Материал: Донсков С.И., Мороков В.А. Группы крови человека. Руководство по иммуносерологии

Три экзона кодируют сигнальный пептид и N-терминальный участок, состоящий из 535 аминокислот (рис. 13.3). За счет альтернативного сплайсинга следующего экзона возникают структурные изменения в С-терминальном домене, позволяющие ГФИ присоединяться к эритроидным клеткам (Li и соавт. [29]).

Рис. 13.3. Аминокислотная последовательность протеина АХЭ.

Частота распределения

Из 1568 доноров, обследованных Eaton и соавт. [12], Giles и соавт. [17] в Оксфорде, только 5 имели фенотип Yt(a −), остальные – Yt(a + ). Таким образом, частота антигена Yt a составила 99,8 %, гена Yt a – 0,9559 (табл. 13.2). Установлено, что 8 % лиц белой расы имели фенотип Yt(b + ). По результатам изучения частоты антигенов Yt a и Yt b рассчитана частота генотипов: Yt a / Yt a (0,8966), Yt a / Yt b (0,1006) и Yt b / Yt b (0,0028). Расчеты показали, что существование третьего аллеля в системе Cartwright вряд ли возможно (Lewis и соавт. [28]).

Примечание: « – » – нет данных.

691

Обследование лиц различной национальности показало, что среди евреев, арабов и друзов Израиля антиген Yt b встречается относительно часто (табл. 13.2). В то же время этот фактор не был выявлен у японцев, жителей Таиланда, а также у инков и других коренных жителей Южной Америки

(Nakajima и соавт. [34], Mourant и соавт. [33]).

Giles и соавт. [17] установили среди 1399 обследованных 113 (8,1 %) лиц Yt(b + ). Salmonисоавт.[42]выявили608человекYt(b + )среди7510французов(8,1 %).Lewis и соавт. [28] обследовали 659 канадцев, из них 589 были Yt(a +b −), 70 Yt(a +b + ), не былониодногоYt(a −b + ).WurzelиHaesler[50]протестировалиэритроциты714американских негров и обнаружили, что 60 из них (8,4 %) былиYt(b + ). Эти данные показывают,чточастотаYt a иYt b одинаковаунегроидовиевропеоидов.

Обращаютнасебявниманиедвепопуляции,вкоторыхчастотаантигеновYt a и Yt b отличается от таковой в других сравниваемых группах. Так, Nakajima и соавт. [34] протестировали 5 тыс. японских доноров, из них 70 были протестированы анти-Yt b-сывороткой. Все японцы былиYt(a + ), ни одного индивидаYt(b + ) не обнаружено. Возможно, для японцев характерен исключительно фенотипYt(a +b −).

Отмечена более высокая, чем ожидалась, частота анти-Yt a-антител у израильтян. Когда появились тестовые анти-Yt b-реактивы, было установлено, что частота этого антигена у жителей Израиля существенно выше, чем в других географических зонах. Повышенная частота антигена Yt b в этом регионе привела к некоторому увеличению частоты фенотипа Yt(a −b + ), что могло повлиять на частоту аллоиммунизации лиц Yt(a −b + ). Из 1683 целенаправленно протестированных израильских евреев, арабов и друзов 26 имели фенотип Yt(a −b + ). Иными словами, среди этих народов лиц Yt(a −b + ) обнаруживают с частотой 1 на 65. Частота встречаемости этого фенотипа среди англичан, французов и негров составляет примерно 1 на 500, то есть почти в 10 раз меньше.

Результатыдвухпосемейныхисследованийсвидетельствовалиокодоминантном наследовании генов Yt a и Yt b в соответствии с законом Менделя. Данных о существованиимолчащегоаллелянеполучено(Gilesисоавт.[17],Lewisисоавт.[28]).

С антигенными различиями Yt a / Yt b ассоциированы две нуклеотидные замены внутри гена АСНЕ. Одна из них, С 1057 А в экзоне 2, кодирует замену гистидина на аспарагин в положении 353. Другая мутация, С 1432 Т в экзоне 3, фенотипически не проявляется. Третья замена нуклеотидов, в экзоне 5, также не проявляла себя в зрелом протеине (Bartels и соавт. [3]).

Исследование АХЭ электрического ската Torpedo californica, наиболее изученной формы этого фермента, показало, что лишь аминокислотная замена в позиции 353 приводит к формированию иммуногенного участка, способного стимулировать синтез специфических антител. Различия в антигенной структуре АХЭ не влияют на ее активность (Masson и соавт. [30]).

Антиген Yt a устойчив к действию трипсина, α-химотрипсин его разрушает. Обработка эритроцитов фицином и папаином дала разноречивые результаты, которые зависели от того, какими образцами анти-Yt a-антител проводили

692

тестирование энзимированных эритроцитов (Eaton и соавт. [12], Vengelen-Tyler, Morel [48], Morton [32], Rouger и соавт. [41], Daniels [7]). В некоторых случаях об-

работка указанными протеолитическими ферментами усиливала реакцию. К действию сиалидазы антигенYt a не чувствителен (Rouger и соавт. [41], Daniels [7]).

Антигены Yt a и Yt b разрушаются под воздействием дитиотрейтола, 2-ами- ноэтилизотиоурониумбромида (АЕТ), 2-меркаптоэтанола (Branch и соавт. [6], Levene, Harel [26], Shulman и соавт. [43]). Денатурация зависела от концентрации дитиотрейтола при обработке эритроцитов. Когда применяли 200 мМ препарата, как Yt a, так и Yt b денатурировались. При использовании 50 и 100 мМ растворов дитиотрейтола активность антигена Yt a снижалась пропорционально повышению концентрации раствора ДТТ, но не подавлялась полностью.

Shulman и соавт. [43] показали, что антиген Yt b денатурируется, когда эритроцты обрабатывают 500 мМ раствором 2-меркаптоэтанола.

Уместно упомянуть, что применение АЕТ для создания искусственных эритроцитов Kellnull подверглось критике, поскольку этот препарат разрушает и другие, не относящиеся к системе Kell, антигены. Однако, когда Levene и Harel [26] обработали АЕТ эритроциты Yt(a + ), денатурация антигена Yt a не была такой полной, как денатурация антигенов системы Kell. Девять из 15 сывороток анти-Yt a не реагировали с эритроцитами, обработанными АЕТ, другие 6 все же реагировали, хотя не так сильно, как с необработанными эритроцитами.

АнтигеныYt a иYt b определяются на эритроцитах новорожденных:Yt b выражен слабо, в то время как экспрессия Yt a не отличается от таковой у взрослых. Giles и соавт. [17] установили, что экспрессия антигенаYt b у новорожденных не изменена. Слабую экспрессию антигена Yt a наблюдали у недоношенных (Eaton и соавт. [12], Ferguson и соавт. [14]); 8 из 10 образцов эритроцитов не реагировали с анти-Yt b-сывороткой, остальные 2 реагировали слабо (Gobel и соавт. [18]).

АХЭ присутствует в нервной и мышечной тканях и на эритроцитах (Taylor [46]). Данных о распределении этого фермента в других тканях мало. Антиген Yt a не был выявлен на лимфоцитах, гранулоцитах и моноцитах при исследовании методом проточной цитофлюориметрии (Dunstan [11]).

Антитела анти-Yta и анти-Ytb

Несмотря на небольшое число лицYt(a −), способных к сенсибилизации антигеномYt a, антитела к этому антигену не являются редкостью и многократно опи-

саны в литературе [1, 2, 4, 5, 8–10, 12, 13, 18, 20, 24, 35]. Стандартизация 79 сыво-

роток анти-Yt a показала, что 57 из них были моноспецифическими, 22 содержали сопутствующие антитела другой специфичности (Eckrich и соавт. [13]).

Антиген Yt b в отличие от антигена Yt a является более слабым иммуногеном. Антитела анти-Yt b встречаются редко и практически всегда обнаруживаются в сочетании с антителами другой специфичности (Giles и соавт. [16, 17], Ferguson

и соавт. [14], Ikin и соавт. [21], Wurzel, Haesler [49], Levy и соавт. [27]). Так, со-

гласно сводке Issitt иAnstee [22], в одной из сывороток анти-Yt b присутствовали

693

антитела анти-Fy b и анти-Bp a (Bishop системы Diego), в другой – анти-С и антиHov (DI9 системы Diego), в третьей – анти-е, в четвертой – анти-K, в пятой – анти-Е и анти-Le a.

Следует отметить, что антитела к антигенамYt a иYt b находили у беременных или реципиентов. Они ни разу не описаны как антитела естественного происхождения. Практически все образцы антител Yt были IgG с оптимумом реагирования при температуре 37  оС в непрямой антиглобулиновой пробе. Большинство образцов относилось к субклассу IgG1, нередко в сочетании с IgG4. Некоторые образцы были представлены только субклассом IgG4. Ни в одном из случаев ан-

титела не относились к субклассу IgG3 (Vengelen-Tyler, Morel [48], Pierse и со-

авт. [37]). Некоторые образцы антител анти-Yt a обладали способностью связывать комплемент (Bergvalds и соавт. [4]), в то время как у других такая способ-

ность отсутствовала (Gobel и соавт. [18], Ballas, Sherwood [2]).

Антитела системы Yt не описаны ни разу в качестве причины ГБН, хотя в ряде случаев были выявлены у женщин Yt(a −), родивших детей Yt(a + ) (Wurzel, Haesler [50], Gobel и соавт. [18], Bergvalds и соавт. [4], Bettigole и соавт. [5], Lavallee и соавт. [24], Davey, Simkins [9]). У одной женщины Yt(b −), имевшей анти-Yt b-антитела, родился ребенок Yt(b + ) без признаков ГБН (Ferguson и соавт. [14]). Антитела системы Yt считаются клинически значимыми в практике трансфузиологии. Антитела анти-Yt a вызвали гемолитическую посттрансфузионную реакцию с летальным исходом у больного серповидно-клеточной анемией (Reed и соавт. [39]). Описаны посттрансфузионные реакции немедленного типа, обусловленные антителами анти-Yt a (Hadley и соавт. [19]). Вместе с тем у многих реципиентов, имевших анти-Yt a-антитела и получавших трансфузии эритроцитов Yt(a + ), признаков несовместимости не наблюдалось (Dobbs

исоавт. [10], Eckrich и соавт. [13]). В одном случае антитела анти-Yt a не вызвали посттрансфузионной реакции, несмотря на то, что в тестах in vitro проявляли гемолитические свойства, свидетельствовавшие об их трансфузионной опасности (AuBuchon и соавт. [1]). Из 18 реципиентов, имевших анти-Yt a-антитела, только у 3 наблюдалось уменьшение продолжительности жизни перелитых эритроцитов (Eckrich и соавт. [13]). По данным других исследователей, длительность персистенции несовместимых эритроцитов в кровотоке реципиентов варьировала в широких пределах (Gobel и соавт. [18], Bettigole и соавт. [5], Dobbs и соавт. [10], Ballas, Sherwood [2], Davey, Simkins [9], Nance и соавт. [35], Kakaiya и соавт. [23]). Лишь в отдельных случаях имелись основания полагать, что перелитые эритроциты будут быстро элиминированы антителами из крово-

тока (Gobel и соавт. [18], Bettigole и соавт. [5], Ballas, Sherwood [2]). В иссле-

дованиях с использованием клеток, фагоцитирующих эритроциты, сенсибилизированные антителами, также получены противоречивые данные (Gobel и со-

авт. [18], AuBuchon и соавт. [1], Eckrich и соавт. [13], Levy и соавт. [27], Pierse

исоавт. [37], Hadley и соавт. [19], Kakaiya и соавт. [23]). В связи с этим пред-

ставляется очевидным, что каждый образец антител требует индивидуального

694

исследования, по результатам которого можно прогнозировать степень несовместимости перелитых эритроцитов и, соответственно, безопасность и лечебную эффективность планируемой трансфузии.

При отсутствии совместимых эритроцитовYt(a −) реципиенту, имеющему анти- Yt a-антитела, переливают эритроциты Yt(a + ). При этом целесообразно отобрать эритроциты,дающиеменеесильнуюреакциюin vitro ссывороткойреципиента.

Описаны анти-Yt a-антитела у реципиента Yt(a + ). Эти антитела реагировали с эритроцитамиYt(a + ) неродственных лиц и матери реципиента, но не реагировали с эритроцитами самого реципиента и его Yt(a + ) отца (Mazzi и соавт. [31]). Указанное наблюдение нельзя рассматривать как доказательство существования парциальных вариантов антигена Yt a, поскольку анти-Yt a-антитела, появившиеся у реципиента на 9-й день после переливания 5 доз эритроцитовYt(a + ), через несколько месяцев исчезли.

Транзиторный фенотипYt(a −b −)

АХЭ играет исключительно важную роль в обеспечении работы мышечного аппарата и мозга, поэтому неудивительно, что нулевой фенотип Yt(a −b −), обусловленный молчащим геном Yt −, и делеции в локусе ACHE чрезвычайно редки. Дефект гена, который может привести к недостатку столь важного для жизни фермента, по-видимому, является летальным.

Rao и соавт. [38] наблюдали больного с транзиторным фенотипом Yt(a −b −). Ему проводили медикаментозную подготовку к операции трансплантации сердца. В серологических реакциях его эритроциты тестировались как Yt(a −b −), но при этом они адсорбировали и высвобождали при элюции два из четырех образцов анти-Yt a-антител. Активность АХЭ на эритроцитах составляла 10 % от нормы. Сыворотка крови содержала антитела, реагировавшие одинаково интенсивно с эритроцитами Yt(a +b −) и Yt(a −b + ). Антитела получили обозначение анти-Yt ab. Они реагировали со всеми эритроцитами за исключением собственных эритроцотов и эритроцитов больных ПНГ (комплементчувствительная фракция). Указанные антитела можно было отнести к трансфузионно опасным, о чем свидетельствовали результаты теста с введением эритроцитов, меченных Cr51. В случае возникновения показаний к гемотрансфузии больному могли быть перелиты только его собственные эритроциты, которые и были для него заготовлены. Через 4 мес. у больного определялся слабо выраженный антиген Yt a, активность АХЭ на эритроцитах возросла до 60 % и, что интересно, эритроциты стали адсорбировать анти-Yt ab- антитела,которыеунегоранееобразовались,однаконедополногоистощения.

Некоторые исследователи обратили внимание на то, что уровень АХЭ на эритроцитах больных диабетом, ниже, чем у здоровых (Testa и соавт., 1988; Suhail, Rabini, 1900). Однако Wittaker и Telen (1994) в значительно более ши-

роком исследовании не обнаружили существенного изменения концентрации АХЭ на эритроцитах больных диабетом, а также снижения экспрессии антигена Yt a на эритроцитах.

695