Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

Антиген Xg a обнаружен у представителей всех исследованных популяций. Наибольшая частота гена Xg a констатирована у аборигенов Новой Гвинеи и Австралии, жителей о. Сардинии и бразильцев (табл. 14.3).

701

Свойства

Антиген Xg a не вполне развит к моменту рождения. Его экспрессия на эритроцитах новорожденных ниже, чем на эритроцитах взрослых (Mayr [65], Toivanen, Hirvonen [94]). Вещество Xg a формируется в относительно поздние сроки внутриутробного развития. Из 54 плодов от 6 до 20 недель развития только 19 были Xg(a + ), что существенно ниже частоты встречаемости этого антигена в популяции (Toivanen, Hirvonen [93]). Антиген Xg(a + ) появляется у плодов начиная с 12 недель развития. У 5–10 % мальчиков Xg(a + ) при рождении указанный антиген не удается выявить серологическими методами (Szabo и соавт. [90]). По мере взросления организма выраженность его на эритроцитах возрас-

тает (Campana и соавт. [15]).

Впроцессе эритропоэза in vitro антиген Xg a появлялся на клетках после гликофорина А и протеина полосы 3, но раньше Rh-протеина (Daniels, Green [20]).

Антиген Xg a не является сильным иммуногеном. На эритроцитах гетерозиготных мужчин и гомозиготных женщин он выражен одинаково. У женщин, гетерозиготных по гену Xg a, экспрессия антигена может быть снижена. До 10 % гетерозиготных женщин имеют слабовыраженный антиген Xg a (Race, Sanger [73]). Слабые варианты Xg a среди мужчин редки.

Количество антигенных участков Xg a на эритроците, по данным разных ав-

торов, варьирует от 159 (Foucher и соавт. [36]) до 9000 (Szabo и соавт. [90]).

В1974 г. Fellous и соавт. [34] обнаружили антиген Xg a на фибробластах

игибридомных клетках человек – мышь. Антиген выявлялся одновременно с другими продуктами Х-ассоциированных локусов. Тем самым было еще раз подтверждено, что антиген Xg a контролируется геном, расположенным на Х-хромосоме. При инактивации Х-хромосомы антиген Xg a на клетках человека не выявлялся (Hsu и соавт. [54]).

Антиген Xg a разрушается бромелином, фицином, папаином, проназой, трипсином и химотрипсином (Habibi и соавт. [49], Herron, Smith [53]), однако устойчив к воздействию сиалидазой.

Молекулярная основа

Herron и Smith [53] посредством иммунопреципитации субстрата антителами анти-Xg a установили, что антигенные эпитопы Xg a эритроцитарной мембраны относятся к сиалогликопротеинам. Установлена мол. масса вещества (22,5 –28 кДа). Обработка эритроцитов сиалидазой приводила к уменьшению мол. массы. Гликопротеин, определяющий специфичность Xg, тесно связан с белком CD99 (Petty, Tippett [71], Fouchet и соавт. [37]).

КодируемыйгеномXG протеинсостоитиз180аминокислот.Экстрацеллюлярный N-терминальный домен включает 142 аминокислоты, содержит 16 участков О-гликозилирования,нонеимеетучастковN-гликозилирования.ОстальнаячастьXg- протеина представлена трансмембранным и цитоплазматическим С-терминальным доменами(рис.14.1)(Ellisисоавт.[32]).

702

Рис. 14.1. Строение гликопротеинов Xg a и CD99.

Последовательность аминокислот Xg- и CD99-гликопротеинов расшифрова-

на (рис. 14.2 и 14.3).

Рис. 14.2. Аминокислотная последовательность Xg-гликопротеина.

Рис. 14.3. Аминокислотная последовательность CD99-гликопротеина.

Транскрипты гена XG, помимо эритроидных клеток и фибробластов, выявлены в скелетных мышцах, сердце, плаценте, клетках предстательной и щитовидной желез, позвоночнике и трахее (Fouchet и соавт. [37]). Некоторое количество транскриптов XG обнаружено в легких, почках, яичке, а также в тканях плода и

703

некоторых перевиваемых лимфоидных клеточных линиях (Fouchet и соавт. [37], Ellis и соавт. [31]).

Связь с антигеном CD99

В 1979 г. Levy и соавт. [60] путем иммунизации мышей лейкемическими Т-клетками человека получили моноклональные антитела анти-CD99, которые, как показали Goodfellow и Tippett [48], реагировали с антигеном Xg.

Антиген CD99, открываемый этими антителам, присутствовал практически во всех тканях человека (Goodfellow [41]), однако в отличие от других клеток эритроциты экспрессировали его в разных количествах. С помощью радиоиммунного антиглобулинового метода и проточной цитофлюориметрии выделены два типа людей: с высокой (high) и низкой (low) экспрессией антигена CD99 на эритроцитах (Goodfellow, Tippett [48], Foucher и соавт. [36]).

Установлено, что высокая экспрессия CD99 характерна для эритроцитов

Xg(a + ). У женщин Xg(a −) экспрессия CD99 низкая. У 68 % мужчин Xg(a −) вы-

явлена высокая экспрессия CD99, в 32 % – низкая.

На основании полученных данных Goodfellow и соавт. [45, 48], Tippett и соавт. [92] высказали предположение о существовании на Y-хромосоме локуса YG, который контролирует уровень экспрессии антигена CD99. По мнению авторов, ген YG представлен двумя аллелями: Yg a и Yg. Лица с высокой экспрессией CD99 имеют ген Xg a и Yg a, в то время как у людей со слабовыраженным антигеном CD99 присутствуют аллели Xg a и Yg. Далее указанные авторы усовершенствовали предложенную модель, предположив существование гена XGR, регулирующего одновременно экспрессию антигенов CD99 и Xg а и присутствующего как наY-, так и на Х-хромосоме.

Uchikawa и соавт. [95] нашли у 2 японских доноров антитела анти-CD99, подобные описанным выше, но несколько отличающиеся от них. Эти антитела реагировали с антигеном Xg а, получившим обозначение XG2.

Вещество CD99, так же как Xg a, относится к сиалогликопротеинам. Равным образом CD99 разрушается папаином, проназой, трипсином и химотрип-

сином (Goodfellow [41], Latron и соавт. [59], Daniels, Tippett [21]). Антиген

CD99 в основном устойчив к действию сиалидазы, однако некоторые образцы анти-CD99-подобных антител не реагировали с эритроцитами, обрабо-

танными сиалидазой (Goodfellow [41], Latron и соавт. [59], Daniels, Tippett [21]). Иммуноблоттинг с эритроцитами, лимфоцитами, различными клеточными линиями человека, гибридными клетками человек – мышь показал, что антиген CD99 ассоциирован с гликопротеином, имеющим мол. массу 32 кДа

(Petty, Tippett [71], Fouchet и соавт. [37], Latron и соавт. [59], Daniels, Tippett [21], Banting и соавт. [6], Anstee и соавт. [3]). Обработка эритроцитов сиалидазой приводила к снижению мол. массы CD99 (Petty, Tippett [71], Fouchet и соавт. [37], Latron и соавт. [59], Anstee и соавт. [3]). Иммуноблоттинг преципитатов, полученных с помощью антител анти-Xg a и анти-CD99, показал, что эти

704

антигены расположены на разных структурах (Fouchet и соавт. [37]). Частично очищенный гликопротеин CD99 ингибировал активность антител анти-CD99 и

анти-Xg a (Banting и соавт. [6]).

Petty и Tippett [71] установили, что аллогенные анти-Xg a-антитела преципитировали гликопротеины Xg a и CD99. Авторы пришли к заключению, что эти высокогомологичные структуры связаны между собой и представлены в эритроцитарной мембране в виде гетеродимера. При использовании моноклональных анти-Xg a-антител эти результаты воспроизвести не удалось (Fouchet

и соавт. [37]).

Клонирование гена MIC2 показало, что антиген CD99 локализован на протеине, состоящем из 186 аминокислот. Протеин включает N-терминальный сигнальный пептид из 20 или 21 аминокислоты (расщепляется после встраивания в мембрану эритроцита). Экстрацеллюлярная часть пептида включает 100 аминокислот, имеет гидрофобный трансмембранный домен и цитоплазматический фрагмент из 36 аминокислот (Goodfellow и соавт. [47], Banting и соавт. [5]). Различий между молекулами CD99, кодируемыми Х- и Y-хромосомами, не вы-

явлено (Banting и соавт. [6]).

Подсчитано, что один лимфоцит несет 27 тыс. эпитопов CD99. Для тромбоцитов этот показатель составил 4 тыс. На эритроцитах число антигенных участков, связывающих анти-CD99-антитела, существенно меньше: 1 тыс. для вариантов с высокой экспрессией CD99 и только 100 для вариантов с низкой экс-

прессией (Foucher и соавт. [36]).

Антитела анти-Xga

Антитела анти-Xg a выявлены Mann и соавт. [64] в сыворотке крови мужчины, которому многократно переливали кровь. Позднее найдены другие образцы антител указанной специфичности (Azar и соавт. [4], Cook и соавт. [17], Devenish и соавт. [27], Herron, Smith [53], Mak и соавт. [63], Metaxas, MetaxasBuhler [66], Nakajima и соавт. [67], Race, Sanger [73], Sausais и соавт. [82], Yokoyama и соавт. [99]).

Анти-Xg a-антитела встречаются редко: при исследовании 325 сывороток в Гонконге антитела анти-Xg a были идентифицированы в 4 случаях, один образец указанныхантителприходилсяна60 108обследованныхдоноров(Azarисоавт.[4]).

Относительно низкая частота встречаемости антигена Xg a среди мужчин дала основание полагать, что они в большей мере, чем женщины, подвержены аллоиммунизации антигеном Xg a. Действительно, из 14 сывороток антиXg a, найденных первыми, 12 образцов были получены от мужчин (Race, Sanger [73]), из 13 образцов анти-Xg a, выявленных у японцев, 11 принадлежали здоровым лицам – донорам мужчинам (Azar и соавт. [4]).

Анти-Xg a-антитела чаще встречаются у монголоидов, что, по-видимому, обусловлено еще более низкой распространенностью антигена Xg a среди представителей этой расы. Остается, однако, без объяснения тот факт, что антитела

705