На правах рукописи
03.00.07 - микробиология
Автореферат
диссертации на соискание учёной степени
кандидата медицинских наук
ВИРУЛЕНТНЫЕ СВОЙСТВА СТАФИЛОКОККОВОЙ МИКРОФЛОРЫ КОЖИ ПРИ АТОПИЧЕСКОМ ДЕРМАТИТЕ
Баязитова Лира Табрисовна
Уфа - 2009
Работа выполнена в Федеральном государственном учреждении науки «Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Республика Татарстан, г. Казань).
Научный руководитель - доктор медицинских наук, профессор Фассахов Рустэм Салахович
Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор Габидуллин Зайнулла Гайнулинович;
доктор медицинских наук, профессор Поздеев Оскар Кимович
Ведущая организация - Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Самарский государственный медицинский университет»
Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Российской Федерации
Защита диссертации состоится 20 октября 2009 года в 11 часов на заседании Объединенного совета ДМ 208.006.05 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава» по адресу: 450000, г. Уфа, ул. Ленина, 3.
С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке Государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава».
Автореферат разослан 2009 г.
Ученый секретарь диссертационного совета Лукманова К.А.
ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ
Актуальность проблемы
По данным ВОЗ, в мире ежегодно более 1 млн человек заболевают аллергическими болезнями, одним из наиболее распространенных среди которых является атопический дерматит (АтД). Заболеваемость АтД в экономически развитых странах мира составляет в среднем 15-20 человек на 1000 населения [Ильина Н.И., 2005; Ревякина В.А., Агафонов А. С., 2008]. Ухудшение здоровья населения, широкое распространение бактериальных, вирусных и грибковых инфекций, а также увеличение частоты резистентных к антибактериальным препаратам микроорганизмов существенно меняют течение болезни, приводя к развитию более тяжелых форм, характеризующихся рецидивирующим течением и выраженными воспалительными проявлениями [Елисютина О.Г., Феденко Е.С., 2006].
Серьезной проблемой является частое присоединение вторичной инфекции кожи у 25-34 % больных с атопическим дерматитом [Смирнова Г.И., 2004]. Среди микробов, колонизирующих кожу пациентов, страдающих АтД, лидирующую роль занимает Staphylococcus aureus. По данным разных авторов, у 80-95 % пациентов, страдающих этим заболеванием, c кожных покровов высевается Staphylococcus aureus [Leung D.Y.M., 2002; Gong J.Q. et al., 2006]. Установлено, что с усилением колонизации кожи стафилококком наблюдаются более тяжелые патологические изменения и характер течения атопического дерматита [Szacos E. et al., 2004]. Присоединение стафилококковой инфекции к уже существующему аллергодерматозу часто становится пусковым фактором развития обострения заболевания.
Возможен и другой вариант развития АтД - колонизация кожи Staphylococcus aureus становится причиной развития АтД у лиц с атопическим фенотипом.
Накопленный клинический опыт показывает, что стафилококковая колонизация кожи у пациентов с АтД значительно изменяет характер течения этого аллергического заболевания. Однако, несмотря на значительное число работ, посвященных роли микробного фактора при данной патологии, особенности стафилококковой микрофлоры, колонизирующей кожу пациентов при АтД, раскрыты неполно. Недостаточно изучено влияние местной терапии на вирулентные свойства Staphylococcus aureus, персистирующего на коже больных атопическим дерматитом.
Исследования вирулентных свойств бактерий рода Staphylococcus, колонизирующих кожные покровы, необходимы для раскрытия механизмов взаимодействия макро- и микроорганизма, возникающих при развитии АтД, что будет способствовать развитию новых подходов к лечению пациентов с этим заболеванием.
Цель исследования
Определить вирулентные свойства и ферментативные особенности стафилококков, колонизирующих кожу больных атопическим дерматитом; oценить антибактериальную активность 1-окси-2(1Н)-пиридитиона цинка (пиритиона цинка) по отношению к Staphylococcus aureus при его применении в местной терапии больных атопическим дерматитом.
Задачи исследования
1 Определить видовой и количественный состав стафилококковой микрофлоры кожи при осложнённом и неосложнённом течении атопического дерматита в различных возрастных группах больных.
2 Изучить вирулентные свойства (адгезивный потенциал, активность гидролитических энзимов и ферментов антиоксидантной системы защиты) штаммов Staphylococcus aureus и Staphylococcus epidermidis, колонизирующих кожу пациентов с атопическим дерматитом в зависимости от тяжести заболевания.
3 Оценить клиническую эффективность местной терапии с применением пиритиона цинка и его антибактериальные свойства в отношении штаммов Staphylococcus aureus, колонизирующих поражённую кожу больных атопическим дерматитом.
Научная новизна
Получены новые данные о различной степени выраженности адгезивного потенциала у штаммов стафилококков (Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis), колонизирующих кожу больных, в зависимости от степени тяжести атопического дерматита.
Впервые дана количественная характеристика активности протеиназ штаммов стафилококков, высеянных с пораженной кожи больных атопическим дерматитом; для Staphylococcus aureus и Staphylococcus epidermidis определён тип секретируемых протеиназ, обусловливающих эту активность.
Установлена зависимость активности каталазы и супероксиддисмутазы штаммов стафилококков, высеянных с кожи больных, от клинической формы, степени тяжести и периода течения атопического дерматита.
Выявлена высокая термонуклеазная активность Staphylococcus aureus, колонизирующих кожу больных при тяжелом течении атопического дерматита. стафилококковый микрофлора кожа дерматит
Показана высокая эффективность местной терапии с применением пиритиона цинка, обусловленная антибактериальным действием препарата, способствующим элиминации с кожи больных Staphylococcus aureus и снижению их вирулентных свойств.
Научно-практическая значимость работы
Полученные данные о высокой частоте выделения с кожи больных с тяжелой степенью атопического дерматита метициллинрезистентных штаммов Staphylococcus указывают на необходимость проведения антибактериальной терапии с учетом результатов определения метициллинрезистентности стафилококков.
Результаты исследования клинической эффективности и антибактериальной активности препаратов на основе пиритиона цинка (препарат «Скин-кап») позволяют рекомендовать использование их при местной терапии у больных с атопическим дерматитом, ассоциированным с массивной колонизацией кожи Staphylococcus aureus.
Выраженная активность гидролитических, антиоксидантных ферментов и адгезивность штаммов Staphylococcus aureus, колонизирующих кожу больных атопическим дерматитом, характеризуют их высокую патогенность, что диктует необходимость учета роли бактериального фактора при проведении этиопатогенетической терапии.
По результатам диссертационной работы подана заявка и получено решение о выдаче патента на изобретение «Способ определения IgG-протеиназной активности» (заявка № 2008113407/13 от 28.03.2008 г.).
Внедрение результатов исследований в практику
Результаты диссертационного исследования используются в работе специализированной поликлиники Федерального государственного учреждения науки «Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии» Роспотребнадзора; аллергологического отделения муниципального учреждения здравоохранения «Детская клиническая городская больница № 7» г. Казани; в учебном процессе на кафедрах микробиологии и аллергологии и клинической иммунологии Государственного образовательного учреждения дополнительного профессионального образования «Казанская государственная медицинская академия» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию.
Основные положения, выносимые на защиту
1 Кожа пациентов первых двух лет жизни с тяжелым течением экссудативной формы атопического дерматита колонизирована Staphylococcus aureus в высокой степени плотности.
2 Штаммы Staphylococcus aureus, колонизирующие пораженную кожу больных атопическим дерматитом в периоде обострения, обладают выраженной адгезивной способностью, высоким уровнем активности Ig-протеиназ, нуклеаз, каталазы и супероксиддисмутазы.
3 Применение пиритиона цинка приводит к снижению плотности контаминации пораженной кожи Staphylococcus aureus, снижению их вирулентных свойств.
Апробация работы
Материалы диссертации представлены и обсуждены на научных форумах: 15-м Национальном конгрессе по болезням органов дыхания (Москва, 2005); Международной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов-2007» (Москва, 2007); 17-м Национальном конгрессе по болезням органов дыхания (Казань, 2007); 10-м Международном конгрессе «Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии» (Казань, 2009).
Основные положения диссертации обсуждены на расширенном заседании Ученого совета Федерального государственного учреждения науки «Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии» Роспотребнадзора; кафедр аллергологии и клинической иммунологиии, микробиологии Государственного образовательного учреждения дополнительного профессионального образования «Казанская государственная медицинская академия» Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию, специализированной консультативно-диагностической поликлиники инфекционно-аллергических заболеваний при Федеральном государственном учреждении науки «Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии» Роспотребнадзора (протокол № 1 от 1 июня 2009 года).
Диссертация апробирована на расширенном заседании Объединенного диссертационного совета ДМ 208.006.05 при Государственном образовательном учреждении высшего профессионального образования «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава» (протокол № 7 от 25 06.09 г.).
Публикации
По материалам диссертации опубликовано 9 работ, в том числе 3 в изданиях, рекомендованных Высшей аттестационной комиссией Министерства образования и науки Российской Федерации.
Объём и структура диссертации
Диссертация изложена на 127 страницах, содержит 40 таблиц и 13 рисунков. Она состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, заключения, выводов и практических рекомендаций. Список литературы включает 194 источника (75 отечественных и 119 зарубежных).
СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ
Материалы и методы исследования
Клинические исследования проводились в течение 2003-2005 гг. на базе специализированной консультативно-диагностической поликлиники инфекционно-аллергических заболеваний ФГУН «Казанский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии» Роспотребнадзора и аллергологического отделения муниципального учреждения здравоохранения «Детская городская клиническая больница № 7» (г. Казань).
Диагноз атопический дерматит (АтД) установлен у 114 пациентов, включённых в диссертационное исследование, в соответствии с рекомендациями Российского национального согласительного документа по атопическому дерматиту (2002) и согласительного документа «Современная стратегия терапии атопического дерматита: программа действия педиатра» (2004). Степень тяжести АтД оценивалась по международной системе SCORAD (Severity scoring of atopic dermatitis). Были выделены три степени тяжести: легкая (индекс SCORAD менее 30 баллов), среднетяжелая (индекс SCORAD от 30 до 60 баллов), тяжелая (индекс SCORAD более 60 баллов).
Контрольную группу составили 25 практически здоровых лиц (ПЗЛ) в возрасте от 6 месяцев до 18 лет. Основными критериями отбора в группу сравнения из числа практически здоровых лиц явились следующие: отсутствие жалоб на нарушения состояния здоровья в момент осмотра; отсутствие признаков аллергической и другой острой или хронической патологии [Хайруллина Р.М., 1999].
В работе использован комплекс методов: клинических, лабораторно-инструментальных, аллергологических, микробиологических, биохимических и статистических.
Общеклинические лабораторные методы исследования включали общий анализ крови и мочи, анализ кала на гельминты и простейшие.