Взаимодействие ризобиальных бактерий с растениями сои сортов приморской селекции
Е.С. Бутовец, Л.М. Лукьянчук, Е.А. Васина
Аннотация
Представлены результаты исследований симбиотических взаимоотношений клубеньковых бактерий с соей, эффективности искусственной бактеризации ее семян. Доказано, что каждому сорту среди активных форм ризобий необходимо подбирать наиболее совместимый по генотипу штамм, с которым у растений будут складываться комплементарные связи в экологических условиях Приморского края. Установлена корреляционная зависимость между некоторыми хозяйственно ценными признаками и показателями симбиотической деятельности растений сортов сои селекции ФГБНУ «ФНЦ агробиотехнологий Дальнего Востока им. А.К. Чайки».
Ключевые слова: Приморский край, соя, сорт, симбиоз, высоковирулентные штаммы ризобий, азотфиксация, комплементарность, грибные болезни, устойчивость, урожайность.
Abstract
Interaction of rhizobial bacteria with plants of soybean varieties developed in Primorsky Krai.
E.S. BUTOVETS, L.M. LUKYANCHUK, Е.А. VASINA (Federal Scientific Center of Agrobiotechnology in the Far East named after A.K. Chayka, Primorsky Krai, Timiryazevsky village).
The article presents the results of studies of symbiotic relationships between nodule bacterium and soybean, the effectiveness of artificial bacterization of its seeds. It is proved that for each variety, among the active forms of rhizobia it is necessary to select the most compatible genotype strain with which plants will develop complementary relationships in the environmental conditions of Primorsky Krai. A correlative dependence between some economically important traits and indicators of symbiotic activity ofplants of soybean varieties which were developed in “A.K. Chayka Federal Scientific Center of Agrobiotechnology of the Far East” was determined.
Key words: Primorsky Krai, soybean, variety, symbiosis, highly virulent strains of rhizobia, nitrogen fixation, complementarity, fungal diseases, resistance, productivity.
Введение
Азот - лимитирующий элемент всей жизни на Земле. Ежегодно около 2 % всей вырабатываемой человечеством электроэнергии тратится на процесс Габера-Боша для создания азотных удобрений [15]. Известно всего несколько родов клубеньковых бактерий симбионтов растений, фиксирующих атмосферный азот и выделяющих аммиак в окружающую среду. Многие представители бобовых способны к симбиотической азотфиксации. Соя является самым важным источником биологически фиксируемого азота среди всех бобовых культур (77 %), при этом она составляет 68 % от мирового производства бобовых культур [3]. В почве после сои остается большая часть фиксированного ризобиями азота, что помогает получить высокие урожаи последующих культур в севообороте [4, 9, 10]. Способность к симбиотической азотфиксации атмосферного азота делает сою идеальной для возделывания сельскохозяйственной культурой ввиду уменьшения потребности в синтетических азотных удобрениях, стоимость которых возрастает. Снижается их отрицательное действие на окружающую среду: прямое загрязнение азотными соединениями, выброс оксида азота и увеличение содержания в атмосфере углекислого газа.
В современных технологиях выращивания сои широко используются биопрепараты на основе высокоэффективных штаммов специфических ризобий. Применение культурных отселектированных, более вирулентных и конкурентоспособных штаммов клубеньковых бактерий является эффективным приемом для повышения иммунного статуса растений [6, 7, 14].
Селекционерами создаются сорта с высоким генетическим потенциалом урожайности, а поскольку соевые семена богаты белком, получение высоких урожаев потребует соответствующего уровня азотного питания. Поэтому возникает необходимость увеличения потенциала азотфиксации. Перспективным направлением является повышение интенсивности биологической азотфиксации за счет подбора наиболее продуктивных симбионтов и внедрения обработки эффективными штаммами ризобий в качестве элемента сортовой агротехники сои [2].
Цель исследований - получение новых знаний и экспериментальных данных о взаимодействии ризобий с растениями сои сортов приморской селекции для совершенствования сортовой технологии возделывания сои в Приморском крае.
Были поставлены следующие задачи:
изучить влияние штаммов ризобий Bradyrhizobium japonicum (Jordan, 1982) и Sinorhizobium fredii (Scholia, Elkan, 1984) на урожайность перспективных сортов сои различных групп спелости;
определить влияние испытываемых штаммов на иммунный статус сортов;
выявить наиболее комплементарные сорто-штаммовые сочетания для сортов местной селекции в почвенно-климатических условиях Приморья.
Материал и методы
Изучение симбиотических взаимоотношений клубеньковых бактерий с соей и эффективности искусственной бактеризации ее семян проводили на полях лаборатории селекции сои ФГБНУ «ФНЦ агробиотехнологий Дальнего Востока им. А.К. Чайки» в 2016-2018 гг. В период проведения опытов метеорологические условия были контрастными, но в основном соответствовали биологическим потребностям сои [13].
Объектами исследований являлись высоковирулентные штаммы ризобий вида Bradyrhizobium japonicum (ТМ-464, БМ-88,Вр-1) и Sinorhizobium fredii (062, ББ-90, ТБ-589) селекции ФГБНУ ВНИИ сои, предоставленные нам сотрудниками лаборатории биологических исследований указанного института, и районированные сорта сои селекции ФГБНУ «ФНЦ агробиотехнологий Дальнего Востока им. А.К. Чайки» разных групп спелости: среднеранняя - Приморская 13, средняя - Приморская 4, Сфера и Муссон, среднепоздняя - Приморская 86.
Семена сои перед посевом были обработаны бактериальными препаратами с добавлением прилипателя NaKMU, в соответствии со схемой опыта и высеяны в почву при норме высева, рекомендованной для производственных посевов, - 450 тыс. всхожих семян на 1 га. Агротехника - общепринятая для Приморского края [12]. Опыт заложен по методике полевого опыта Б.А. Доспехова [5]. Площадь делянки 9 м2. Повторность опыта четырехкратная, расположение делянок систематическое.
Учет пораженности грибными болезнями проводили на основе методических указаний по изучению устойчивости сои к грибным болезням [8], подсчет и оценку количества клубеньков и их массы - по методике С.А. Бегун [1], оценку продуктивности и учеты по основным хозяйственно ценным признакам - согласно методическим указаниям [11]. Содержание белка и масла в семенах сои определяли с помощью прибора Inframatic 9200 в лаборатории агрохимических анализов ФГБНУ «ФНЦ агробиотехнологий Дальнего Востока им. А.К. Чайки».
Полученные экспериментальные данные обработаны методами дисперсионного и парного корреляционного анализа по методике Б.А. Доспехова с использованием прикладных программ на персональном компьютере [5]. симбиотический клубеньковый бактерия семя
Результаты исследований
В 2016-2017 гг. изучали симбиотические взаимоотношения штаммов ризобий (062, ТМ-464, ББ-90, Вр-1) и растений сои сортов приморской селекции, а также и связанные с ними продукционные процессы. Установлено, что у среднераннеспелого сорта Приморская 13 максимальная прибавка урожая (1,8 ц/га) получена в варианте с обработкой семян штаммом ВР-1, при этом количество клубеньков на одном растении было на уровне контроля (табл. 1).
Таблица 1 Влияние инокуляции сои активными штаммами ризобий на иммунный статус и урожайность сортов различных групп спелости, 2016-2017 гг.
|
Вариант |
Урожай ность*, ц/га |
Количество клубеньков, шт./раст. |
Масса клубеньков, г/раст. |
Масса 1000 семян, г |
Степень поражения септорио- зом, % |
Степень поражения пероноспоро- зом, % |
|
|
Приморская 13 |
|||||||
|
Контроль (без обработки) |
20,9 |
29,4 |
0,44 |
185 |
46,2 |
19,3 |
|
|
Обработка семян штаммом 062 |
19,9 |
43,1 |
0,36 |
180 |
55,0 |
20,7 |
|
|
штаммом ТМ-464 |
20,6 |
25,9 |
0,21 |
190 |
53,7 |
21,1 |
|
|
штаммом ББ-90 |
19,4 |
37,6 |
0,46 |
183 |
41,2 |
19,5 |
|
|
штаммом ВР-1 |
22,7 |
30,9 |
0,33 |
185 |
38,7 |
23,0 |
|
|
Приморская 4 |
|||||||
|
Контроль (без обработки) |
17,8 |
60,3 |
0,95 |
155 |
56,7 |
19,8 |
|
|
Обработка семян штаммом 062 |
23,0 |
26,6 |
0,21 |
165 |
43,7 |
21,6 |
|
|
штаммом ТМ-464 |
22,7 |
25,6 |
0,26 |
165 |
48,0 |
24,0 |
|
|
штаммом ББ-90 |
19,5 |
24,8 |
0,18 |
160 |
37,5 |
22,0 |
|
|
штаммом ВР-1 |
20,1 |
34,1 |
0,34 |
155 |
48,7 |
20,0 |
|
|
Приморская 86 |
|||||||
|
Контроль (без обработки) |
22,5 |
52,5 |
1,13 |
185 |
41,2 |
21,8 |
|
|
Обработка семян штаммом 062 |
19,8 |
40,6 |
0,70 |
183 |
40,0 |
22,9 |
|
|
штаммом ТМ-464 |
15,6 |
35,9 |
0,50 |
180 |
53,7 |
15,6 |
|
|
штаммом ББ-90 |
24,5 |
41,9 |
1,11 |
190 |
40,0 |
23,8 |
|
|
штаммом ВР-1 |
19,6 |
24,9 |
0,30 |
180 |
35,0 |
21,5 |
*НСР 0,95 = 1,4
Среднеспелый сорт Приморская 4 в климатических условиях отчетного периода после обработки штаммом 062 дал максимальную прибавку урожая: урожайность была 23,0 ц/га, что выше контроля на 5,2 ц/га. Во всех вариантах с обработкой штаммами семян наблюдалось снижение поражения листьев сои сорта Приморская 4 септориозом (до 19,2 %).
При обработке высоковирулентным штаммом ББ-90 отмечено увеличение урожайности на 2,0 ц/га и массы 1000 семян у среднепозднеспелого сорта Приморская 86.
Для повышения эффективности анализа немаловажное значение имеет определение корреляционных отношений между признаками (табл. 2).
Таблица 2 Корреляционная зависимость количественных признаков от основных показателей симбиотической деятельности растений сои по сортам, 2016-2017 гг.
|
Показатели симбиотической деятельности растений |
Урожайность, ц/га |
Масса 1000 зерен, г |
|
|
Приморская 13 |
|||
|
Кол-во клубеньков, шт./раст. |
-0,52 |
-0,94 |
|
|
Масса клубеньков, г/раст. |
-0,31 |
-0,65 |
|
|
Приморская 4 |
|||
|
Кол-во клубеньков, шт./раст. |
-0,74 |
-0,70 |
|
|
Масса клубеньков, г/раст. |
-0,71 |
-0,64 |
|
|
Приморская 86 |
|||
|
Кол-во клубеньков, шт./раст. |
+0,48 |
+0,59 |
|
|
Масса клубеньков, г/раст. |
+0,78 |
+0,88 |
Между изучаемыми показателями у сортов Приморская 13 и Приморская 4 присутствует обратная корреляционная зависимость с сильной и средней связью, что свидетельствует о неоднозначном влиянии штаммов на данные растения сои.
На сорте Приморская 86 установлены прямые корреляции количественных признаков с показателями симбиотической деятельности растений (с количеством клубеньков на растении - средняя связь, с массой клубеньков - сильная связь).
Таблица 3 Влияние инокуляции сои активными штаммами ризобий на некоторые хозяйственно ценные признаки сортов различных групп спелости, 2018 г.
|
Вариант |
Урожай ность*, ц/га |
Отклонение от стандарта, ц/га |
Количество клубеньков, шт./раст. |
Масса клубеньков, г/раст. белка |
Масса 1000 зерен, г |
Содержание в семенах, % |
||
|
белка |
масла |
|||||||
|
Сфера |
||||||||
|
Контроль (без обработки) |
20,9 |
- |
66,2 |
0,75 |
192 |
36,6 |
24,3 |
|
|
Обработка семян |
||||||||
|
штаммом БМ-88 |
21,2 |
+0,3 |
78,9 |
0,82 |
180 |
36,8 |
24,2 |
|
|
штаммом ТБ-589 |
22,6 |
+1,7 |
49,6 |
0,43 |
172 |
37,0 |
24,7 |
|
|
Муссон |
||||||||
|
Контроль (без обработки) |
21,5 |
- |
38,8 |
0,35 |
190 |
38,1 |
23,7 |
|
|
Обработка семян |
||||||||
|
штаммом БМ-88 |
22,8 |
+1,3 |
61,0 |
0,69 |
172 |
39,1 |
22,9 |
|
|
штаммом ТБ-589 |
21,6 |
+0,1 |
26,6 |
0,26 |
175 |
38,4 |
23,5 |
*НСР 0,95 = 1,2
С 2018 г. начато исследование комплементарных связей нового набора штаммов ризобиальных бактерий и сортов сои. В результате изучения влияния штаммов БМ-88, ТБ-589 на сорта сои Сфера и Муссон в природно-климатических условиях Приморского края установлено, что у среднеспелого сорта Сфера максимальная прибавка урожая (1,7 ц/га) получена в варианте с обработкой семян штаммом ТБ-589. Среднепозднеспелый сорт Муссон увеличением урожая отреагировал на обработку штаммом БМ-88. В данном варианте урожайность была 22,8 ц/га, что на 1,3 ц/га выше контроля (табл. 3).
В вариантах с обработкой высоковирулентным штаммом БМ-88 количество клубеньков на корнях сои сортов Сфера и Муссон увеличилось на 18,0 и 57,0 %, а их масса возросла соответственно на 9,0 и 97,0 % по сравнению с контролем.
Показатель «масса 1000 зерен» в опыте был выше в контрольном варианте на двух сортах. На качественный состав семени сои ризобиальные бактерии подействовали неоднозначно: штамм ТБ-589 способствовал незначительному увеличению белка и масла у среднеспелого сорта Сфера, БМ-88 - у среднепозднеспелого сорта Муссон.
При проведении статистического анализа у сорта Сфера были обнаружены прямые корреляции: со средней связью - между количеством клубеньков и массой 1000 зерен (коэффициент корреляции r = +0,47), с сильной связью - между массой клубеньков и массой 1000 зерен (г = +0,69) (табл. 4). У сорта Муссон установлена прямая сильная корреляционная связь (г > 0,66) между показателями симбиотической деятельности растений, урожайностью и содержанием белка в семенах. У двух сортов сои присутствует существенная обратная связь между симбиотическими показателями и содержанием масла в семенах.
Таблица 4 Корреляционная зависимость количественных и качественных признаков от основных показателей симбиотической деятельности растений сои, 2018 г.
|
Показатели симбиотической деятельности растений |
Урожайность, ц/га |
Масса 1000 зерен, г |
Содержание в семенах, % |
||
|
белка |
масла |
||||
|
Сфера |
|||||
|
Кол-во клубеньков, шт./раст. |
-0,82 |
+0,47 |
-0,56 |
-0,97 |
|
|
Масса клубеньков, г/раст. |
-0,94 |
+0,69 |
-0,77 |
-1,0 |
|
|
Муссон |
|||||
|
Кол-во клубеньков, шт./раст. |
+0,91 |
-0,32 |
+0,79 |
-0,82 |
|
|
Масса клубеньков, г/раст. |
+0,96 |
-0,46 |
+0,88 |
-0,90 |