Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

Kamphuis и соавт. [32] в Голландии провели скрининг антиэритроцитарных антител у женщин в первом триместре беременности. Особое внимание обращали на антитела системы Kell. Сравнивали показатели смертности новорожденных до и после 1998 г., а также оценивали уровень гемоглобина у плода при внутриутробном переливании крови, которое проводили с целью лечения плодов в случае обнаружения антител системы Kell и возникновении подозрения на анемию плода, обусловленную указанными антителами. Авторы отметили, что проведение внутриутробных переливаний плоду в случае сенсибилизации беременных к антигенам системы Kell позволило улучшить показатели перинатальной выживаемости.

Описана посттрансфузионная реакция замедленного типа, обусловленная антителами анти-Kp a (Koshy и соавт. [36]). Реципиент, 52-летняя женщина, европейка, получила трансфузию нескольких доз эритроцитов, одна из которых оказалась Kp(a + ). Аллоиммунизация к указанному антигену до гемотрансфузии не была выявлена. Отмечено тяжелое посттрансфузионное осложнение: глубокая анемия, почечная и печеночная недостаточность.

Lee и соавт. [38] привели случай, когда анти-K-антитела матери блокировали эритроциты K-положительного новорожденного и антиген K на них не выявлялся при исследовании с помощью гелевого метода. В элюатах с эритроцитов определялись материнские анти-K-антитела.

Описан больной, имевший аутоантитела anti-Kp b IgM (Bosco и соавт. [9]). Антиглобулиновый тест с анти-IgG-сывороткой был отрицательным. Положительные реакции получены с анти-IgM-сывороткой, элюаты с эритроцитов больного содержали anti-Kp b-антитела, которые реагировали в прямой агглютинационной пробе. Аутоантитела экранировали антигенные эпитопы, поэтому при первичном исследовании эритроциты больного были тестированы как K–k–Kp(a −)Kp(b −). Фенотип больного мог быть расценен как Knull, если бы не положительная реакция с анти-Js b-антителами, указывающая на присутствие в эритроцитах Kell-гликопротеина. Позднее реакции с антителами анти-k и антиKp b стали положительными. Молекулярно-генетическими исследованиями показано отсутствие каких-либо мутаций в гене KEL обследуемого. Пациент оказался гомозиготным по генам k и Kp b.

При обследовании 87 665 доноров китайцев Yang и соавт. [83] выявили 2 женщин с фенотипом Ko. Последующие молекулярно-генетические исследования показали, что у них имелись точковые мутации с образованием стопкодонов. В одном случае были затронуты экзоны 3 и 4  −185insT (Ser 62 Phe) и стоп-кодон в экзоне 4. В другом случае выявлена мутация G 715T(Glu 239 Stop) в экзоне 7. Указанные мутации обнаружены впервые. Частота фенотипа Ko среди китайцев составила 0,00228 %.

В системе Kell найден аллель, кодирующий синтез антигенов K и Kp a одновременно (Kormoczi и соавт. [34]). При рутинном Kell-фенотипировании

1001

обнаружены два не связанных родством лица с фенотипом K +k + Kp(a +b + ). Они имели генотип KKp a / kKp b. С помощью проточной цитофлюориметрии установлено, что присутствие Kpa в положении цис оказывает выраженное ингибирующее действие на экспрессию антигена K, которая снизилась на 80 % по сравнению с таковой в контрольных образцах K +k + Kp(a −b + ). При секвенировании ДНК обследованных лиц выявлены специфические кодирующие нуклеотиды Т 578 для K и Т 841 для Kp a соответственно. Антиген K не выявлялся пятью из использованных образцов моноклональных анти-K-антител.

Arnaud и соавт. [4] сообщили о 2 лицах, имевших фенотип McLeod. У одного из них, имевшего клинические проявления одноименного синдрома, выявлена мутация (IVS1-1G>A). Протеин Kx на эритроцитах полностью отсутствовал.

Вдругом сообщении (Walker и соавт. [74]) также приведено 2 случая фенотипа McLeod. В одном выявлена миссенс-мутация R 222, в другом – мутация IVS2 + 5G>A. У второго индивида отмечена очень слабая экспрессия антигенов Kx и k, обнаруживаемых лишь методом адсорбции – элюции. Клинические проявления синдрома Маклеод у обоих наблюдаемых отсутствовали. Авторы пришли к выводу, что мутации гена Xk могут иметь двоякое проявление: ослабление экспрессии антигенов Kk с клиническими симптомами заболевания или без таковых.

Всистеме Kell найдено 7 новых антигенов: VONG (Grey и соавт. [26]), KALT и KTIM (Lee и соавт. [39]), KYO (Yabe и соавт. [81]), KUCI, KANT и KASH (Velliquette и соавт. [73]). Они получили номера ISBT KEL28, KEL29, KEL 30, KEL31, KEL32, KEL33 и KEL34 соответственно. Антитела к антиге-

ну VONG вызвали ГБН. Три часто встречающихся антигена – KUCI, KANT

иKASH – обнаружены у женщин, имевших фенотип Kmod. Они были гомозиготны по мутации A 758 G, кодирующей аминокислотную замену Tyr 235 Cys (Daniels и соавт. [19]).

Система Duffy

Hughes и соавт. [30] проследили исход беременности у 15 женщин, имевших анти-Fy a-антитела, и показали, что антитела этой специфичности способны вызвать клинически значимый гемолиз эритроцитов плода. И хотя ни у одно из новорожденных не наблюдали отечной формы ГБН и не было ни одного летального исхода, авторами публикации даны рекомендации вести наблюдение беременных с анти-Fy a-антителами так же, как в случаях

1002

сопровождался необратимыми изменениями во внутренних органах больных, особенно в почках.

Picard и соавт. [58] провели генотипирование локуса HLA-DRB1 у 69 лиц, сенсибилизированных к антигену Fy a. Оказалось, что среди этого контингента достоверно чаще встречались аллели DRB1*04 и HLA-DRB1*15. Отмечена выраженная корреляция с аллелями DRB1*0401 и DRB1*0403. Среди сенсибилизированных к антигену Fy a обладатели этих генов составили 51 и 19 %, в то время как в контрольной группе 24 и 9 % соответственно. Авторы высказали предположение, что для лиц, имеющих указанные аллели, протеин Fy a является более сильным иммуногеном, чем для лиц, лишенных их. Аналогичные данные получены другой группой французских исследователей (Noizat-Pirenne и соавт. [51]). Они также установили связь между предрасположенностью к аллоиммунизации антигеном Fy a и присутствием алле-

ля HLA-DRB1.

Система Kidd

Причиной возникновения нулевого фенотипа Кидд (Jk: −1, −2, −3) являются нарушения структуры аллелей гена JK. В дополнение к ранее известным семи вариантам аллеля JK null Wester и соавт. [76] открыли четыре новых. Два из них обусловлены нонсенс-мутациями 203>T (Gln 68 Stop) и 723delA (Ile 262 Stop) в аллелях JK*1 и JK*2 соответственно. Другая мутация, 958>T (Thr 3121et), обнаружена в гене JK*1 у афроамериканцев. Такая же мутация присутствовала в аллеле JK*2 у выходцев из Индии. Показано, что при указанных мутациях Кидд-гликопротеин на эритроцитах полностью отсутствует.

Liu и соавт. [42] при обследовании тайваньцев Jknull нашли две мутации гена JK: 223>A в экзоне 5 и 896G>A в экзоне 9. Это, по мнению авторов, отличает Jknull китайского происхождения от Jknull полинезийского происхождения.

Система Diego

Описано два случая острых гемолитических посттрансфузионных реакций, обусловленных анти-Wr a-антителами (Boctor и соавт. [8], Cherian и соавт. [12]). Авторы отмечают, что вероятность переливания эритроцитов Wr(a + ) сенсибилизированным реципиентам составляет 1 на 10 000 гемотрансфузий. В процессе скрининга анти-Wr a-антитела остаются невыявленными, поскольку коммерческие панели эритроцитов, как правило, не содержат образ-

цов Wr(a + ).

Японскими исследователями Mochizuki и соавт. [49] описан случай ГБН, обусловленный антителами анти-Di b. Фототерапия в сочетании с внутривенным введением донорского иммуноглобулина дала положительный лечебный

1003

результат. Авторы сообщают, что в литературе имеется описание 27 случаев ГБН, вызванной антителами системы Diegо. Тяжелые формы заболевания, при которых требовалось обменное переливание крови, наблюдались в случаях, когда антитела матери имели высокую активность и реагировали в разведениях 1 : 64 и выше.

Система Scianna

Идентификация антител к часто встречающимся антигенам Scianna является сложной задачей из-за чрезвычайной редкости эритроцитов, не содержащих этих антигенов.

Seltsam и соавт. [67] получили рекомбинантный растворимый протеин, несущий все часто встречающиеся антигены Scianna (Sc:1, −2,3, −4,5,6,7). Исследования показали, что указанный протеин адсорбирует из сывороток антитела к часто встречающимся антигенам Scianna, но не адсорбирует антитела к редко встречающимся антигенам, в частности к антигену Sc2. Авторы отмечают, что ими сделан первый шаг в области идентификации антител системы Scianna, и полагают, что использование рекомбинантных протеинов со специфичностью антигенов различных групповых систем является принципиально новым перспективным методическим подходом в иммуносерологии.

Система Dombrock

Westhoff и соавт. [77] обследовали больного, у которого на эритроцитах отсутствовали все антигены Dombrock, а в сыворотке крови определялись аллоиммунные антитела к одному из часто встречающихся антигенов этой системы – Gy a. Протеин Dombrock на эритроцитах больного полностью отсутствовал. Молекулярно-генетические исследования выявили точковую мутацию T 185 C, ведущую к аминокислотной замене Phe 62 Ser.

Fernandes и соавт. [23] исследовали генный локус DO у представителей народности теке, проживающей в Конго (Африка). В указанной этнической группе аллели DO*A, DO*B, HY и JO выявлены с частотой 18, 68, 7 и 3 % соответственно. Идентифицированы 2 новых аллеля. Первый имел одиночную аминокислотную замену Gln 149 Lys, произошедшую в результате точковой мутации 447>A. Этот вариант получил обозначение DO-DOB-SH. Второй аллель также имел одиночную мутацию (T 524 A), проявлявшую себя аминокислотной заменой Ile 1746 sn. Обе мутации локализовались в локусе DO*B и формировали антиген Do b, который не выявлялся некоторыми моноклональными антителами, а реакции с другими образцами были слабовыраженными. Авторы рекомендовали учитывать уровень экспрессии антигенов Dombrock при проведении гемотрансфузий.

1004

Популяционные исследования генного локуса Dombrock провели Baleotti и соавт. [6] в Бразилии, где впервые выявили аллель DO*B (793 G и 323 G), ассоциированный с 898 G (DO*B-WL), а также аллель DO*A-SH. Авторами обнаружены также ранее описанные аллели DO*B-SH и DO*A-HA. Исследователи считают, что генотипирование аллелей Dombrock является единственной реальной альтернативой серологическим методам исследования в связи с редкостью и недостаточно высокой активностью сывороток, выявляющих антигены системы Dombrock.

Описана острая гемолитическая реакция, обусловленная антителами анти-Do a. Последняя развилась после переливания эритроцитов, подобранных с учетом других групповых систем, но не Dombrock. Авторы столкнулись с затруднениями при идентификации антител и поиске совместимых доноров для последующих гемотрансфузий, поскольку в коммерческих панелях эритроцитов отсутствовали соответствующие стандартные образцы. Равным образом большинству исследователей практически недоступны сыворотки для определения антигенов системы Dombrock. По мнению авторов публикации, реальной альтернативой серологическим методам является генотипирование, позволяющее дифференцировать фенотипы Do a и Do b

(Baumgarten и соавт. [7]).

В систему Dombrock включен еще один часто встречающийся антиген – DO6 (DOYA), изученный Warke и соавт. [75]. Антитела к нему образовались у лица Do(a −b −) со сниженной экспрессией DO3, DO4 и DO5. Пробанд имел мутацию T 4547 G (Tur 253 Cys).

Система Colton

Michalewska и соавт. [48] привели случай тяжелой ГБН, обусловленной антителами анти-Co a. Указанные антитела присутствовали у беременной женщины, имевшей фенотип Co(a −). Эритроциты ее мужа были Co(a + ). Антитела имели высокую активность и реагировали в разведении 1 : 128 в непрямой антиглобулиновой пробе. В связи с высокой частотой антигена Co a поиск совместимых доноров оказался затруднительным. Плоду было произведено внутриутробное переливание отмытых эритроцитов матери. В связи с высоким риском гибели 34-недельного плода было произведено досрочное родоразрешение кесаревым сечением. У новорожденного отмечены анемия и гипербилирубинемия. Для лечения потребовалось 4 обменных гемотрансфузии, после чего состояние новорожденного нормализовалось. Авторы отмечают, что ими описан второй случай тяжелой формы ГБН, вызванной антителами анти-Co a.

1005