиген Р1 синтезируется на основе параглобозидов (рис. 7.1).

509

Рис. 7.1. Синтез антигенов Р и GLOB по Daniels [37].

Антиген Pk

Формирование антигенной детерминанты P k происходит с участием α-D-

галактозы (Furukawa [49], Kundu и соавт. [86], Voak и соавт. [161], Watkins, Morgan [168]).Активностьантителанти-P k,такжекакианти-Р,ингибироваласьжидкостью кистэхинококка(Matsonисоавт.[108]).Частичныйкислотныйгидролизгликопротеина,выделенногоизэхинококковыхкист,позволилполучить2субстанции:трисахарид, обладающий способностью специфически инактивировать антитела анти-Р1 и анти-P k,идисахаридGalα1→4Gal,связывающийантителаанти-Р1,ноинертныйпо отношению к анти-P k-антителам [168]. Другие олигосахариды, содержавшие терминальные α-галактозные группы, также нейтрализовали активность анти-P k-антител, чтоподтверждалоучастиеα-галактозывформированииэпитоповP k [168].

510