Статья: Иксодовые клещи как переносчики возбудителей природно-очаговых заболеваний в эпидемический сезон 2017 г. на территории Приморского края

Анализ зараженности иксодовых клещей в административных районах Приморского края.

Наибольшее число обращений в ЛФВИ со стороны пострадавшего от укусов клещей населения поступило с южных и юго-восточных районов Приморья. При этом, 32,6% случаев укусов зафиксировано на территории Владивостокского городского округа (ГО) и Надеждинского района (30,7%).

При лабораторном исследовании методом ИФА антиген ВКЭ наиболее часто выявлялся на территории Владивостокского ГО - 11 случаев (4,7%) из 233 экз. иксодовых клещей. При исследовании 149 экз. клещей на зараженность бактериальными инфекциями методом ОТ-ПЦР-РВ на территории Владивостокского ГО возбудители ИКБ были обнаружены в 35 случаях (23,5%), МЭЧ - в 3 случаях (2%), ГАЧ - в 5 случаях (3,4%). В 1 случае (0,9%) был выявлен генетический маркер вируса КЭ.

В Надеждинском районе показатель вирусофорности клещей при исследовании методом ИФА составил 1,2% (3 случая) из 241 проанализированного образца. Анализ 129 экз. клещей на зараженность возбудителями клещевых инфекций выявил наличие ДНК B. burgdorferi s.l. в 38 случаях (29,5%), ДНК A. phagocytophillum в 2 случаях (1,6%). РНК вируса КЭ, а также возбудителя МЭЧ на территории Надеждинского района выделено не было (табл. 3).

Таблица 3. Случаи выявления возбудителей клещевых инфекций методом ОТ-ПЦР-РВ в клещах, присосавшихся к людям на различных административных территориях Приморского края в 2017 году

Антиген ВКЭ на территориях Артемовского ГО и Шкотовкого района обнаружен не был. При исследовании 36 экз. иксодовых клещей методом ОТ-ПЦР-РВ были зарегистрированы положительные находки: РНК вируса КЭ детектирована в 2 случаях (5,6%), ДНК боррелии обнаружены в 9 случаях (25%), анаплазмы - в 2 случаях (5,6%), эрлихии - в 1 случае (2,8%) (табл. 4).

Таблица 4. Случаи выявления антигена вируса КЭ методом ИФА в клещах, присосавшихся к людям на различных административных территориях Приморского края в 2017 году

На территориях городских округов Находки и Большого Камня выявляемость антигена ВКЭ составила 1,9% (2 случая из 105 исследованных образцов). В этих районах обнаружены единичные находки генетических маркеров ИКБ и ГАЧ. При этом, случаев инфицирования клещей МЭЧ и вирусом КЭ установлено не было.

Значительно меньшее количество образцов иксодовых клещей было получено для исследования с северных территорий Приморского края (северо-западные и северо-восточные районы Сихотэ-Алиня), районов Приханкайской низменности, Хасанского, Лазовского, Партизанского, Анучинского, Чугуевского районов, а также с территорий Партизанского и Арсеньевского городских округов и пригородных зон, ЗАТО Фокино. Обращаемость в ЛВФИ по поводу присасывания клещей колебалась от 3,5% (36 случаев в Хасанском районе) до 1,2% (12 обращений из северных районов края). Антиген вируса КЭ был выявлен в единичных случаях в ГО, ЗАТО Фокино, Хасанском, Тернейском, Ханкайском районах. В Спасском районе и Уссурийском ГО было зафиксировано по 2 случая выявления антигена ВКЭ. В Партизанском, Лазовском районах, также на территориях северо-западного Сихотэ-Алиня (Кировский, Дальнереченский, Красноармейский, Пожарский районы) антиген ВКЭ не выявлен. Методом ОТ-ПЦР-РВ лишь в одном исследуемом образце из Анучинского района удалось определить генетический маркер вируса КЭ. Инфицирование клещей возбудителями ИКБ установлено на территориях Хасанского района (5 случаев), Чугуевского района (3 случая), а также по 1 случаю зафиксированно в Спасском районе и Партизанском ГО. В 2 переносчиках из Хасанского района и в единичных случаях из Кавалеровского района и Находкинского ГО обнаружена ДНК A. phagocytophillum. ДНК E. chaffeensis / E. muris идентифицирована лишь в 1 случае на территории Лазовского района (Таблица 3,4).

Полуколичественная оценка бактериальной нагрузки B. burgdorferi s.l на территории Приморского края.

В связи с наиболее частым обнаружением возбудителей ИКБ в анализируемом материале, нами была проведена полуколичественная оценка результатов выявления генетических маркеров B. burgdorferi s.l. методом ОТ-ПЦР-РВ. Величины пороговых циклов (Ct) при выявлении кДНК B. burgdorferi s.l. варьировали в диапазоне значений от 12,2 до 35,8 (что соответствует максимальной и минимальной концентрации патогенов). Среднее значение порогового цикла составило 22,5. При оценке различия значений пороговых циклов, 31,6% образцов был отнесен нами в группу с низкими показателями Ct (? 20). Для 57,1% случаев были определены значения Ct в пределах 20,1?28,9 пороговых циклов.11,2% образцов характеризовались наибольшими значениями Ct, превышающими 29 цикл.

При этом для материала, полученного из разных районов Приморского края, нами были показаны различия в значениях средних показателей пороговых циклов и было установлено варьирование распределения образцов по группам в зависимости от величины Ct. Так, на территории Надеждинского района среднее значение Ct составило 21,7. В пороговые группы со значениями Ct ? 20 и 20,1-28,9 были отнесены по 16 образцов (по 42,1%). Среднее значение порогового цикла для экземпляров клещей с о. Русский составило 23,1. При этом 29,4% (5 случаев) относилось к группе с низкими показателями Ct, а в группу с диапазоном значений 20,1?28,9 вошли 58,8% образцов (10 случаев). На территории г. Владивостока превалировали показатели в пределах 20,1?28,9 циклов (76,2%), при среднем показателе Сt = 23,6. В Шкотовском районе среднее значение Ct составило 21,1, в группу ? 20 было отнесено 3 образца, в группу с диапазоном 20,1?28,9 циклов отнесено 4 образца. Следует также отметить, что средние значения пороговых циклов для материала из Хасанского района, Находкинского и Партизанского городских округов не превышали 18,6. Все единичные образцы, полученные из Лазовского и Чугуевского районов, а также с территории Артемовского ГО, были отнесены в среднюю пороговую группу (Ct = 20,1?28,9).

Известно, что значения величин порогового цикла (Ct) характеризуют концентрацию генетического материала возбудителя в исследуемом материале [18]. Для значительного количества проанализированных образцов из различных районов Приморского края зафиксированы абсолютные значения Сt, находящиеся в пределах низких (? 20) и средних диапазонов (до 29 цикла), что может говорить о высокой интенсивности бактериальной нагрузки B. burgdorferi s.l. на данных территориях.

Анализ зараженности иксодовых клещей на территории Владивостокского ГО.

В силу урбанизации, и ее социально-экономических последствий, таких как увеличение площади городов, присоединение к ним близлежащих населенных пунктов, а также роста численности городского населения, городские жители чаще, чем сельские, подвергаются риску встречи с иксодовыми клещами на территориях синантропных (урбанических) очагов, расположенных непосредственно в границах городов. Владивосток с его обширной пригородной зоной является самым густо населенным районом Приморского края. При этом на территории Владивостокского ГО расположены многочисленные лесные ландшафты, которые определяют наличие очагов инфекций, передаваемых иксодовыми клещами.

Наибольшее число обращений по поводу присасывания клещей приходилось на территории, являющиеся основными местами массового отдыха жителей города и края, такие как острова - Русский, Попова, Рейнеке (77 случаев ? 26,3%), и прибрежные зоны Владивостока, включая микрорайоны Емар и окрестности бух. Лазурной (59 случаев ? 20,1%), а также микрорайоны Седанка, Океанская и Санаторная (42 случая ? 14,3%). Частота обращения среди лиц, проживающих на территории или посещавших лесные и лесопарковые зоны пригорода Владивостока ? районы Садгорода, Весенней, Спутника, поселка Трудовое ? составила 11,3% (33 случая). 17 случаев присасывания клеща (5,8%) зафиксировано на территории Ботанического сада-института ДВО РАН. На территориях лесных массивов и прибрежных зон бухт Улисс, Патрокл, Тихая и Горностай от укусов клещей пострадали 11 человек (3,8%). В пределах района Дальхимпрома и нового микрорайона Снеговой пади частота обращений составила 8,2% (24 случая). 21 случай (7,2%) присасывания клеща был зафиксирован в районе лесных зон Второй речки, Зари и в окрестностях Академгородка. На внутригородских территориях (парк Минного городка, район Первой речки, а также улиц Нейбута и Некрасовская) число обращений по поводу присасывания клеща составило 9 случаев (3,1%). В 39 случаях укусов клещей, зафиксированных на территории г. Владивостока, районы встречи с переносчиком указаны не были.

Среди исследуемых образцов иксодовых клещей, проанализированных методом ОТ-ПЦР-РВ, наиболее часто выявляемыми возбудителями были боррелии. ДНК B. burgdorferi s.l. детектирована во всех районах Владивостокского ГО. Наибольшее количество случаев (17) зафиксировано на островных территориях. На материковой части случаи выявления ИКБ колебались от 1 до 5 в различных микрорайонах г. Владивостока.

Генетические маркеры прочих бактериальных инфекций (ГАЧ и МЭЧ) были идентифицированы в материале, полученном с островов и прибрежных зон Владивостока. ДНК A. phagocytophillum ? 4 случая (бух. Лазурная, микрорайон Седанка, о. Русский), ДНК E. chaffeensis / E. muris ? 2 случая (о. Русский, бух. Патрокл). РНК вируса КЭ детектирована лишь в 1 образце на территории микрорайона Снеговая падь.

Антиген вируса КЭ был выявлен в клещах из лесных зон окрестностей Владивостока (микрорайон Спутник) - 2 случая, внутригородских территорий (микрорайон Снеговая падь, ул. Некрасовская) - 2 и 1 случай, соответственно, а также в образцах с о. Рейнеке и района бух. Лазурная - по 1 случаю.

Рис. Случаи выявления возбудителей клещевых инфекций методом ИФА и ОТ-ПЦР-РВ на территории Владивостокского ГО в 2017 году

Таким образом, для территории г. Владивостока и его окрестностей показана циркуляция вируса КЭ, возбудителей ИКБ, а также новых для Приморского края инфекционных агентов МЭЧ и ГАЧ. По результатам исследования иксодовых клещей, присосавшихся к людям на территории Владивостокского ГО, нами показано, что возбудители бактериальных инфекций (B. burgdorferi s.l., A. phagocytophillum, E. chaffeensis / E. muris) наиболее часто выявлялись на о. Русском. Так, зараженность клещей боррелиями там достигала 44,7%, ДНК A. phagocytophilum выявлена в 5,3%, E. chaffeensis / E. muris ? в 2,6 % случаев. Кроме того, 8,2% исследуемых клещей с данной территории оказались микст-инфицированы двумя патогенами. Сочетание B. burgdorferi s.l. + A. phagocytophillum обнаружено в 5,6% случаев, B. burgdorferi s.l. + E. chaffeensis / E. muris в 2,6%. Полученные результаты позволяют предположить, что на территории о. Русский функционируют активные природные очаги бактериальных инфекций, в том числе микст-инфекций, передаваемых иксодовыми клещами. На основании этого, о. Русский может быть отнесен к потенциально опасным районам г. Владивостока в плане заражения возбудителями ИКБ, ГАЧ, МЭЧ, что в свою очередь, говорит о необходимости дальнейшего изучения эпидемической ситуации на данной территории (рис. 1).

Генетические маркеры двух возбудителей - РНК вируса КЭ и ДНК B. burgdorferi s.l. были выявлены в новом микрорайоне Снеговая падь, к которому прилегают обширные лесные массивы. Данный микрорайон представляет собой антропогенно-преобразованный ландшафт, который в недавнем прошлом являлся естественным биотопом иксодовых клещей. Об этом говорит, как обращаемость населения по поводу присасывания клеща (8,2%), так и частота обнаружения возбудителей клещевых инфекций (в 5 из 22 проанализированных экз. клещей выявлены возбудители каких-либо инфекций).