Материал: Систематика і видовий склад родини Polygonaceae. Характеристика Polygonum aviculare

хлорогенова кислота

.2 Дослідження мікроелементного складу трави Polygonum aviculare L. в різних екологічних умовах. (Халіева З.М., Булатова А.Р., Оренбурзька державна академія)

Метою дослідження є проведення порівняльного аналізу вмісту мікроелементів у рослинній сировині, зібраній в різних екологічних умовах. Для оцінки вмісту мікроелементів у лекарській рослинній сировині були зібрані зразки наземної частини (трава) гірчака пташиного або споришу Polygonum aviculare L. (Род. Polygonaceae Juss) і грунт. Гірчак пташиний (Polygonum aviculare L.) - однорічна трав'яниста рослина заввишки 15-50 см, що є поширеним космополітом в північній півкулі. У Волго-Уральському регіоні зустрічається повсюдно на лугах, ріллі, уздовж доріг, на прирічкових пісках, біля житлових будинків. Гірчак пташиний - відома лікарська рослина, що застосовується в Росії і за кордоном. В офіційній і народній медицині його використовують як протизапальний засіб, що сприяє відходженню конкрементів, а також при каменях у нирках і сечовому міхурі.

Рослина застосовують при функціональній недостатності печінки і захворюваннях, пов'язаних із затримкою в організмі токсичних продуктів обміну, оскільки трава гірчака пташиного має антитоксичні властивості. Мікроелементний склад надземної частини споришу цікавий з позиції оцінки якості лікарської рослинної сировини, а також можливості використання його для фіторемедіаціі. Рослинна сировина Polygonum aviculare збиралася в період цвітіння (кінець червня - початок липня) 2012 року в центральній частині міста Оренбурга, по ул.Туркестанской при різній віддаленості від проїжджої частини (3м від дороги і 500 м від дороги). В якості фонової території прийнята зона на відстані 70 км від міста, віддалена від населених пунктів і проїжджої частини. Визначення елементного складу проводилося методом атомно-абсорбційної спектроскопії на базі випробувальної лабораторії ФГУЗ «Центр гігієни і епідеміології Оренбурзької області». Елементний аналіз рослинної сировини дозволяє виявити деякі особливості накопичення мікроелементів в надземній частині гірчака пташиного. Більшість мікроелементів відносяться до біогенних, так як багато хто з них входять до складу активних центрів ферментів і приймають, тим самим, участь у метаболізмі. У багатьох біохімічних процесах в рослинному організмі беруть участь флавопротєїнові ферменти. В активації цих ферментів беруть участь Mn, Fe, Cu. Для вивчення синтезу біологічно активних речовин найбільший інтерес представляють Mn, Cu, Co, Ni, Cr. Небезпечними забруднювачами лікарської рослинної сировини вважаються As, Pb, Cd, так як їх накопичення в навколишньому середовищі йде дуже швидкими темпами. Миш'як здатний порушувати роботу ферментних систем. Незважаючи на те, що мікроелементи є природними компонентами рослин, інтенсивний розвиток промисловості та сільського господарства, погіршення екологічної обстановки, зростання урбанізації призвело до появи невластивих для природи концентрацій металів, кумулюється в грунті і рослинах. Зокрема найбільший ступінь акумуляції в сировині мають Cr, Co, Cu. У грунті ж, де виростає даний лікарський рослина, спостерігається менше збільшення концентрації даних елементів. Крім того, можна простежити залежність накопичення мікроелементів в залежності від екологічних умов. Лікарські рослини, які ростуть у безпосередній близькості до автомобільних доріг, мають високу концентрацію мікроелементів. На підставі проведених досліджень з'ясували, що гірчак пташиний здатний регулювати потік забруднюючих речовин. Це дозволяє йому активно протистояти надмірному надходженню важких металів і вибірково накопичувати есенціальні елементи, необхідні для роботи ферментів. При цьому слід враховувати, що накопичені в наземних частинах елементи здатні мігрувати по харчових ланцюгах, так як спориш використовується як лікарська рослинна сировина. Внаслідок цього виникає проблема контролю якості лікарської рослинної сировини. [5, 11, 15, 16 ]

.3 Дослідження хімічного складу трави Polygoni avicularis L. (Н.А. Юнусходжаева, В.Н. Абдуллабекова, Ташкентський фармацевтичний університет)

Експериментальна частина

Для вивчення хімічного складу використовували надземну частину рослини, зібраного на території Ботанічного саду Ташкента в період цвітіння.

. Визначення вітаміну К. 1,0 г подрібненого до розміру часток, що проходять через сито з отворами діаметром 5 мм, повітряно-сухої сировини (точна навіска) вичерпно екстрагували гексаном при періодичному струшуванні в перебігу 1 год у темному місці.

Визначення вітаміну К1 в отриманому витязі проводили методом ТШХ. Для цього на платівку «Silufol UF -254» (Чехія), размером15 × 15 см на відстані 1 см від краю пластинки наносили по 0,15 мл досліджуваного витягу і розчину робочого стандартного зразка (РІС) вітаміну К1 у вигляді смуг довжиною 1,5 см об'ємом 1 мл. Хроматографування проводили висхідним способом у системі розчинників діетиловий ефір - бензол у співвідношенні 2:8. По закінченні хроматографування пластинку виймали, сушили на повітрі до видалення запаху розчинників, переглядали в УФ-світлі при λ = 360 нм, відзначаючи зону розташування вітаміну К1, який флуоресціює на фіолетовому тлі у вигляді білої плями. Зону вітаміну К1, вирізали і поміщали в колбу з притертою пробкою, заливали 10 мл 96% спирту і елюювали на протязі 30 хв при постійному струшуванні. Елюат фільтрували і вивчали УФ-спектри.

Кількісний вміст вітаміну К1 в досліджуваному об'єкті визначали за розробленою раніше нами методикою високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ) з використанням калібровачного графіка, побудованого по розчину РСО вітаміну К1.

Для цього 5,0 г (точна наважка) висушеного і подрібненого до 5 мм величини сировини екстрагували 50 мл гексану. Колбу приєднали до зворотного холодильника і нагрівали на киплячій водяній бані протягом 30 хв. Після чого гексановий екстракт фільтрували через паперовий фільтр у мірну колбу ємністю 100 мл. Екстракцію повторювали ще 2 рази по 25 мл гексану нагріванням на протязі 10 хв. Об'єднаний гексановий екстракт упаривали до сухого залишку на роторно-вакуумному випарнику при температурі не вище 40С. Сухий залишок, промиваючи метанолом, кількісно переносили в мірну колбу місткістю 10 мл. Отриманий розчин пропускали через фільтр «Мілліпор» з розміром пір 0,45 мкм.

Хроматографування проводили в наступних умовах: рідинний хроматограф фірми «Agilent Technologies 1100 series» з комп'ютерною програмою «Chemstation» версії А 09.03, забезпечений чотирьохканальним насосом високого тиску, УФ / Вид-діод-матричним детектором, дегазатором рухомої фази, автосамплером та термостатом колонки. Рухома фаза-метанол. Металева хроматографічна колонка розміром 140 * 4,6 мм, наповнена сорбентом Zorbax Eclipse XDB C-8, з розміром частинок 5,0 мкм. Швидкість потоку - 0,75 мл / хв. Довжина хвилі детектування - 272 нм. Температура термостата колонки - 40С. Об'єм, що вводиться в інжектор хроматографа проби, - 20мкм. Ідентифікація вітаміну К1 проводилася шляхом зіставлення часу утримування і спектра поглинання в УФ-області з його РСО фірми «Sagmeil» /

Побудова калібровачного графіка. Близько 0,033 РСО г (точна наважка) вітаміну К1 розчиняли в мірній колбі місткістю 25 мл і доводили об'єм розчину до мітки метанолом (вихідний А розчин). З розчину А готували низку робочих розчинів РСО в концентраціях від 0,00096 до 0,0800%. Отримані розчини аналізували методикою ВЕРХ при вищевказаних умовах, результати яких представлені в Таблиці 2. [14]

Таблиця 2

Розрахунок концентрації разчина РСО віт К1, мкг/мл

2. Вивчення флавоноїдів. Виділення флавоноїдів з трави гірчак пташиного проводили за допомогою колонкової хроматографії.

Для цього надземну частину (1,5 кг) гірчака пташиного екстрагували 3 рази 70% етиловим спиртом. З об'єднаного вилучення відганяли спирт (вихід склав 1,09%), залишок розбавляли водою і обробляли послідовно екстракційним бензилом, хлороформом, етилацетат і н-бутанолом. Перехід флавоноїдів у витягання перевіряли методом ТШХ на пластинках «Silufol UF-254» у системі розчинників хлороформ-метанол у співвідношенні 4:1. У результаті було виявлено, що в етілацетатну фракцію переходить найбільша кількість флавоноїдних сполук (13,1 г). Далі цю фракцію хроматографували на колонці з силікагелем. Колонку елюювали сумішшю хлороформу і метанолу в різних співвідношеннях (97:3, 95:5, 90:10, 85:15, 80:20).

З етілацетатной фракції 105-112 С було виділено 0,73 г речовини «А», з фракції 118-125 С-0, 92 г речовини «В», а з фракції 129-135-0,72 г речовини «С». Для ідентифікації виділених речовин були вивчені їх температури плавлення, УФ-, ІЧ-, ЯМР-спектри.

3. Вивчення полісахаридного складу. 50 г повітряно-сухої сировини рослини інактивувати сумішшю хлороформ-метанол у співвідношенні 1:1 для видалення речовин не вуглеводного характеру. Після інактивації залишок сушили і 3 рази екстрагували очищеною водою у співвідношенні 1:4 при кімнатній температурі на протязі 2 год. Екстракти фільтрували, об'єднували, згущували до 100 мл і видали білки за методом Севага. Далі екстракти знову упарювали до невеликого обсягу, обробляли 96% етиловим спиртом (1:3), осад відокремлювали, промивали і сушили. Вихід водорозчинних полісахаридів (ВРПС) -0,33 г (1,6%).

Моносахаридний склад отриманих ВРПС вивчали методом ГЖХ на хроматографі «Chrom-5», забезпеченому полум'яно-іонізаційним детектором і колонкою з нержавіючої сталі (200 * 0,3). Сорбент-5% Silikone XE 60, на хроматоне NAW. Величина часток-0 ,200-0, 255 мм, температура колонки-210 С; швидкість азоту-60 мл / хв. Для визначення полісахаридного складу трави гірчака пташиного 0,1 г отриманих ВРПС гідролізували 3 мл 2 н розчину сірчаної кислоти при 100 С протягом 6 год. Гідролізати нейтралізували карбонатом барію і фільтрували. Потім фільтрати обробляли катіонітів КУ-2 (Н +) і випарюють до отримання сиропоподібної маси. Якісний склад моносахаридів вивчали методом БХ в системі бутанол-пірідин-вода (6:4:3).

. Вивчення макро- та мікроелементного складу. Для дослідження елементного складу використовували мас-спектрометричний метод: індукційно зв'язаною плазмою мас-спектрометр ICP-MS AT 7500А, забезпечений перістатичним насосом Peri Pump, мас-детектором і спеціальною програмою «Chemstation» для обробки результатів. Газ-носій - аргон, потужність - 1200 Вт, час інтегрування - 0,1 сек, обсяг проби - 1 мл, температура плазми - 7000 С. Результати проведених досліджень представлені в Таблиці 3.

Макро- і мікроелементний склад трави Polygonum aviculare

Обговорення результатів.

Отримані дані хроматографічного аналізу гексанового витягу з трави Polygonum aviculare L і вивчення УФ-спектру елюата з хроматограми показали наявність в ньому 4 максимума поглинання при λ = 243, 249, 255, 261 нм, які збігаються з максимумами його РСО і даними, наведеними в літературі . Отже, виділене речовина є вітаміном К1. На підставі ВЕРХ досліджень було встановлено, що кількісний вміст вітамін К1 у траві горця пташиного становить 2,85 мкг / г.

Интерпритація отриманих даних з ідентифікації виділених хроматографією речовин флавоноїдного характеру шляхом вивчення їх температури плавлення, УФ-, ІЧ-, ЯМР - спектрів показала, що представлені речовини А, В, С є ліквірітон, авикулярин і цинарозидом відповідно. Слід зазначити, що серед останніх ліквірітін і цинарозид з даного виду сировини виділені були вперше. Зміст вже відомого флавоноїду авикулярин обгрунтовує терапевтичну активність даної рослини, який за літературними даними має кровоспинну дію.

Речовина «А» - ліквірітин (4-В-D-глюкопіранозид). Жовтий порошок, речовина складу, т. пл. 140-142 С. УФ спектр: λ max (етанол): 270,364 нм. В ІК - спектрі Vmax (KBr), см-1 є смуги поглинання гідроксильних груп 3332 (ОН), 2922, 2854 (валентні коливання СН, СН2), 1650 (С = О при С-4), 1608, 1579, 1512 ( ароматичні кільця).

Речовина «В» - авикулярин - Кверцетин 3 - а-L-арабофуранозід, - жовтий порошок, т. пл. 200-201 С. УФ - спектр: λmax (метанол): 257, 300, 356 нм.

Цинарозид (лютеолін-7-О-В-D-глюкопіранозид) - жовтий порошок,, т. пл. 240-242 С. УФ-спектр: λmax (метанол): 251,368,350 нм. В ІК - спектрі Vmax (KBr), см-1 є смуги поглинання гідроксильних груп 3313 (ОН), 2926,2854 (валентні коливання СН), 1656 (С = О при С-4), 1601,1563,1528 (ароматичні кільця ).

У результаті проведених досліджень з трави гірчака пташиного було виділено 0,33 г (1,6%) ВРПС, які представляють собою аморфні порошки кремового кольору, добре розчинні у воді і утворюють нев’язкі розчини. Не містять крохмалю, про що свідчила негативна реакція з розчином йоду. Дані БХ і ГЖХ аналізу гідролізатів ВРПС показали вміст таких моносахаридів, як галактоза (11,3%), глюкоза (75,1%), арабіноза (12,7%), сліди ксилози і незначна кількість уронової кислоти (проявник - кислий фталат аніліну ) з Rf 0,52, 0,33, 0,29, 0,34, 0,05 відповідно. Необхідно відзначити, що на відміну від інших видів надземна частина Polygoni avicularis L., зібраної на території Ташкента, містить галактозу, глюкозу.

Встановлено, що трава гірчака пташиного містить 18 мікроелементів. З них найбільшу кількість становлять кальцій, калій і магній. Отримані дані дозволяють рекомендувати траву гірчака пташиного не тільки як кровоспинний засіб, але і як джерело нативних макро-і мікроелементів, а також засоби для профілактики і терапії серцево-судинних захворювань (калій і магній).

Висновки. За результатами хімічного вивчення на вміст БАР було встановлено, що трава Polygonum aviculare L. Містить вітамін К1, флавоноїди, моносахариди (глюкоза, арабиноза, галактоза), а також макро-і мікроелементи (кальцій, калій і магній). При визначенні компонентного складу флавоноїдів було ідентифіковано та кількісно визначено 3 речовини: ліквірітин (0,05%), цинарозид (0,048%) і авикулярин (0,06%). Серед останніх ліквірітин і цинарозид з трави Polygonum aviculare L. виділені вперше. [4, 10, 17]

Розділ 3

.1 Використання та застосування в медицині

Трава гірчака пташиного відрізняється багатосторонніми фармакологічними властивостями, що залежать від вмісту в рослині різних біологічно активних сполук. Галенові форми з рослини, підвищують діурез, виводять з сечею надлишок іонів натрію і хлору, внаслідок чого збільшується фільтрація в ниркових клубочках і зменшується зворотня реабсорбція в ниркових канальцях. Трава гірчака пташиного перешкоджає утворення сечових каменів, що пов'язують з вмістом в галенових препаратах рослини розчинних сполук кремнієвої кислоти, які в досить значних концентраціях видаляються з сечею. При проходженні сечових шляхів вони грають роль захисного колоїду, що зменшує ступінь кристалізації мінеральних солей, перешкоджаючи тим самим утворенню сечових каменів.

Галенові препарати рослини позитивно впливають на функцію шлунково-кишкового тракту завдяки дубильним речовинам, що володіють антимікробними, протизапальними і в'яжучими властивостями. Флавоноїди, сполуки кремнію і дубильні речовини рослини зменшують проникність стінок судин, підвищують згортання крові. Крім того, рослина підвищує скоротливу здатність гладком'язових органів, головним чином посилюючи скорочення матки. Галенові препарати гірчака пташиного і збори, в яких рослина є основним компонентом, застосовують при хронічних захворюваннях сечовивідних шляхів, послабленні фільтраційної функції ниркових клубочків і появу в сечі великої кількості мінеральних солей, особливо солей щавлевої кислоти. Препарати рослини в якості допоміжних засобів призначають у початкових стадіях сечокам'яної хвороби, в післяопераційний період після видалення сечових каменів, при сечокислому діатезі, ряді шкірних захворювань (вугрі, фурункули, деякі дерматити). [#"780683.files/image023.gif"> 

.2 Протипоказання

Є категорії хворих, яким протипоказані конкретно препарати зі споришу. Це в першу чергу вагітні жінки. Ця рослина може спровокувати викидень або маткові кровотечі. Також не можна приймати препарати з цієї трави при запальних процесах, що знаходяться в гострій фазі і локалізуються в нирках і сечовому міхурі. Не можна використовувати ліки з цієї рослини і при схильності до тромбоутворення, тому що спориш ще сильніше активізує агрегацію тромбоцитів. Може завдати шкоди використання препаратів з цієї рослини і тим людям, хто страждає стенокардією, а також хворим, які перенесли інсульт або інфаркт. Особливо це стосується людей похилого віку. Небажано використовувати цю траву і тим пацієнтам, у яких поєднується наявність каменів у жовчному міхурі та знижений кров'яний тиск.