41
33. Для изучения сахаролитической активности холерного вибриона используют среды:
- Олькеницкого
+лактозосахарозная
+глюкозолактозная - Эндо - Левина
34. Методом экспресс-диагностики холеры является:
-посев на щелочной агар
-РИФ с выделенной культурой
+ РИФ с испражнениями больного
-биологическая проба
-РА с сывороткой больного
35. Для холеры характерно: - бактериемия
+резкое обезвоживание - геморрагическая сыпь
+развитие ацидоза
- отеки тканей
36. Испражнения при холере представляют собой:
-обычный кал
-“рисовый” отвар
-кал со слизью
-кал с кровью
-прозрачную жидкость
37. Основой патогенетического лечения холеры является применение:
-холерного бактериофага
-плазмы доноров
+ солевых растворов
-интерферона
-пробиотиков
38. Для дезинфекции при холере используют:
+кислоты - щелочи
+хлорамин
+перекись водорода - фенол
39. Средства специфической профилактики холеры: - О-холерная сыворотка
42
+инактивированная вакцина
+холероген-анатоксин
-холерный диагностикум
-пробиотики
Примечание: знаком “+” отмечены правильные варианты ответов.
Ситуационные задачи
Задача 1. В инфекционную больницу поступил больной, который путешествовал по Индии. Основными симптомами заболевания были рвота и частый водянистый стул, напоминающий “рисовый отвар”. Предварительный диагноз - холера.
Задания:
1.На основании каких данных поставлен предварительный диагноз?
2.Опишите морфологические и тинкториальные свойства возбудителя
холеры.
3.Какой материал от больного используется для диагностики?
4.Какие средства используются для лечения больного холерой?
Задача 2. В мазке из испражнений, окрашенном по Граму, выявлены изогнутые палочки в виде запятой розового цвета.
Задания:
1.Какие еще микроскопические исследования можно провести с исследуемым материалом?
2.На какие питательные среды необходимо провести посев исследуемого материала?
3.Какой экспресс-метод диагностики можно провести с исследуемым материалом?
Задача 3. В инфекционной больнице больному поставлен диагноз “Холера”. При микроскопии рвотных масс выявлены грамотрицательные изогнутые палочки.
Задания:
1.В каком препарате можно изучить подвижность выявленных бактерий?
2.Опишите порядок приготовления препарата, окрашенного фуксином Циля.
3.Какие питательные среды используются для посева материала при диагностике холеры?
Задача 4. Из испражнений больного с подозрением на гастроэнтерит выделены подвижные грамотрицательные изогнутые палочки, не образующие спор и капсул. Выделенная культура не ферментирует арабинозу, расщепляет до кислоты маннозу и сахарозу, вызывает гемолиз эритроцитов барана, растет на агаре с полимиксином В.
Задания:
43
1.Какая бактерия имеет подобные свойства?
2.Назовите признаки, необходимые для подтверждения возбудителя.
3.Какие методы необходимо использовать для подтверждения диагноза?
Задача 5. В мазке из фекалий больного кишечной инфекцией обнаружены изогнутые грамотрицательные палочки.
Задания:
1.Как можно проверить подвижность обнаруженных бактерий?
2.С помощью каких методов можно провести идентификацию возбудителя?
Задача 6. В бактериологическую лабораторию доставлен материал от больного с подозрением на холеру.
Задания:
1.Как необходимо провести исследование и идентификацию возбудителя?
2.Назовите методы ускоренной диагностики холеры.
3.Какие мероприятия необходимо провести в очаге инфекции?
Задача 7. В инфекционную больницу поступил больной с жалобами на неукротимую рвоту и частый жидкий стул в виде “рисового отвара”. В анамнезе имеется контакт с больным холерой при поездке в Индию 2 недели назад.
Задания:
1.Какой материал отбирают от больного для исследования?
2.Порядок проведения лабораторных исследований при холере?
3.Как учитывают результаты проведенных исследований?
Приложение 1
Состав питательных сред, применяемых при культивировании холерного вибриона
1.Основной раствор пептона. Предназначен для накопления холерного вибриона. Состав: пептон – 100 г, натрия хлорид – 50 г, калия нитрат – 10 г, натрия карбонат – 25 г, вода дистиллированная – 1000 мл. рН готовой среды устанавливают на уровне 8,5±0,1.
2.Щелочная пептонная вода. Является транспортной средой для холерного вибриона. Состав: пептон – 10 г, вода дистиллированная – 1000 мл, 1%-ный раствор калия теллурита – до конечного разведения 1:100000 – 1:200000. рН 8,2-8,4.
3.Щелочной МПА. Предназначен для выращивания холерного вибриона. Состав: вода мясная – 1000 мл, пептон – 10 г, натрия хлорид – 5 г, агар – 20 г. рН
8,0±0,2.
4.ТСВS-агар (питательный агар с тиосульфатом натрия, цитратом, бромтимоловым синим и сахарозой). Предназначен для выделения и селективного культивирования возбудителя холеры и других энтеропатогенных вибрионов. Состав: пептон – 10 г, дрожжевой экстракт – 5 г, цитрат натрия – 10 г, тиосульфат
44
натрия – 10 г, бычья желчь – 8 г, сахароза – 20 г, натрий хлористый – 10 г, цитрат железа – 1 г, тимоловый синий – 0,04 г, бромтимоловый синий – 0,04 г, агар – 14 г, дистиллированная вода – 1000 мл. рН 8,6±0,2. Готовая среда прозрачная, синезеленого цвета.
5.Среда СЭДХ. Сухая элективно-дифференциальная среда предназначена для выделения и дифференциации холерного вибриона. Состав: пептон – 6 г, натрия карбонат – 1 г, натрий хлористый – 8 г, моющее средство “Прогресс” – 6 г, калия теллурит – 0,03 г, сахароза – 20 г, бромтимоловый синий - 0,04 г, агар – 10 г, дистиллированная вода – 1000 мл. рН 8,0±0,2. Готовая среда имеет темно-синий цвет.
6.Среда СЭДХ-М (модернизированная среда СЭДХ). Состав: сухой питательный бульон – 10 г, агар – 10 г, сахароза – 20 г, натрия хлорид – 8 г, натрия карбонат – 0,8 г, натрия цитрат – 10 г, натрия сульфит – 0,3 г, бромтимоловый синий 0,8 г, мезоинозит – 0,8 г, железо-натриевая соль ЭДТА – 0,5 г, уголь активированный 1,2 г, L-цистеин – 0,3 г, калия теллурит – 0,002 г, нитрат висмута – 0,08 г, дистиллированная вода – 1000 мл. рН 8,0. готовая среда имеет темнофиолетовый цвет.
7.Среда Монсура (таурохолат-теллуритовый агар с желатином). Рекомендована ВОЗ для выделения возбудителя холеры и других вибрионов из клинического материала. Состав: гидролизат казеина – 10 г, натрия хлорид – 10 г, натрия таурохолат – 5 г, натрия карбонат – 1 г, желатин – 30 г, агар – 15 г, 1%-ный раствор теллурита калия 50 мл, вода дистиллированная – 1000 мл. рН 8,5±0,2. Готовая среда имеет желтый цвет.
8.Питательный желатин. Предназначен для определения протеолитической активности бактерий. Состав: бульон Хоттингера – 1000 мл, желатин пищевой – 100 г. рН 7,1±0,1.
9.Среда Хью-Лейфсона. Предназначена для выявления способности холерного вибриона ферментировать глюкозу как в аэробных, так и анаэробных условиях. Состав: пептон – 2 г, натрия хлорид – 5 г, калия гидрофосфат – 0,3 г, глюкоза – 10 г, бромтимоловый синий – 0,05 г, агар – 2 г, вода дистиллированная – 1000 мл. рН 6,8±0,2. Готовая среда имеет зеленовато-синий цвет.
10.Среда Кларка. Предназначена для выявления способности образовывать ацетилметилкарбинол (реакция Фогеса-Проскауэра). Состав: пептон – 0,5 г, калия гидроортофосфат – 0,5 г, глюкоза – 0,5 г, вода дистиллированная – 100 мл.
11.Пептонная вода. Предназначена для изучения свойств возбудителя. Состав: пептон – 10 г, натрия хлорид – 5 г, вода дистиллированная – 1000 мл.
12.Мясо-пептонный бульон. Предназначен для изучения свойств возбудителя. Состав: пептон – 10 г, натрия хлорид – 5 г, вода мясная – 1000 мл. рН
7,2±0,2.
13.Среда Клиглера. Предназначена для дифференциации энтеробактерий по способности ферментировать глюкозу, лактозу, образовывать сероводород. Состав: мясной бульон – 1000 мл, пептон – 20 г, лактоза – 10 г, глюкоза – 1 г, натрия хлорид – 5 г, натрия сульфит – 0,4 г, натрия тиосульфат – 0,08 г, железа сульфат – 0,5 г, агар – 20 г, спиртовой раствор фенолового красного – 12 мл. Готовая среда имеет оранжево-красный цвет. Расщепление сахаров сопровождается образованием кислот, что приводит к изменению цвета среды на желтый. Образование
45
сероводорода сопровождается почернением столбика среды.
14.Лактозосахарозная среда. Предназначена для определения способности разлагать лактозу и сахарозу. Состав: пептон – 5 г, натрия хлорид – 5 г, лактоза – 10 г, сахароза – 1 г, агар – 10 г, индикатор Андреде – 40 мл, вода дистиллированная – 1000 мл. Готовая среда имеет соломенно-желтый цвет. Среду скашивают в пробирках таким образом, чтобы образовывался столбик и скошенная часть.
Холерный вибрион ферментируют сахарозу и не разлагают лактозу, поэтому при культивировании в течение 18-24 часов при температуре 37ОС столбик среды окрашивается в розовый цвет, а скошенная часть не изменяет своей окраски (остается желтого цвета).
15.Глюкозолактозная среда. Предназначена для определения способности разлагать глюкозу и лактозы. Состав: пептон – 5 г, натрия хлорид – 5 г, глюкоза – 1 г, лактоза – 10 г, агар – 10 г, индикатор Андреде – 40 мл, вода дистиллированная – 1000 мл. Готовая среда имеет соломенно-желтый цвет. Среду скашивают в пробирках таким образом, чтобы образовывался столбик и скошенная часть.
Холерный вибрион ферментируют глюкозу и не разлагают лактозу, поэтому при культивировании в течение 18-24 часов при температуре 37ОС столбик среды окрашивается в розовый цвет, а скошенная часть не изменяет своей окраски (остается желтого цвета).
16.Среда Ресселя. Предназначена для определения способности разлагать глюкозу и лактозу. Состав: гидролизат рыбной муки – 12 г, натрия хлорид – 4 г, глюкоза 1 г, лактоза – 10 г, бромтимоловый синий – 0,03 г, агар – 5 г, вода дистиллированная – 1000 г. Среду скашивают в пробирках, оставляя столбик высотой 1,5-3 см. Готовая среда имеет зеленый цвет. Холерный вибрион
ферментируют глюкозу и не разлагают лактозу, поэтому при культивировании в течение 18-24 часов при температуре 37ОС столбик среды окрашивается в желтый цвет, а скошенная часть приобретает синюю окраску.
Приложение 2
Методы изучения свойств холерного вибриона
1. Окраска жгутиков по Лейфсону. Каплю исследуемой культуры наносят на обезжиренное стекло и, наклонив стекло, дают капле стечь в противоположную сторону. Приготовленный препарат высушивают на воздухе. На сухой препарат наносят смесь равных объемов гипертонического раствора хлорида натрия и танина. Протравливание продолжают в течение 5 минут. Затем смесь сливают, препарат осторожно промывают водой и докрашивают раствором розанилина в течение 2-3 минут. Препарат промывают водой, высушивают на воздухе и микроскопируют с иммерсией.
Возможно окрашивать препарат в течение 8-10 минут красителем, состоящим из равных объемов 1,5% хлорида натрия, 3% таниновой кислоты и смеси парарозанилина ацетата (0,9 г) и парарозанилина гидрохлорида (0,3 г) в 96% спирте
(100 мл).