Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

Таблица 22.2

Распределение антигенов Knops у европеоидов и негроидов

McCa и McCb

Антиген McC a (McCoy) обнаружили в 1978 г. Molthan и Moulds [38]. Он ока-

зался ассоциированным с Kn a. Оба антигена встречались вместе с частотой более 90 %. В то же время более половины лиц McC(a −) были Kn(a −).

Среди европеоидов McC a-отрицательные лица встречаются редко – 1‒2 %,

среди негроидов более часто – 3‒10 % (Molthan, Moulds и соавт. [35, 38, 42]).

Антитела, выявляющие антиген McC b, антитетичный McC а, найдены Molthan [36] в 1983 г. Сыворотка анти-McC b реагировала с эритроцитами негров Kn(а + ) McC(а −), с эритроцитами европейцев Kn(а + )McC(а −) она не реагировала.

Подобно тому как антигены Kn a и Kn b проявляли антитетичные отношения у европеоидов, антигены McC a и McC b проявляют антитетичные отношения у негроидов (Moulds и соавт. [50], Molthan [36]). Среди доноров негров 45,3 % имели фенотип McC(b + ) (табл. 22.2). Среди европеоидов лица McC(b + ) не обнаружены. Посемейные исследования показали кодоминантное наследование антигенов

McC a и McC b (Molthan, Moulds [38], Moulds и соавт. [42]). Частота генов McC a и

McC b среди жителей Западной Африки составила 0,72 и 0,28 соответственно. Антигенные различия McC a / McC b обусловлены мутацией A 4795 G в экзо-

не 29 гена CR1, последняя вызывает замещение Lys 1590 Glu в участке ССР-25 LHR-D полипептида CR1 (рис. 22.1) (Moulds и соавт. [50]).

Рекомбинантный растворимый полипептид CR1, имеющий лизин в позиции 1590, ингибировал анти-McC a-антитела. Анти-McC b-антитела он не ингибировал.

826

Рис. 22.1. Строение рецептора CR1 комплемента (аллотип CR*1). Он состоит из 30 ССР-единиц (обозначены овалом), организованных в четыре повтора (LHR-A, -B, -C и -D. Один из них (N) содержит N-связанные олигосахариды. Стрелкой показана позиция, определяющая антигенные различия McC a/McC b и Sl a/Vil (по Daniels [7]).

Sla и Vil

Антиген Sl a (Swain-Langley) описали Lacey и соавт. [28]. Molthan [34] обо-

значила этот антиген, обнаруженный ею позднее независимо от упомянутых авторов, как McC c.

Антиген Sl a встречается среди европеоидов значительно чаще (98 %), чем среди негроидов (53,5 %).

Все негры McC(a −) и 45 % негров Kn(a + )McC(a + ) были Sl(a −). Среди не-

гров Западной Африки фенотип Sl(a −) встречался с частотой 70 %, среди европейцев лица Sl(a −) составляют всего 1 % (Moulds и соавт. [42]).

Позднее были найдены анти-Vil-антитела, открывавшие антиген Vil, антитетичный Sl a. Антитела анти-Vil присутствовали у реципиента европейца, которому многократно переливали эритроциты, в том числе, очевидно, от доноров негров. Сыворотка пациента реагировала со всеми 12 образцами эритроцитов Sl(a −) и эритроцитами 80 % доноров негров.

У европеоидов антиген Vil отсутствует (Lacey и соавт. [28]).

Антигенные различия Sl a / Vil обусловлены мутаций A 4828 G в экзоне 29 гена CR1. Она приводит к замене Arg 1601 Gly в участке ССР-25 LHR-D полипептида CR1.

Растворимый рекомбинантный полипептид CR1, имеющий аргинин в позиции 1607, специфически ингибировал активность анти-Sl a-антител. По отношению к анти-Vil-антителам он был инертен. В то же время рекомбинантный полипептид CR1, имеющий глютамин в позиции 1590, ингибировал анти-Vil- антитела. Анти-Sl a-антитела при этом не ингибировались.

Moulds и соавт. [50] объясняют этот эффект заменой положительно заряженного лизина на отрицательно заряженную глютаминовую кислоту в позиции 1590. Это приводит к изменению пространственной ориентации близко расположенного эпитопа Sl a (позиция 1601) и делает его недоступным для антител. Рекомбинантный растворимый полипептид CR1, имеющий глицин в позиции 1601 ингибировал активность анти-Vil-антител, не влияя на активность антител анти-Sl a.

827

Sl3

В последние два десятилетия найдено много образцов анти-Kn-подобных антител, в том числе указывающих на гетерогенность антигенов Sl a и Vil.

Обнаруженный с помощью одной из сывороток антиген Sl3 включен в систему Knops под обозначением KN8. Антитела анти-Sl3 выявлены у европейки, которая пока остается единственным известным индивидом, имеющим фенотип Sl(a + )Vil−Sl3 −. Других носителей анти-Sl3-антител не обнаружено.

Moulds и соавт. [49] пришли к заключению, что серологические различия антигенов Sl a,Vil и Sl3 обусловлены следующими молекулярными замещениями:

позицияArg 1601 → антиген Sl 1 (Sla) позиция Gly 1601 → антиген Sl 2 (Vil) позицииArg 1601 и Ser 1610 → антиген Sl 3 позиция Ser 1610 → антиген Sl 4

позиция Tre 1610 → антиген Sl 5

Последние две позиции, как полагают указанные авторы, соответствуют гипотетическим антигенам, существование которых представляется вполне реальным.

Yka

Антитела анти-Yk a (York) сначала были приняты за анти-Cs a, поскольку реагировали с эритроцитами Cs(a + ), но не реагировали с двумя образцами эритроцитов Cs(a −). Однако миссис York, у которой впервые были выявлены антитела, была Cs(a + ) и, соответственно, не могла вырабатывать анти- Cs a-антитела. В связи с этим фактор Yk a (York) был квалифицирован как новый антиген, фенотипически ассоциированный с антигеном Cs a коллекции

Cost (Molthan, Giles [37]).

Посемейные исследования показали кодоминантное наследование антигена Yk a. Его частота составила 92 % среди европеоидов, 98 % среди негроидов

(Molthan, Giles [37], Molthan [35]).

Частота фенотипа Cs(a −)Yk(a −) среди европеоидов – 1,9 % (Molthan, Giles [37],). Если бы между антигенами Cs a и Yk a не существовало неравновесного сцепления, то указанный фенотип должен был встречаться с частотой 0,32 %, т. е. почти в 6 раз реже. Среди негроидов лица Cs(a −)Yk(a −) встречались с частотой 0,6 % – в 25 раз чаще по сравнению с расчетной величиной (0,024 %), что также свидетельствовало о сцеплении антигеновYk a и Cs a.

Molthan и Moulds [38], сообщив об открытии антигена McC a, указали, что 37 % белых американцев имеют фенотип McC(a −)Yk(a −), а 29 % – фенотип

McC(a −)Yk(a −)Cs(a −). Среди негров фенотип McC(a −)Yk(a −) составлял 2,2 %,

фенотип McC(a −)Yk(a −)Cs(a −) ‒ 17 %. Эти показатели существенно отличались от расчетных, соответствующих положению, что гены McC a, Yk a и Cs a независимы друг от друга. Фактическое число доноров с фенотипом McC(a −) в сочетании сYk(a −), Kn(a −) и Cs(a −) оказалось в 100 раз больше ожидаемого.

828

KCAM

Описано несколько образцов специфических анти-KCAM-антител, которые первоначально были ошибочно идентифицированы как анти-McC a (KN3). Более поздние исследования показали, что указанные антитела открывают антиген, отличающийся от McC a. Последнему было присвоено название KCAM, и в 2006 г. он был включен в систему Knops под обозначением KN9 (Daniels и соавт. [8]).

Антиген KCAM встречается с частотой около 98 % среди европеоидов и только у 20 % негроидов.

Молекулярно-генетическими исследованиями показано, что основой возникновения фенотипов McC a +и McC a − является замена валина на изолейцин в положении 1615. Аминокислотная замена является результатом мутации в экзоне

29 гена CR1 (Moulds и соавт. [46]).

Структура рецептора CR1

Рецептор CR1 (CD35) представляет собой гликопротеин с мол. массой около 200 кДа. Он присутствует на эритроцитах, гранулоцитах, моноцитах, В-лимфоцитах и клетках лимфатических узлов (Ahearn, Fearon [1], Hourcade и соавт. [20], Cohen и соавт. [4]). В плазме крови содержится растворимая форма

CR1 Swanson [61].

Установлена молекулярная структура гликопротеина CR1 (см. рис. 22.1;

рис. 22.2) (Klickstein и соавт. [24, 25], Hourcade и соавт. [21]).

Рецептор CR1 представлен 4 аллотипами. Чаще всего встречается вариант CR*1, состоящий из 2039 аминокислот. Экстрацеллюлярная часть его включает 1930 аминокислот, N-терминальная – 41 аминокислоту, трансмембранный и внутриклеточный домены – соответственно 25 и 43 аминокислоты.

Экстрацеллюлярный домен гликопротеина CR1 содержит несколько высокогомологичных повторов ССР (complement control protein). Аллотип CR*1 имеет 30 ССР-повторов. Каждый повтор включает около 60 аминокислот и содержит четыре цистеиновых остатка. Кроме того, высокогомологичными являются 28 N-терминальных групп в четырех участках, получивших название «длинные го-

мологичные повторы» (LHR – long homologous repeats) Каждый LHR-повтор со-

стоит из семи ССР (см. рис. 22.1).

Помимо частого встречающегося аллотипа CR*1 (прежнее обозначение CR1-А), имеющего мол. массу 190 кДа, встречается аллотип CR*2 (CR1-В) с мол. массой 220 кДа, и редкие аллотипы: CR*3 (CR1-С) – 160 кДа и CR*4 (CR1-D) – 250 кДа (Ahearn, Fearon [1], Moulds и соавт. [40]).

Аллотипы отличаются друг от друга числом LHR-повторов в экстрацеллюлярном домене. Причину различий объясняют неравновесным кроссинговером

(Vik, Wong [64]).

Количество рецепторов CR1 на одной клетке варьирует от 20 до 800 (Moulds

и соавт. [44]).

829

Молекула CR1 имеет 25 потенциальных участков N-гликозилирования, однако в действительности, как показал анализ гликопротеина CR1, обработанного эндогликозилазой F, одна молекула этого протеина содержит 6–8 N-гликанов (Ahearn, Fearon [1]). О-гликозилированию гликопротеин CR1 не подвержен

(Lublin и соавт. [31]).

Ген CR1 у лиц, вырабатывающих гликопротеин CR1*1, имеет величину 133‒160 кб и состоит из 39 экзонов. Ген CR1 у лиц, вырабатывающих гликопротеин CR1*2, состоит из 47 экзонов. Каждый LHR-повтор кодируют восемь экзонов. ССР-повторы в позициях 1, 3, 4, 5 и 7 кодируются одним экзоном, ССРповторы в позициях 2 и 6 – двумя экзонами (Vik, Wong [64], Wong и соавт. [66]).

Рис. 22.2. Аминокислотная последовательность рецептора CR1*1 комплемента.

830