Лактобактерии, проникая в ЖКТ, оседают на слизистой оболочке. В результате взаимодействия с энтероцитами они запускают защитные механизмы организма: ускоряют регенеративные процессы в слизистой оболочке, активизируют образование антител к патогенам, усиливают продукцию лизоцима, поддерживают рН в кишечнике и влагалище на оптимальном уровне[15, c.55]
1.5 Основные пробиотические штаммы лактобацилл
На долю поликомпонентных препаратов пробиотиков, содержащих штаммы одного вида и разных видов микроорганизмов, приходится47%. Бифидосодержащие препараты составляют 17%, колисодержащие - 7%, содержащие лактобактерии - 22%, из непатогенных представителей рода Bacillus - 15%, дрожжи - 5%, других видов микроорганизмов - 4%, комбинированных - 35% от общего числа препаратов пробиотиков. На долю препаратов иммобилизованных микроорганизмов приходиться всего 3%, синбиотиков - 30% от общей цифры [14, С. 127--128].
Род лактобактерии, наряду с родом бифидобактерии, содержит набольшее число видов и отельных штаммов пробиотиков. В общем случае, пробиотики -- это микроорганизмы, в отношении которых научные исследования показали, что они могут быть полезны вашего здоровья. Некоторые виды пробиотиков входят в состав микрофлоры человека, некоторые близки к микрорганизмам, имеющимся у людей. Разные штаммы могут быть по-разному полезными для различных органов. Например, штамм Shirota вида Lactobacilluscasei поддерживают иммунную систему и помогает продвижению пищи через кишечник, штамм Bulgaricus вида Lactobacillusdelbrueckii полезен для пациентов, не способных переваривать содержащуюся в натуральном молоке и большинстве молочных продуктах лактозу. Далеко не все виды и штаммы лактобактерий являются пробиотиками. Конкретные пробиотические виды и штаммы лактобактерий, включаемые в различные лекарства, БАДы и продукты, перечислены ниже.
«A07 Противодиарейные препараты», код «A07FA01 Микроорганизмы, продуцирующие молочную кислоту» и «G01 Антисептики и противомикробные препараты для лечения гинекологических заболеваний», код «G01AX14 Лактобациллы».
Различные виды и штаммы лактобацилл широко используются в составе лекарств, в том числе, пробиотиков для лечения дисбактериозов разной этиологии, заболеваний полости рта, урогенитальной сферы, желудочно-кишечных расстройств, а также в составе БАДов. Ниже даны некоторые примеры, в состав каких лекарств и БАДов входит данный штамм:
Lactobacillusacidophilus, штаммы NK1, 100аш и К3Ш24 -- лекарственный препарат Ацилакт
Lactobacillusacidophilus, штаммы NK1, NK2, NK5 и NK12 -- лекарственный препарат Аципол
Lactobacillusacidophilus, штамм 12б -- лекарственный препарат Биобактон сухой
Lactobacillusacidophilus, штамм LA-5 -- БАД Бифиформ Комплекс
Lactobacillusacidophilus, штаммы Д № 75 и Д № 76 -- БАД Витафлор
Lactobacillusacidophilus sp. L. gasseri -- лекарственный препарат Линекс
Lactobacillusacidophilus, штамм К/А R-08 -- БАДы Витанар и Гиалакт
Lactobacilluscasei, штамм КНМ-12, Lactobacillusacidophilus, штаммы NK1, Lactobacillusplantarum, штамм 8Р-А3 -- БАД Нормоспектрум[1]
1.6 Характеристика отдельных штаммов лактобацилл
Данные о том, кто первый открыл лактобактерии очень разные.
Многие исследователи считают, что первооткрыватель лактокультур - это Луи Пастер, который открыл их в 1857 году. Другая же половина исследователей склоняется к тому, что обнаружил впервые эти бактерии Стамен Григоров в 1905 году при изучении айрана.
Сегодня открыто и изучено уже более 100 различных видов лактобактерий, самые распространенные из них:
- Lactobacilluscasei - сырная палочка;
- Lactobacillusacidophilus - ацидофильная бактерия;
- Lactobacillusdelbrueckii subsp. Delbrueckii - дельбрюковская бактерия;
- Lactobacillusbulgaricus - болгарская палочка (знаменитый компонент настоящего йогурта);
- Lactobacillusplantarum -молочнокислая лактобактерия.
Большая часть лактобактерий «участвует в работе» органов пищеварения, способствуют усвоению организмом положительных микроэлементов и витаминов. Например, ацидофильная палочка нужна для системы пищеварения и помогает переварить молочные продукты. Маленьким детям, лактобактерии помогают побороть вредные микроорганизмы (стафилококков, кишечные палочки, протеи, стрептококки и иные). Благодаря лактобактериям улучшается процесс пищеварения.
В природе лактобактерии можно встретить в верхних слоях почвы. Чем больше в почве органических веществ, тем больше в них будет лактобацилл. Жить и размножаться бактерии могут в растениях. Например, дельбрюковская бактерия, находится в овощах и злаковых культурах и с помощью данной бактерии происходят основные процессы при заквашивании огурцов, капусты и помидоров.
Для человека же больший интерес представляют бактерии, которые могут принести пользу.
Одним из самых полезных свойств лактокультур - это способность сквашивать молоко. Именно благодаря этой способности бактерий, мы можем наслаждаться вкусными и полезными ряженками, сырами и йогуртами. Другим полезным свойством лактобактерий, является то, что лактобациллы создают кислую среду, в которой не способен выжить ни один микроб. А это значит, что лактобактерии обладают прекрасным бактерицидным действием.
Лактобактерии активируют процесс брожения и содержатся в таких продуктах, как айран, кумыс, молоко, масло, йогурты и фруктовые творожные массы, и кисломолочные напитки. В специально приготовленных, для детей и больных людях, молочных смесях тоже содержатся лактобактерии.
Частицы «лакто», «ацидо», «био» и «бифидо» показывают, что в таких продуктах есть полезные бактерии.
Lactobacillus- это название бактерии и переводится оно дословно с латыни как «обитающая в молоке бактерия». Кефир, йогурты, простокваши и сыры изготавливаются путем добавления в молоко разнообразных полезных бактерий и штаммов лактокультур.
Лактобактерии обитают в организме человека и это одни из самых необходимых бактерий в организме человека. Задача данных бактерий - это защита и безопасность кишечника, от токсинов и других вредоносных элементов. Лактобактерии способствуют улучшению пищеварения, помогают организму усвоить различные витамины, микроэлементы и повышают иммунитет.[16, 127-128].
1.6.1 Штамм бактерий Lactobacillus acidophilus
Штамм бактерий Lactobacillus acidophilus n.v. ep 317/402-x "баланс-наринэ", используемый для приготовления противогастритного и противоязвенного кисломолочного продукта.
Изобретение относится к биотехнологии и медицинской микробиологии и представляет собой штамм лактобактерий вида Lactobacillus acidophilus, который может быть использован для получения кисломолочных лечебно-диетических продуктов. Штамм Lactobacillus acidophilus N.V. Ep 317/402-Х (авторское наименование "Баланс-Наринэ") получен путем селекции исходной культуры Lactobacillus acidophilus N. V. Ep 317/402 "Наринэ" и направленного отбора по следующим показателям: антагонистическая активность по отношению к микроорганизмам, вызывающим желудочно-кишечные заболевания, в частности патогенным бактериям Helicobacter pylori, вызывающим различные формы гастритов и язв желудка и двенадцатиперстной кишки; способность продуцировать полезные вещества (витамины, аминокислоты, антиоксиданты); устойчивость мембранных структур бактериальных клеток к внешним факторам (кислотность, температура и т. п. ), обеспечивающая сохранение высокого титра лактобактерий в процессе хранения. Штамм Lactobacillus acidophilus обладает более широким спектром антагонистической активности, в частности, в отношении патогенных бактерий Helicobacter pylori, вызывающих различные формы гастритов и язв желудка и двенадцатиперстной кишки, и значительно большим содержанием полезных веществ, необходимых для коррекции дисбактериозов и различных желудочно-кишечных заболеваний.
Формула изобретения
Штамм бактерий Lactobacillus acidophilus N. V. Ep 317/402-Х МЦКМ В-17 (авторское наименование "Баланс-Наринэ"), используемый для приготовления противогастритного и противоязвенного кисломолочного продукта.
Препараты и продукты, содержащие в своем составе лактобактерии, широко используются для профилактики и лечения дисбактериозов и нормализации микрофлоры кишечника людей, перенесших стрессовые воздействия, антибиотико- и химиотерапию.
Предшествующий уровень техники за рубежом широко используют препараты-пробиотики и продукты лечебного питания на основе штаммов лактобактерий вида Lactobacillus acidophilus (патент США 3639666; патент Франции 2622452; патент Швейцарии 637297; патент ФРГ 2421066; патент Японии 05227946; Международная заявка (WO) 93/09793).
Однако штаммы лактобактерий зарубежных фирм-разработчиков ориентированы на создание, преимущественно, лечебно-профилактических препаратов и БАД в сухой форме (таблетки, капсулы). Указанные штаммы имеют существенные недостатки, если их использовать для приготовления препаратов и кисломолочных продуктов в жидкой форме: малые сроки хранения указанных препаратов и продуктов, низкие органолептические качества, которые несущественны для препаратов в сухой форме.
Известен штамм ацидофильных бактерий Lactobacillusacidophilus-13 (Арагац), депонированный под номером 9606 в музее культур Института микробиологии НАН Армении (Заявка на патент РФ 94017944, МПК С 12 N 1/20, опубл. 27.03.96 г.). Штамм устойчив к антибиотикам, антисептическим и химиотерапевтическим тест-препаратам. Штамм был получен методом химического мутагенного воздействия, то есть путем внесения в среду культивирования летальных для штамма доз химических препаратов и дальнейшего размножения единичных выживших от экстремального воздействия лактобактерий.
Однако отсроченная биологическая безвредность полученного таким образом штамма и продуктов на его основе детально не изучена, хотя у него отсутствует острая токсичность при апробации в клинических условиях.
Известен штамм Lactobacillus acidophilus N.V. EP 317/402 "НАРИНЭ" ААА, используемый при приготовлении препаратов, диетических и лечебно-профилактических продуктов для лечения дисбактериоза и его последствий (Патент РФ 2146454, МПК А 23 С 9/12, опубл. 20.03.2000 г.). Штамм получен в результате отбора из исходной культуры Lactobacillus acidophilus N. V. EP 317/402 "НАРИНЭ" селекцией по антагонистической активности в отношении кишечной микрофлоры, устойчивости к антибиотикам широкого спектра действия.
Однако, несмотря на направленную селекцию указанного штамма по антагонистической активности в отношении кишечной микрофлоры, он не подавляет жизнедеятельность в желудочно-кишечном тракте таких патогенных бактерий, как Helicobacter pylori, которые вызывают разрушение слизистой оболочки кишечника и желудка и приводят к различным формам гастрита и язвенным болезням желудка и двенадцатиперстной кишки.
Наиболее близким аналогом (прототипом) является штамм Lactobacillus acidophilus N. V. EP 317/402 "НАРИНЭ" (А. с. СССР 163573, МПК С 12 N 1/20, опубл. 27.04.1964 г.). Исходная культура выделена из фекалий новорожденного здорового ребенка. Штамм идентифицирован и получен Л.А. Ерзинкяном в институте микробиологии АН Армении. Среды культивирования: молоко цельное или обезжиренное стерилизованное, молочная сыворотка стерилизованная. Температура культивирования +37-39oС. Факультативный анаэроб. Время образования сгустка - 3-7 час в зависимости от температуры инкубации и количества внесенной закваски (1-3%) в молоко. Частота пересева культуры - 1 раз в месяц. Количество клеток бактерий штамма в 1 мл закваски "Наринэ" насчитывается в пределах 150-250 млн. Штамм входит в группу ацидофильных бактерий, являющихся микроаэрофилами. Минимальная температура роста свыше 20oС, оптимальная 35-39oС, летальная 68-70oС. Максимум кислотообразования в молоке 300-360oТ. Данный штамм продуцирует значительное количество полезных для человека, особенно для детского организма, антимикробных веществ.
Однако штамм-прототип обладает недостаточной антагонистической активностью, в частности не подавляет жизнедеятельность в желудочно-кишечном тракте таких патогенных бактерий, как Helicobacter pylori, которые вызывают разрушение слизистой оболочки кишечника и желудка и приводят к различным формам гастрита и язвенным болезням желудка и двенадцатиперстной кишки.
Техническим результатом предлагаемого изобретения является штамм лактобактерий Lactobacillus acidophilus, обладающий более широким спектром антагонистической активности, в частности в отношении патогенных бактерий Helicobacter pylori, вызывающих различные формы гастритов и язв желудка и двенадцатиперсной кишки и значительно большим содержанием полезных веществ, необходимых для коррекции дисбактериозов и различных желудочно-кишечных заболеваний.
Указанные результат достигается получением штамма Lactobacillus acidophilus N. V. Ep 317/402-X (авторское наименование "Баланс-Наринэ") путем селекции исходной культуры Lactobacillus acidophilus N.V.Ep 317/402 "Наринэ" и направленного отбора по следующим показателям: - антагонистическая активность по отношению к микроорганизмам, вызывающим желудочно-кишечные заболевания, в частности, патогенных бактерий Helicobacter pylori, вызывающих различные формы гастритов и язв желудка и двенадцатиперсной кишки; - способность продуцировать полезные вещества (витамины, аминокислоты, антиоксиданты); - устойчивость мембранных структур бактериальных клеток к внешним факторам (кислотность, температура и т.п.), обеспечивающая сохранение высокого титра лактобактерий в процессе хранения.
Заявляемый штамм Lactobacillus acidophilus N.V.Ep 317/402-X "Баланс-Наринэ" депонирован под МЦКМ В-17 в Коллекции Межрегионального центра коррекции микроценоза человека (г. Новосибирск).
Штамм Lactobacillus acidophilus N.V.Ep 317/402-X "Баланс-Наринэ" имеет следующие свойства.
Культурально-морфологические: Неподвижные аспорогенные палочки 2-20 х 0,8-0,9 мкм, клетки расположены одиночно или в виде коротких цепочек, неподвижны, грамположительные, спор и капсул не образуют.
По Граму окрашиваются положительно. При окрашивании метиленовой синью в клетках наблюдаются четко выраженные метахроматические зерна.
Гомоферментативные, микроаэрофилы. Колонии на элективных агаризованных питательных средах глубинные, мелкие, чаще образуют клубки в виде перепутанных нитей.
Физиологические свойства:
Минимальная температура роста 20oС, оптимальная +37-39oС.
Предлагаемый штамм имеет повышенную протеолитическую, ароматообразующую, антагонистическую активность, синтезирует в молоке витамины, аминокислоты.